Name: simple and computer-assisted olfactory testing for mice
Uploaded: 2015-06-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 40 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice at JoVE.com

This work is funded by the Swiss National Foundation (31_138429) and Synapsis Foundation for the support of research on Alzheimer&#8217;s disease.

すべての動物の手順は、科学的な目的のために使用される動物の保護に関するEU指令63分の2010 / EUに従っていると地元の動物管理委員会（フリブール、スイスのカントン）によって承認されています。 1.動物の準備<ol><li>実験動物<ol><li>生後3-5カ月のオスの成体野生型およびトランスジェニックマウス（C57BL / 6バックグラウンド）で実験を行います。マウスの三つのグループは、野生型同腹子対照（グループA、Jagged1 FLOX / FLOX 19）と2つの条件付きのKOマウス系統（グループB、Jagged1ncKOおよびC、Jagged1gcKO）に対応しています。 </li><li> 12時間制御明/暗サイクルで換気のよい場所で、標準的な実験室条件下ハウスマウス、食物および水を自由に提供します。 </li></ol></li></ol> 2.実験セットアップ<ol><li>実験アリーナ<ol><li>実験の舞台のために、きれいな滅菌マウスケージを使用する（35センチ長さ×20.5センチメートル幅X 13.5センチメートル高さ）（ 図1A）。 </li><li> 3センチメートル高い新鮮な寝具、番号付きケージに各マウスを割り当てます。ケージを再利用している場合は、臭気感度試験と同様に、臭気及びマウスの間の交差汚染を避けるために、以下の措置をとります。 <ol><li>水側をマーク。 </li><li> 70％エタノール、各側に1つずつを噴霧2ティ​​ッシュペーパーでケージの狭い壁を清掃してください。 </li><li>マウスの遺伝子型に応じてケージを積み重ね、層ボンネットの下に一時的に保管してください。 </li></ol></li></ol></li><li>カメラ<ol><li>ケージ（ 図1A）の底部から58センチメートルでの目的でカスタマイズされた三脚にカメラをマウントします。三脚とケージの位置を固定し、カメラはケージの上部を中心にすることを可能にするためにマークを区切ります。 </li><li> ×240ピクセル320ピクセルでの動画撮影、MOVファイルなどの毎秒15.08フレーム。 </li></ol></li><li>臭い<ol><li> SCENを再懸濁しこれらが可溶性である溶媒中のTS、示されます。 </li><li>嗜好テスト用ピーナッツバターのため。ピーナッツ油（w / vの10％）にピーナッツバターを再懸濁します。 </li><li>回避試験のための純粋な2-メチル（2-MB）酸（98％）を使用します。 </li><li>感受性試験のために、同じマウスのコロニーと背景（C57BL / 6）の女性の尿を使用しています。 <ol><li>便宜上、嗅覚検査に1〜2日前に尿を収集します。ケージグリッド上記の腹とボンネットの下にマウスを拘束して保持します。ケージグリッドの下に尿の滴を収集するためにプラスチック製のペトリ皿を置きます。 </li><li> 1.5mlチューブにそれぞれの女性からの尿を収集し、動物間の変動を標準化するために、すべての尿サンプルを混ぜます。使用するまで-20℃で保管してください。 </li><li>実験の日に、尿を解凍し、10（1:10、1：100; 1：1,000; 1：10,000）の希釈率で再蒸留水で4希釈を行います。 </li></ol></li></ol></li></ol>3.嗅覚テスト注：このプロトコルでは悪臭が意図的に強く誘引（ピーナッツバターと女性の尿）や強い撥（2-MB酸）として認識されている選択されている15。これは、嗅覚動作との干渉の可能性を排除するために回避試験の前に心地よい匂いに対する嗜好および感度試験を行うことが重要です。それにもかかわらず、簡略化のために、本論文では、嗜好および回避テストは、両方の知覚テストで説明されます。各行動セッションは馴化段階で始まります。 <ol><li>馴化フェーズ<ol><li>クリーン割り当てケージに動物を置き、5分（ 図1B）のために見ていきましょう。実験ケージの環境はホームケージによく知られているので、この短い時間は慣れのために可能にするのに十分です。 </li><li>感受性試験が1日で完了した場合、アプリケーションシートの前に一度だけ馴化を行います最高希釈した臭気のN。感受性試験は、異なる日に行われた場合、それぞれの日に新たなクリーンケージに馴化段階が必要です。 </li></ol></li><li>知覚テスト<ol><li>馴化後、カメラをアクティブにし、すぐに底部（ 図1C）から約10cmで、ケージの反対側の壁に心地よい香り（ピーナッツバター）60μlのニュートラルな香り（水道水）の60μLをピペット。 </li><li>マウスが2分（ 図1D）のための臭いを調べてみましょう。その後、カメラをオフにします。 </li><li>この時点で、次のマウスは馴化相から開始に進みます。撥臭（2-MB酸）および水60μlの60μlのを適用することによって、まったく同じ方法で回避テストを実行します。 </li></ol></li><li>感受性試験<ol><li> 1：次の順序で女性の尿の濃度を増加する雄マウスの吸引しきい値を評価万。 1：1,000; 1：100。 1：10純粋な尿。 </li><li>馴化後、以前に3.2.1で説明したように実験者がピペットで移し最高希釈に各マウスを公開します。 </li><li>ビデオカメラの2分の時間枠内で、水に対する尿の探索行動を記録します。全てのマウスのコホートには最高希釈（1：10,000）について試験した後に上記のように、尿中のより高い濃度にさらします。 </li></ol></li></ol> 4.事後データ分析注：記載されている全ての行動試験は、データ分析の指示に従って、 事後処理されます。 <ol><li> WindowsシステムのためのImageJでMOVファイルを開きます<ol><li> http://www.apple.com/quicktime/downloadからカスタマイズされた設定を使用して、Javaのクイックタイムをインストールします。 </li><li> ImageJのウェブサイト（http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/qt-capture.html）からクイックタイムプラグインをインストールしてください。 </li><li>ライブラリextensへ：QTJava.zip（プログラムファイルのQuickTime QTSystem C）をインポートImageJのイオン（.ImageJ JRE libに extに）。 </li><li>プラグインフォルダにもコピーQTJava.zipとはQTJava.jarように名前を変更します。 </li><li>マクロフォルダ（ImageJのプラグインマクロ）に結合した6スクリプトをインストールします。 </li><li>オープンImageJのクイックタイムプラグイン、その後近くのImageJをコンパイルして実行します。 </li><li>クイックタイムを使用して&gt; ImageJのを再度開き、[ファイル]&gt; [インポートを使用してMOVファイルを開きます。 </li></ol></li><li>映像調整<ol><li>ビデオファイルは、ImageJの中で開かれると、実験者は、ケージ（T0）に臭気物質をピペットで入れた時から定数2分探査を得るためにビデオをカット。 （スタック ToolsSliceリムーバー ImageJのイメージ）1の増分を用いて前のフレームをT0に対応するフレームを特定し、削除します。 2分探査を超えてすべてのフレームを削除するには、同じコマンドを使用します。 </li><li>ケージが中心とされていることを確認し、必要な使用は、画像&gt;変換場合&gt; [回転]コマンドは、それを配置します。 </li></ol></li><li>見よO処理 注：ビデオ処理は、完全にコンピュータ支援であり、この紙に伴うマクロコマンドを使用しています。 <ol><li> 127ピクセル×218ピクセルの大きさのケージの上の領域を制限するために、プラグイン&gt;マクロ&gt;実行コマンドからのステップ1マクロを実行します。ケージ（ 図2、ステップ1）の上に固定された四角形を移動します。 </li><li>ステップ2マクロ（ 図2、ステップ2）を用いて、関心領域（ROI）にケージの領域をトリミング。 </li><li>信号分散を斑点除去し、フィルタリング、閾値信号を割り当てることにより、背景からマウスの画像を抽出するために、ステップ3のマクロを使用してください。 Z軸プロットで出力値は2分探索時の「水室」のROI内の移動、マウスの影の強度に対応する、平均グレー値を示します。スプレッドシートファイル内のROI（ 図2、ステップ3）に従って命名ワークシートに結果をコピーします。 </li><li>ステップ4マクロを使用しますROI「臭気室」でのマウスの平均グレイ値を抽出します。 4.3.3と同じスプレッドシートファイル内のROI（ 図2、ステップ4）に従って命名ワークシートに結果をコピーします。 </li><li>さらにROI「水境界」でのマウスの動きの分析を制限するために、ステップ5のマクロを使用しています。 4.3.3と同じスプレッドシートファイル内のROI（ 図2、ステップ5）に従って命名ワークシートに結果をコピーします。 </li><li> ROI内のマウスの動きの分析を制限するには、「臭気周囲は「ステップ6マクロを使用しています。 4.3.3（ 図2、ステップ6）のようにROIのスプレッドシートファイルに従って名前が付けられ、ワークシートに結果をコピーします。 </li><li>すべてのビデオを処理して、動物あたりのフレーム数の整合性をチェックします。ここでは、2分探査セッションに対応する1,810フレームのすべての動物を記録します。 </li><li>各動物について、各ROIのソートフレーム平均グレイVAとフレームの数は、1秒に対応する値で0除算より大きく梅毒および各ROIで過ごした秒を取得します。 </li></ol></li></ol> 5.統計分析<ol><li>各試験のためにhttp://www.real-statistics.com/one-way-analysis-of-variance-anova/homogeneity-variances/上で利用可能な式を使用してバートレットの検定により群/遺伝子型内での分散の均一性を確認します。 </li><li>時間がバートレットのテストの結果に応じて、同じまたは不等分散を仮定して無指向スチューデントt検定を使用して1つのグループ内の臭気に対する水で過ごした間に引力および回避試験では、比較を行います。ボンフェローニのポストホック検定で一方向ANOVAによって遺伝子型との間に水と一緒に過ごした時間を差し引いた臭いと一緒に過ごした時間を比較します。 </li><li>感度テストではウォートと一緒に過ごした時間から減算臭いと一緒に過ごした時間の比較を分析しますボンフェローニの事後テストで一方向ANOVAによる尿の特定の希釈でグループ間のR。ボンフェローニの事後テストと繰り返しで2ウェイANOVAによって成長して臭気濃度にグループ間の感度を比較します。 </li><li>アトラクションと回避試験における遺伝子型と処置との間の相互作用は、ボンフェローニのポストホック検定を用いて2方向ANOVAによって調査されています。 </li></ol>

