This work is funded by the Swiss National Foundation (31_138429) and Synapsis Foundation for the support of research on Alzheimer&#8217;s disease.

모든 동물의 절차는 과학적인 목적으로 사용되는 동물의 보호에 관한 유럽 연합 지침 63분의 2,010 / 유럽 연합 (EU)에 따라하고 (프리 부르 주, 스위스) 지역의 동물 관리위원회에 의해 승인됩니다. 1. 동물 준비 <ol><li> 실험 동물 <ol><li> 성인 남성 야생 유형과 연령 3-5 개월 형질 전환 생쥐 (C57BL / 6 배경)에 대한 실험을 수행합니다. 마우스의 세 그룹은 야생형 한배의 새끼 컨트롤에 해당합니다 (그룹, Jagged1 flox / flox 19)와 두 개의 조건부 KO 마우스 라인 (B 군, Jagged1ncKO와 C, Jagged1gcKO). </li><li> 12 시간 제어 어두운 / 라이트 사이클 통풍 표준 실험실 조건에서 주택의 마우스, 그리고 음식과 물을 광고 무제한을 제공합니다. </li></ol></li></ol> 2. 실험 설정 <ol><li> 실험 무대 <ol><li> 실험 분야의 경우, 깨끗한 살균 마우스 케이지를 사용 (36cm 길이 × 20.5 cm 가로 x 13.5 cm 높이) (그림 1A). </li><li> 3cm 높은 신선한 침구와 번호가 케이지에 각 마우스를 할당합니다. 케이지를 재사용하는 경우, 악취 감수성 시험에서와 같이, 악취와 마우스 사이의 교차 오염을 방지하기 위해 다음과 같은 조치를 취해야. <ol><li> 물 측을 표시합니다. </li><li> 70 % 에탄올, 각면에 대해 하나의 분무 두 조직의 서류와 함께 케이지의 좁은 벽을 청소합니다. </li><li> 마우스의 유전자형에 따라 새장을 더미와 층류 후드 아래에 일시적으로 저장합니다. </li></ol></li></ol></li><li> 카메라 <ol><li> 케이지 (그림 1A)의 바닥에서 58cm의 목적으로 사용자 정의 삼각대에 카메라를 탑재합니다. 삼각대와 케이지의 위치를​​ 고정하고 카메라가 케이지의 상단을 중심으로 할 수 있도록 마크 구분. </li><li> X 240 픽셀, MOV 파일로 초당 15.08 프레임 320 픽셀의 비디오를 녹화. </li></ol></li><li> 냄새 <ol><li> 인 scen을 재현 탁표시된 경우 TS, 용매에있는 이들은 가용성이다. </li><li> 환경 테스트 사용 땅콩 버터하십시오. 땅콩 기름, 땅콩 버터 (/ V w 10 %)을 재현 탁. </li><li> 회피 시험 사용 순수 2 Methylbutyric (2 MB) 산 (98 %)를 참조하십시오. </li><li> 감도 테스트를 위해, 같은 마우스 식민지와 배경 (C57BL가 / 6)에서 여성의 소변을 사용합니다. <ol><li> 편의를 위해 후각 시험 1 ~ 2 일 전에 소변을 수집합니다. 제지 및 케이지 그리드 위의 배와 후드 아래에 마우스를 누르고 있습니다. 케이지 그리드에서 소변의 방울을 수집하는 플라스틱 페트리 접시를 놓습니다. </li><li> 1.5 ML 튜브의 각 여성에서 소변을 수집과 동물 사이의 변화에​​ 대한 정상화 모든 소변 샘플을 섞는다. 사용할 때까지 -20 ℃에서 보관하십시오. </li><li> 실험 날에, 소변을 해동하고 10의 희석 배수에 증류수 4 희석을 수행 (1:10 1 : 100, 1 : 1000, 1 : 10,000). </li></ol></li></ol></li></ol>3. 후각 테스트 참고 : 강한 유인 (땅콩 버터와 여성의 소변) 또는 강한 반발 (2-MB 산) (15)으로 인식되어 의도적으로 선택되었습니다이 프로토콜 냄새합니다. 또한 후각 동작과 간섭의 가능성을 제거하기 위해 회피 시험에 앞서 쾌적한 냄새로 선호도 민감도 시험을 실시하는 것이 중요하다. 그럼에도 불구하고, 본 논문에서는 환경 설정 및 회피 시험의 단순화를 위해, 모두 인식 테스트에서 설명한다. 각 행동 세션은 습관화 단계로 시작합니다. <ol><li> 요법 이니 단계 <ol><li> 깨끗한 할당 새장에 동물을 배치하고 5 분 (그림 1B)에 대해 알아 보자. 실험 케이지 환경 홈 케이지에 익숙하기 때문에, 짧은 시간 습관화을 허용하기에 충분하다. </li><li> 감수성 시험 하루에 완료되는 경우, 응용 프로그램, 습관화 전에 한번만 수행가장 높은 희석 냄새 명. 감수성 시험은 다른 날에 수행되는 경우, 각각의 날에 새로운 깨끗한 케이지 습관화 단계가 필요하다. </li></ol></li><li> 인식 테스트 <ol><li> 습관화 이후, 카메라를 작동하고 바로 아래쪽 (도 1C)에서 약 10cm에서 케이지의 대향 벽 상 쾌적한 향기 (땅콩 버터) 60 μL 및 중성 향기 (수돗물)의 60 μL 피펫. </li><li> 마우스가 2 분 (그림 1D)의 냄새를 알아 보자. 그 후, 카메라의 전원을 전환합니다. </li><li> 이 시점에서, 다음 마우스 습관화 단계부터 진행. 발수 냄새 60 μL (2-MB 산) 및 물 60 μl를 가하여 정확히 동일한 방식으로 회피 시험한다. </li></ol></li><li> 감도 테스트 <ol><li> 1 : 다음과 같은 순서로 여성의 소변 농도 증가에 수컷 마우스의 임계 흡착 평가 10000; 1 : 1000; 1 : 100; 1 :(10)과 순수한 소변. </li><li> 습관화되면, 이전에 3.2.1에 설명 된대로 실험에 의해 피펫 가장 높은 희석 각 마우스를 노출. </li><li> 비디오 카메라에서 2 분의 시간 프레임 내에서, 물 대 소변의 탐색 동작을 기록한다. 모든 마우스는 코호트 높은 희석 (1 : 10,000)에 대해 시험 한 후 전술 한 바와 같이, 소변의 높은 농도에 노출. </li></ol></li></ol> 4. 사후 데이터 분석 참고 : 설명하는 모든 행동 테스트는 데이터 분석 지침에 따라 사후 처리됩니다. <ol><li> Windows 시스템 ImageJ에에서 MOV 파일을 엽니 다 <ol><li> http://www.apple.com/quicktime/download에서 사용자 정의 된 설정을 사용하여 자바에 대해 빠른 시간을 설치합니다. </li><li> ImageJ에 웹 사이트 (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/qt-capture.html)에서 빠른 시간 플러그인을 설치합니다. </li><li> 라이브러리 extens에 ( 프로그램 파일 퀵타임 QTSystem C) QTJava.zip 가져 오기ImageJ에 이온 (.ImageJ JRE lib 디렉토리 내선). </li><li> 플러그인 폴더에 복사하여 QTJava.zip 및 QTJava.jar로 이름을 바꿉니다. </li><li> 매크로 폴더에 첨부 된 여섯 스크립트를 설치 (ImageJ에 플러그인 매크로). </li><li> 오픈 ImageJ에 그 후 가까운 ImageJ에를 컴파일하고 빠른 시간 플러그인을 실행합니다. </li><li> 빠른 시간 사용&gt; ImageJ에를 다시 열고 파일&gt; 가져 오기를 사용하여 MOV 파일을 엽니 다. </li></ol></li><li> 영상 조정 <ol><li> 비디오 파일은 ImageJ에 오픈되면, 실험자 케이지 (T0)에 방향제를 피펫 팅 된 시간에서 상수 2 분 탐색을 얻기 위해서 영상을 잘랐다. (스택 ToolsSlice 제거 ImageJ에 이미지) 1 단위를 사용하여 이전 프레임을 T0에 해당하는 프레임을 확인하고 제거합니다. 