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There is no conflict of interest.

匂いの知覚、匂いに対する水と感度対匂いの判別：このプロトコルで提案されたテストは、マウスにおける先天性嗅覚行動のさまざまな側面を評価することを可能にします。このプロトコルは、以前に15を示す嗜好と回避スケールに従って任意の臭いにも適用することができます。プロトコルは探索活動に基づいているので、それはマウスが彼らの動きに影響を与え、嗅覚探査を妨害する可能性の運動障害や不安を表示しないことが重要です。記載される試験は、しかしながら、それらは、成人女性または高齢のマウスにおいても嗅覚を調査するために適合させることができる成体雄マウスを意図しています。 1）は、少なくとも3日の間隔で各テストを実行します。マウスでは、このような研究調査嗅覚を始める前に、次の側面に注意を払うことが重要です。回避は、嗅覚メモリ20の干渉を最小化するために最後のように試験されるべきです。 2）Eを実行しますマウスは、それらの活性サイクル21であり、光の調光光源を使用し、好ましくは夕方に一日の同時にxperiments、。また、嗅覚機能22の可能な概日変化に対して定義された時間のコントロールで嗅覚テストをスケジューリングします。 3）このような酸のような撥臭気物質を使用する回避試験を開始する前に、実験室で一度に一つのケージを持参し、層流フードの下にケージを保ちます。このステップは、付臭剤に慣れを回避し、同じグループ内のより均一な応答を得ることが重要です。 4）一時的に、同じケージの全てのマウスは、付臭剤に曝露されるまでに試験されたマウスを分離臭気物質の汚染を最小限に抑えるために、 5）異なる株は、付臭剤23に暴露され、不均一な方法で振る舞うことができるので、同系統の動物を使用します。 6）実験者は常に白衣を着用し、臭気の混合を防止するために、動物間の手袋を変更する必要があります。 7）演算子をピペッティングした後、嗅覚探査中にマウスに任意の交絡刺激を防ぐために、ゆっくりと1.3メートルの距離でケージから移動する必要があります。マウスは異なる程度に両室を探索することが期待されているので、1室のみで平均グレー値を表示する8）マウスは、研究から除外されるべきです。 それは速い完了のであり、そのようなImageJのようなオープンソースソフトウェアの利点を取る、それはセットアップすることは非常に簡単である安価な材料を使用しています。記載された方法は、他のプロトコルに比べていくつかの利点を提供しています。さらに、我々は準備ができているマクロをインストールすると、どれが任意のアリーナと2つ以上の匂い周囲にカスタム使用して適合させることができる提供しています。これは、割り当てられた臭気の周囲で過ごした時間だけが嗅覚活性の尺度であることに留意しなければなりません。各チャンバーに費やされた時間は、マウスの探索活動の読み出しを与え、嗅覚行動の唯一の概算であるのに対し。他の方法と同様に、統計的検出力は、群あたりの動物の数を増加させることによって得ることができます。 蒸気圧と配達時間12に対して自動的に制御することができますolfactometers、使用して嗅覚検査と比較して- 14、提案されたプロトコルは、あまり制御されています。それにもかかわらず、すべての悪臭は、定義された距離で、同じ時間ウィンドウに対して、等量に塗布されます。このように、一定のこれらの変数を維持し、このテストでは嗅覚計は必要ありません。フレームの固定数を得るために調整し、各映像の切断に必要な時間になるこのプロトコルの他の潜在的な制限があります。それにもかかわらず、同一のコンピュータ支援分析は臭気ポートが特定の時間に臭いを提供して、より洗練されたセットアップに使用することもできます。この場合、ビデオ切断を自動的に設定することができます。 綿パッドIを使用して他のプロトコルと比較して魅力と回避をテストするために臭いとmpregnated、本プロトコルは、単一の実験セッションにおける新規臭気および中性臭気（水）15,16との間の嗅覚差別に関する追加情報を提供します。また、プロトコルは、実験目詰まりを必要とせず、完全に公平なコンピュータ支援解析を使用して単一の実験で行うことができます。 これらの簡単な試験は、アルツハイマー病またはパーキンソン病のマウスモデルにおける神経障害の進行を監視し、嗅覚伝達のメカニズムを調べるために使用することができます。

嗅覚は、哺乳動物において最も発達し、重要な感覚機能の一つです。嗅覚活性の減損は、最悪のシナリオでも、生存中で、食物摂取、社会的行動に影響を与えてもよいです。ヒトでは、嗅覚の劣化は、年齢依存1であり、神経疾患2の強力な予測因子であると考えられる- 6。ペンシルバニア大学によって開発された嗅覚同定試験は、現在、早期神経学的欠損7を評価し、高い確率で認知症8,9の進行を予測することができるほとんどの、使用される非侵襲的、定量化、診断テストの1つを表します。 嗅覚系のアクセシビリティとげっ歯類における嗅覚の隆起は、嗅覚機能10のメカニズムに対処する研究の強いラインを巻き起こしました。我々は以前のシグナリングRECEPTの機能の喪失を示しましたまたはNotch1のは、嗅覚回避11に影響を与えます。このプロトコルでは、嗅覚の性能を研究するために、ニューロンやグリアにおけるシグナリングリガンド、Jagged1を欠損したマウスを使用します。 先天性嗅覚は知覚、匂いと嗅覚感度4の間の識別の3つのパラメータによって定義されています。げっ歯類における嗅覚検査は、様々な方法で行うことができ、いくつかの行動研究は、特定の蒸気濃度で、かつ正確な時間枠12に動物の匂いを提供olfactometersの使用にする- 14。それにもかかわらず、この機器は高価であり、唯一の専門の施設で利用可能です。我々の研究では、揮発性の香りを使用して実施される、簡単、迅速かつ再現性の嗅覚試験プロトコルを提供します。テストは、誘引や忌避臭にメジャー知覚を説明し、香りと水11,15,16との区別を評価します。 wは、同じ設定を使用しますeはまた、異なる濃度16,17で臭いに対する感度を測定することができます。ページや同僚18の仕事に触発され、事後コンピュータ支援ビデオ処理は、実験的な盲検化の必要性と実験全体を実行する一人のために可能にすることなく、公平な結果を提供します。 このプロトコルは、マウスにおいて嗅覚挙動を研究するための出発点を提供することを目的とします。