2 분 탐사를 초과하는 모든 프레임을 삭제 같은 명령을 사용합니다. </li><li> 케이지가 중앙에 있는지 확인하고 필요한 사용은 이미지&gt; 변환하는 경우&gt; 회전 명령을 정렬 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 보라O 처리 참고 : 비디오 처리는 완전히 컴퓨터 보조이며,이 종이를 동반 매크로 명령을 사용합니다. <ol><li> 127 픽셀 X 218 픽​​셀 크기의 케이지에 영역을 제한하기 위해 플러그인&gt; 매크로&gt; 실행 명령의 1 단계 매크로를 실행합니다. 케이지 (그림 2, 1 단계)을 통해 고정 된 사각형을 이동합니다. </li><li> 단계 2 매크로 (도 2, 단계 2)를 이용하여 관심 영역 (ROI)의 영역에 케이지 영역 자르기. </li><li> , 임계 값 신호를 할당 얼룩 제거 및 신호 변동을 필터링하여 배경으로부터 마우스 이미지를 추출하는 단계 3 매크로를 사용. Z 축은 곡선의 출력값은 2 분 동안 탐사 &quot;수조&quot;의 ROI 내에 움직이는 마우스 섀도우의 강도에 대응하는 평균 그레이 값을 나타낸다. 스프레드 시트 파일의 투자 수익 (ROI) (그림 2, 3 단계)에 따라 이름이 워크 시트에 결과를 복사합니다. </li><li> 에 4 단계 매크로를 사용하여투자 수익 (ROI) &quot;냄새 실&quot;에서 마우스의 평균 회색 값을 추출. 4.3.3에서와 같은 스프레드 시트 파일의 투자 수익 (ROI) (그림 2, 4 단계)에 따라 이름이 워크 시트에 결과를 복사합니다. </li><li> 상기 ROI &quot;물 경계&quot;에서 마우스의 움직임 분석을 제한하기 위해 단계 5 매크로를 사용한다. 4.3.3에서와 같은 스프레드 시트 파일의 투자 수익 (ROI) (그림 2, 5 단계)에 따라 이름이 워크 시트에 결과를 복사합니다. </li><li> ROI &quot;냄새 경계&quot;에서 마우스의 움직임 분석을 제한하는 단계 6 매크로를 사용한다. 4.3.3에서와 투자 수익 (ROI) 스프레드 시트 파일 (그림 2, 6 단계)에 따라 이름이 워크 시트에 결과를 복사합니다. </li><li> 모든 동영상을 처리하고 동물 당 프레임 수에 일관성이 있는지 확인합니다. 여기에, 2 분 탐사 세션에 해당하는 1810 프레임에 모든 동물을 기록합니다. </li><li> 각 동물과 종류의 프레임 평균 회색 VA 각 투자 수익 (ROI)에 대한매독 나누기 0보다 큰 값으로 프레임 수가 1 초에 대응하는 각각의 ROI에서 소요 초 얻었다. </li></ol></li></ol> 5. 통계 분석 <ol><li> 각 시험 http://www.real-statistics.com/one-way-analysis-of-variance-anova/homogeneity-variances/에 사용할 수있는 공식을 사용하여 바틀렛의 시험에 의해 그룹 / 유전자형 내 분산의 동질성을 확인합니다. </li><li> 시간 바틀의 검사 결과에 따라 동일하거나 동일하지 않은 차이를 가정 무 지향성 스튜던트 t-test를 이용하여 하나의 그룹 내에 악취 대 물 소비간에 인력 및 회피 시험에서는, 비교를 수행한다. 페로 니의 사후 테스트로 일원 분산 분석하여 유전자형 사이에 물에 소요되는 시간 뺀 냄새와 소요 시간을 비교합니다. </li><li> 감수성 시험에서 식 수용 함께 보낸 시간으로부터 감산 냄새 소요 시간을 비교 분석페로 니의 사후 테스트와 일원 분산 분석에 의한 소변의 특정 희석에 그룹 중 R. 페로 니의 사후 테스트와 반복 2 일원 분산 분석에 의해 성장하는 악취 농도 그룹 사이의 감도를 비교. </li><li> 매력 및 회피 테스트에서 유전자형과 치료 사이의 상호 작용은 페로 니의 사후 테스트 2 일원 분산 분석에 의해 조사한다. </li></ol>