<table><tbody><tr><td>Mouse cage</td><td>Italplast (Italy)</td><td>1144B</td><td>36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height</td></tr><tr><td>Chipped wood bedding</td><td>Abedd (Austria)</td><td>LTE E-001</td><td>3 cm high</td></tr><tr><td>Peanut butter</td><td>Migros (Switzerland)</td><td>NA</td><td>1:10</td></tr><tr><td>2-Methylbutyric</td><td>Sigma Aldrich (Switzerland)</td><td>W269514</td><td>Pure</td></tr><tr><td>Female urine from fertile females of same mouse strain</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Dilution series</td></tr><tr><td>Camera</td><td>Olympus (US)</td><td>Camedia C-8080</td><td>MOV files</td></tr><tr><td>Quicktime for Java (Windows)</td><td>Apple (USA)</td><td>NA</td><td>video plugin for visualizing MOV files</td></tr><tr><td>ImageJ for Windows</td><td>NIH (USA)</td><td>NA</td><td>Video Processing/Analysis</td></tr></tbody></table>

simple and computer-assisted olfactory testing for mice

嗅覚は、種間で高度に保存されており、再生と生存のために必要とされます。 ヒトでは、嗅覚はまた、加齢に伴って影響を受けている感覚の一つであり、神経変性疾患の強力な予測因子です。したがって、嗅覚試験を早期に神経障害を検出するための非侵襲的診断法として使用されています。嗅覚ネットワーク感受性の根底にあるメカニズムを理解するためには、げっ歯類における嗅覚の研究は、過去10年間で勢いを得ています。 ここでは、事前の食料や水の制限を必要とせずに、マウスにおける先天性匂い知覚と感度の非常にシンプルな、時間効率的かつ再現性の嗅覚検査方法を提示します。試験をマウスに慣れた環境で実行され、香りや匂い物質の曝露の2分のセッションのみを必要とします。解析は、ImageJのにコンピュータ支援コマンドを使用して、 事後に実行されるためであることができます一研究者が最初から最後まで行きました。 このプロトコルは、特別なハードウェアや設定を必要とせず、嗅覚と感度のテストに興味の任意の実験室のために示されています。