<ol>
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T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computerized+assessment+of+social+approach+behavior+in+mouse.">Computerized assessment of social approach behavior in mouse.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 3, 48 (2009).</li><li>Nyfeler, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jagged1+signals+in+the+postnatal+subventricular+zone+are+required+for+neural+stem+cell+self-renewal.">Jagged1 signals in the postnatal subventricular zone are required for neural stem cell self-renewal.</a> Embo J. 24 (19), 3504-3515 (2005).</li><li>Tong, M. T., Peace, S. T., Cleland, T. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+assays+for+mouse+models+of+neurodegenerative+disease.">Olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (90), e51804 (2014).</li></ol>

There is no conflict of interest.

냄새에 대한 인식, 냄새에 물과 감도 대 냄새 사이의 차별이 프로토콜에서 제안 된 테스트는 마우스의 타고난 후각 행동의 다양한 측면을 평가 할 수 있습니다. 이 프로토콜은 이전에 15을 도시 선호도 및 회피 스케일에 따라서 임의의 냄새에 적용될 수있다. 프로토콜 탐색 활동을 기반으로하고 있기 때문에 그것은 마우스가 움직임에 영향을주는 후각 탐사 방해 할 수있는 임의의 모터 또?...

후각은 포유 동물에서 가장 선진국과 중요한 감각 기능 중 하나입니다. 후각 활동의 손상 차손은 최악의 경우 음식 섭취, 사회적 행동하고, 심지어 생존에 영향을 미칠 수 있습니다. 인간으로, 후각 저하가 1 의존 나이이고 신경 장애 2의 강력한 예측 인자로 간주됩니다 - 6. 펜실베니아 대학에 의해 개발 된 후각 식별 검사는 현재 초기 신경 학적 결손 7을 평가하고 높은 확률로 치매 8,9의 진행을 예측할 수있는 가장, 사용되는 비 침습적 및 정량화, 진단 테스트 중 하나를 나타냅니다. 후각 시스템 및 설치류에서 후각의 굴지의 접근성, 기전 후각 기능 (10)를 다루는 연구의 강렬한 선을 촉발했다. 우리는 이전에 신호 RECEPT의 기능의 손실을 보여 주었다또는 Notch1은 후각 회피 (11)에 영향을 미친다. 이 프로토콜에서 우리는 후각 성능을 연구하는 신경 세포 나 교세포에서 신호 리간드, Jagged1 결핍 된 마우스를 사용합니다. 타고난 후각은 인식과 같은 세 개의 매개 변수, 냄새와 후각 민감도 4 사이의 차별에 의해 정의된다. 설치류 후각 테스트는 다양한 방식으로 수행 될 수 있으며, 일부 행동 연구는 특정 증기 농도 및 정확한 시간 프레임 (12)에 동물에게 냄새를 제공 olfactometers, 사용하게 - 14. 그럼에도 불구하고,이 장비는 고가이고 만 전문 시설에서 사용할 수 있습니다. 우리의 연구에서, 우리는 휘발성 향기를 이용하여 수행되고, 간단한 빠르고 재현성 후각 시험 프로토콜을 제공한다. 테스트는 유인 또는 기피 냄새를 측정 인식을 설명하고 향기와 물 11,15,16 사이의 차별을 평가한다. 와트, 동일한 설정을 사용하여E는 다양한 농도 (16, 17)에서의 냄새에 대한 민감도를 측정 할 수있다. 페이지 및 동료 (18)의 작품에서 영감을 사후 컴퓨터를 이용한 영상 처리, 실험 맹검 전체 실험을 수행 할 수있는 한 사람을 허용 할 필요없이 공정한 결과를 제공합니다. 이 프로토콜은 마우스에서 후각 거동을 연구하기위한 시작점을 제공하기위한 것이다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="border-collapse:
 collapse;width:192pt">
	<colgroup>
		<col span="4" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr>
			<td class="xl63">Mouse cage</td>
			<td class="xl64">Italplast (Italy)</td>
			<td class="xl64">1144B</td>
			<td class="xl64">36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">Chipped wood bedding</td>
			<td class="xl64">Abedd (Austria)</td>
			<td class="xl64">LTE E-001</td>
			<td class="xl64">3 cm high</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">Peanut butter</td>
			<td class="xl64">Migros (Swizterland)</td>
			<td class="xl64">NA</td>
			<td align="right" class="xl65">1:10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">2-Methylbutyric</td>
			<td class="xl64">Sigma Aldrich (Switzerland)</td>
			<td class="xl64">W269514</td>
			<td class="xl64">Pure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">Female Urine from fertile females of same mouse strain</td>
			<td class="xl64">NA</td>
			<td class="xl64">NA</td>
			<td class="xl64">Dilution series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">Camera</td>
			<td class="xl64">Olympus (US)</td>
			<td class="xl64">Camedia C-8080</td>
			<td class="xl64">MOV files</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">Quicktime for Java (Windows)</td>
			<td class="xl64">Apple (USA)</td>
			<td class="xl64">NA</td>
			<td class="xl64">video plugin for visualizing MOV files</td>
		</tr>
		<tr>
			<td class="xl63">Image J for Windows</td>
			<td class="xl64">NIH (USA)</td>
			<td class="xl64">NA</td>
			<td class="xl64">Video Processing/Analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple and computer-assisted olfactory testing for mice

후각은 매우 종 가운데 보존하고 재생과 생존을 위해 필요합니다. 인간에서, 후각은 노화의 영향을받는 감각 중 하나이며, 신경 퇴행성 질환의 강력한 예측 인자이다. 따라서, 후각 테스트 초기 신경 학적 결손을 검출하는 비 침습적 진단 방법으로 사용된다. 후각 네트워크 감수성 근본적인 메커니즘을 이해하기 위하여, 설치류에서 후각 연구는 지난 10 년간 추진력을 얻고있다. 여기서는 사전 식품이나 물 제한없이 마우스에서 타고난 악취 지각 감도의 매우 간단한 시간 효율적이고 재현 후각 테스트 방법을 제시한다. 시험은 마우스에 익숙한 환경에서 수행되는, 냄새와 취기 노출의 2 분의 세션 만이 필요합니다. 분석에 ImageJ에 컴퓨터 보조 명령을 사용하여, 사후를 수행하기 때문에, 될 수있는한 연구원에 의해 처음부터 끝까지 수행. 이 프로토콜은 특별한 하드웨어 또는 설치를 필요로하지 않으며, 후각 인식과 감도를 테스트에 관심이있는 실험실에 대해 표시됩니다.

인식 테스트는 2-MB 산에 땅콩 버터와 회피에 매력을 측정합니다. 세 그룹의 마우스는 시험 물에 비해 &quot;냄새 경계&quot;에서 소요 시간을 정량화한다. 물 (8 t = 2.52, p &lt;0.05)에 비교하여 환경 시험에서, 대조군은 냄새에 상당한 선호도를 표시한다. 반면에, B 군은 땅콩 버터에 상당한 매력을 표시하지 않고 물 (T 6 = 3.22, P &lt;0.05)과 더 많은 시간을 보낸다. 따라서, 대조군 (F 1,7</su...

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Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

간단하고 컴퓨터 지원 마우스에 대한 후각 테스트를

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

simple-and-computer-assisted-olfactory-testing-for-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

9.8K 조회수.  University of Fribourg. We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing. 