知覚テストは、2 MBの酸にピーナッツバターと回避に魅力を測定します。マウスを3群に試験され、「臭気境界」に費やされた時間は、水と比較して定量化されます。嗜好試験では、対照群Aは、水（T 8 = 2.52、P &lt;0.05）に比べて臭気への重要な優先度を表示します。一方、グループBは、ピーナッツバターに有意な魅力を示していないと水（T 6 = 3.22、P &lt;0.05）でより多くの時間を費やしています。したがって、対照群A（F 1,7 = 26.39、P &lt;0.005）とは異なる動作をします。また、グループCには差別を示さず、水とピーナッツバター（T 8 = 0.78、P = 0.45）とほぼ同じ時間費やしています。全体的に、三つのグループは、異なる動作を（F 2,9 = 19.83、P &lt;0.005）と遺伝子型と治療（ピーナッツバターと水）の間に有意な相互作用がある（F 2,1 = 4.90、P &lt;0.005） （ <st栄&gt;図3A）。 2-MB酸に応答して、対照群には、回避反射が表示され、その結果、水（T 8 = 2.67、p &lt;0.05）でより多くの時間を費やしました。同様に、グループBは2-MB酸（T 6 = 3.71、P &lt;0.01）に顕著回避反射を示しています。一方、グループCは、二つの匂いとを区別せず、2-MB酸と水（T 8 = 2.2、P = 0.6）（ 図3B）と同程度の時間を費やしています。全体的に、回避反応を比較すると、3つのグループが重要な異なる挙動（F 2,9 = 0.76、P = 0.49）、結果として治療と遺伝子型との間には相互作用が（F 1、2 = 0.52、Pありませんが表示されません= 0.63）。 女性の尿への嗅覚感度テストでは、曲線は、（水と一緒に過ごした時間を差し引いた尿と一緒に過ごした優先度=時間）水に対する異なる濃度で尿を優先表示されます。目で上昇濃度で尿に魅力を増加1,000表示されます。テストでは、我々は、対照群Aが1の希釈で尿を吸引しきい値を持っていることを確認します。グループBとCの表示アトラクション（1:10）〜100倍高いしきい値A群（F 2,9 = 4.78、P &lt;0.05）と比較して。グループB及びCの表示同等感度曲線（F 1,19 = 0.36、p = 0.55）。グループ間の感度を比較すると、グループA、グループBとC（F 2,19 = 7.12、p &lt;0.01）（ 図4）と比較して、女性の尿へのより高い感度を有するように思われます。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/52944/52944fig1.jpg" /> 図1：嗅覚テストを実行するために使用されたセットアップの表現。 ケージ上記（A）カメラ。 （B）マウスは、5分の馴化期間のケージに入れています。 （C）ODO暴言はケージの壁にピペットで。 （D）水に対する付臭剤の探索活動は、2分のウィンドウにテストされます。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/52944/52944fig2.jpg" /> 図2：ImageJのにマクロコマンドを使用して、コンピュータ支援の映像処理のワークフローの例では、グループAからマウスを指す1:10希釈で尿に暴露され<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52944/52944fig2large.jpg" target="_blank">、この図の拡大版を表示するには、こちらをクリックしてください。</a> <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/52944/52944fig3.jpg" /> 図3：（グループC用のn =グループA 5、N = 4のグループBおよびn = 5）で代表嗅覚嗜好および回避試験の結果 3つのグループのマウスは、（A）ピーナッツに露出されているが2分探査セッションのTERと（B）2-MB酸。水（灰色の丸）対臭（黒丸）を探索する合計時間が示されています。グループ間の嗅覚行動に有意な差は黒い水平バー、アスタリスクで示されています。グループ内の臭気と水との間の時間をスニッフィングに有意な差は、灰色の水平バー、アスタリスクで示されています。 * P &lt;0.05、** P &lt;0.01、*** P &lt;0.01（灰色の水平バー、スチューデントt検定;黒い水平バー、一方向ANOVA）。エラーバーは平均値（SEM）の標準誤差です。 <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/52944/52944fig4.jpg" /> 図4：女性の尿の濃度の増加に対する感受性試験の代表的な結果を水と一緒に過ごした時間を差し引いた異なる濃度の尿で探索時間によって与えられた選好指数曲線は、そのグループを示しています。（N = 5）群Bと比較して尿に最も高い感度を有した（n = 4）およびC（N = 5）。 * P &lt;0.05（黒い水平バー、一方向ANOVA）。エラーバーはSEMです。

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Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

シンプルでコンピュータ支援嗅覚テストマウス用

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

simple-and-computer-assisted-olfactory-testing-for-mice

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

10.0K ビュー.  University of Fribourg. We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing. 

ビデオ: Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land (Barnes) mazes. Improved performance over sessions or trials is thought to reflect learning and memory of the escape cage/platform location. Considered less stressful than water mazes, the Barnes maze is a relatively simple design of a circular platform top with several holes equally spaced around the perimeter edge. All but one of the holes are false-bottomed or blind-ending, while one leads to an escape cage. Mildly aversive stimuli (e.g.&#160;bright overhead lights) provide motivation to locate the escape cage. Latency to locate the escape cage can be measured during the session; however, additional endpoints typically require video recording. From those video recordings, use of automated tracking software can generate a variety of endpoints that are similar to those produced in water mazes (e.g.&#160;distance traveled, velocity/speed, time spent in the correct quadrant, time spent moving/resting, and confirmation of latency). Type of search strategy (i.e.&#160;random, serial, or direct) can be categorized as well. Barnes maze construction and testing methodologies can differ for small rodents, such as mice, and large rodents, such as rats. For example, while extra-maze cues are effective for rats, smaller wild rodents may require intra-maze cues with a visual barrier around the maze. Appropriate stimuli must be identified which motivate the rodent to locate the escape cage. Both Barnes and water mazes can be time consuming as 4-7 test trials are typically required to detect improved learning and memory performance (e.g.&#160;shorter latencies or path lengths to locate the escape platform or cage) and/or differences between experimental groups. Even so, the Barnes maze is a widely employed behavioral assessment measuring spatial navigational abilities and their potential disruption by genetic, neurobehavioral manipulations, or drug/ toxicant exposure.

The dry-land Barnes maze is widely used to measure spatial navigation ability in response to mildly aversive stimuli. Over consecutive days, performance (e.g.&#160;latency to locate escape cage) of control subjects improves, indicative of normal learning and memory. Differences between rats and mice necessitate apparatus and methodology changes that are detailed here.

小型·大齧歯類モデルとバーンズ迷路テスト戦略

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

行動学

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

マウスにおける臭気差別と馴化のためのテスト

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

モリス水迷路試験：マウス系統およびテスト環境の最適化

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent studies demonstrate that environmental enrichment decreases adiposity, increases energy expenditure, resists diet induced obesity, and causes cancer remission and inhibition in mice. EE typically consists of larger living space, a variety of &#8216;toys&#8217; to interact with, running wheels, and can include a number of other novel environmental changes. All of this fosters a more complex social engagement, cognitive and physical stimulations. Importantly, the toy location and type of toy is changed regularly, which encourages the mice to adapt to a frequently changing and novel environment. Many variables can be manipulated in EE to promote health effects in mice. Thus these approaches are difficult to control and must be properly managed to successfully replicate the associated phenotypes. Therefore, the goal of this video is to demonstrate how EE is properly set up and maintained to assure a complex, challenging, and controlled environment so that other researchers can easily reproduce the protective effects of EE against obesity and cancer.

Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

豊かな環境の住宅マウス用のプロトコル

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Treadmill Fatigue Test: A Simple, High-throughput Assay of Fatigue-like Behavior for the Mouse

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of current interventions to adequately treat fatigue in all patients leaves a need for new treatment options. Despite the therapeutic need and importance of preclinical research in helping identify promising novel treatments, few preclinical assays of fatigue are available. Moreover, the most common preclinical assay used to assess fatigue-like behavior, voluntary wheel running, is not suitable for use with some strains of mice, may not be sensitive to drugs that reduce fatigue, and has relatively low throughput. The current protocol describes a novel, non-voluntary preclinical assay of fatigue-like behavior, the treadmill fatigue test, and provides evidence of its efficacy in detecting fatigue-like behavior in mice treated with a chemotherapy drug known to cause fatigue in humans and fatigue-like behavior in animals. This assay may be a beneficial alternative to wheel running, as fatigue-like behavior and potential interventions can be assessed in a greater number of mice over a shorter time frame, thus permitting faster discovery of new therapeutic options.

Fatigue is a common, undertreated and frequently poorly-understood symptom in many diseases and disorders. New preclinical assays of fatigue may help to improve current understanding and future treatment of fatigue. To that end, the current protocol provides a novel means of measuring fatigue-like behavior in the mouse.

トレッドミル疲労試験：マウスの​​疲労のような挙動のシンプルな、ハイスループットアッセイ

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of ...

Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible circuitry. In addition, this area's unique ability to generate new neurons throughout an organism's lifetime makes it an attractive system for developmental and regenerative biologists alike. Such interest necessitates a means for a quick, yet reliable assessment of olfactory function. Many tests of olfactory ability are complex, variable or not specifically designed for mice. Also, some tests are sensitive to memory deficits as well as defects in olfactory abilities, confounding obtained results.
Here, we describe a simple battery of tests designed to identify defects in olfactory sensitivity and preference. First, an initial general health assessment allows for the identification of animals suitable for further testing. Second, mice are exposed to various dilutions of scents to ascertain whether there is a threshold difference. Third, mice are presented with various scents, both attractive and aversive, that allow for the assessment of olfactory preference. These simple studies should make the initial characterization of olfactory behavior accessible for labs of varied resources and expertise.

Fundamental, yet unique properties of the rodent olfactory system have led to its increasing study among biologists. A relatively simple assessment of its function is then also needed. Here we describe sensitive tests for the characterization of mouse olfactory sensitivity and preference.

成体マウスでの嗅覚行動試験

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible ...

生物学

吸入環境汚染物質によるマウスの嗅覚障害の評価

Studying the Effects of Inhaled Environmental Pollutants on Olfactory Function in Mice

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental pollutants exposure may impair olfaction; thereby, there is an urgent need for methods to evaluate the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfaction. Mice are ideal models for olfactory experiments because of their highly developed olfactory system and behavioral characteristics. To assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice, a detailed buried food test and social odor discrimination experiment is provided, including the experiment preparation, the selection and construction of experimental facilities, the testing process, and indexes of time. Meanwhile, timekeeping equipment, operational details, and the experimental environment are discussed to ensure the success of the assay. Zinc sulfate is used as the treatment to demonstrate the feasibility of the experimental approach. The protocol provides a simple and clear operational process for assessing the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice.

著者スポットライト:空気中の汚染物質の嗅覚効果の評価-埋設食品と社会的臭気試験

This paper provides a detailed description of the buried food test and social odor discrimination experiment to assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice.

マウスの嗅覚機能に及ぼす吸入環境汚染物質の影響の研究

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental ...

環境学

Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process and may be a useful behavioral marker for early detection. Earlier detection in neurodegenerative disease is a major goal in the field because this is when neuroprotective therapies have the best potential to be effective. Therefore, in preclinical studies testing novel neuroprotective strategies in rodent models of neurodegenerative disease, olfactory assessment could be highly useful in determining therapeutic potential of compounds and translation to the clinic. In the present study we describe a battery of olfactory assays that are useful in measuring olfactory function in mice. The tests presented in this study were chosen because they measure olfaction abilities in mice related to food odors, social odors, and non-social odors. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of Parkinson&#8217;s disease as well as in testing potential disease-modifying therapies.

Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

神経変性疾患のマウスモデルのための嗅覚アッセイ

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process ...

シンプルでコンピュータ支援嗅覚テストマウス用

要約

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小型·大齧歯類モデルとバーンズ迷路テスト戦略

マウスにおける臭気差別と馴化のためのテスト

モリス水迷路試験：マウス系統およびテスト環境の最適化

豊かな環境の住宅マウス用のプロトコル

トレッドミル疲労試験：マウスの疲労のような挙動のシンプルな、ハイスループットアッセイ

成体マウスでの嗅覚行動試験

マウスの嗅覚機能に及ぼす吸入環境汚染物質の影響の研究

マウスの嗅覚機能に及ぼす吸入環境汚染物質の影響の研究

マウスの嗅覚機能に及ぼす吸入環境汚染物質の影響の研究

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マウスの嗅覚機能に及ぼす吸入環境汚染物質の影響の研究

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トレッドミル疲労試験：マウスの疲労のような挙動のシンプルな、ハイスループットアッセイ