비디오: Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land (Barnes) mazes. Improved performance over sessions or trials is thought to reflect learning and memory of the escape cage/platform location. Considered less stressful than water mazes, the Barnes maze is a relatively simple design of a circular platform top with several holes equally spaced around the perimeter edge. All but one of the holes are false-bottomed or blind-ending, while one leads to an escape cage. Mildly aversive stimuli (e.g.&#160;bright overhead lights) provide motivation to locate the escape cage. Latency to locate the escape cage can be measured during the session; however, additional endpoints typically require video recording. From those video recordings, use of automated tracking software can generate a variety of endpoints that are similar to those produced in water mazes (e.g.&#160;distance traveled, velocity/speed, time spent in the correct quadrant, time spent moving/resting, and confirmation of latency). Type of search strategy (i.e.&#160;random, serial, or direct) can be categorized as well. Barnes maze construction and testing methodologies can differ for small rodents, such as mice, and large rodents, such as rats. For example, while extra-maze cues are effective for rats, smaller wild rodents may require intra-maze cues with a visual barrier around the maze. Appropriate stimuli must be identified which motivate the rodent to locate the escape cage. Both Barnes and water mazes can be time consuming as 4-7 test trials are typically required to detect improved learning and memory performance (e.g.&#160;shorter latencies or path lengths to locate the escape platform or cage) and/or differences between experimental groups. Even so, the Barnes maze is a widely employed behavioral assessment measuring spatial navigational abilities and their potential disruption by genetic, neurobehavioral manipulations, or drug/ toxicant exposure.

The dry-land Barnes maze is widely used to measure spatial navigation ability in response to mildly aversive stimuli. Over consecutive days, performance (e.g.&#160;latency to locate escape cage) of control subjects improves, indicative of normal learning and memory. Differences between rats and mice necessitate apparatus and methodology changes that are detailed here.

크고 작은 설치류 모델 바네스 미로 테스트 전략

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

연구

행동분석학

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

마우스에서 냄새 차별과 요법 이니에 대한 테스트

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

The Treadmill Fatigue Test: A Simple, High-throughput Assay of Fatigue-like Behavior for the Mouse

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of current interventions to adequately treat fatigue in all patients leaves a need for new treatment options. Despite the therapeutic need and importance of preclinical research in helping identify promising novel treatments, few preclinical assays of fatigue are available. Moreover, the most common preclinical assay used to assess fatigue-like behavior, voluntary wheel running, is not suitable for use with some strains of mice, may not be sensitive to drugs that reduce fatigue, and has relatively low throughput. The current protocol describes a novel, non-voluntary preclinical assay of fatigue-like behavior, the treadmill fatigue test, and provides evidence of its efficacy in detecting fatigue-like behavior in mice treated with a chemotherapy drug known to cause fatigue in humans and fatigue-like behavior in animals. This assay may be a beneficial alternative to wheel running, as fatigue-like behavior and potential interventions can be assessed in a greater number of mice over a shorter time frame, thus permitting faster discovery of new therapeutic options.

Fatigue is a common, undertreated and frequently poorly-understood symptom in many diseases and disorders. New preclinical assays of fatigue may help to improve current understanding and future treatment of fatigue. To that end, the current protocol provides a novel means of measuring fatigue-like behavior in the mouse.

디딜 방아 피로 시험 : 마우스에 대한 피로와 같은 행동 간단한, 높은 처리량 분석

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of ...

Task Interruption and Resumption Paradigm for Testing the Activation and Pursuit of an Abstract Thinking Goal

This protocol is based on the task interruption and resumption paradigm, the premise of which is that active goals lead to persistent behavior and thus a higher resumption rate after a period of delay or interruption. The task interruption and resumption protocol described in this research is tailored to test the activation of cognitive goals (e.g., a goal to think more abstractly). Cognitive goals may be pursued even during the interruption period; thus, to prevent this, the protocol involves cognitive distraction. The protocol consists of several stages. Specifically, the initial stage includes the goal activation process, where the treatment (versus control) condition receives a manipulation to activate the cognitive goal being tested by the researcher. In the next stage, participants are presented with the introduction of a task that is perceived to either satisfy or not satisfy the cognitive goal of interest. Importantly, this task is interrupted a few seconds after it begins. The task interruption forces a delay period and introduces a cognitive distraction to prevent the automatic pursuit and fulfillment of the cognitive goal. After the interruption period, participants are given a choice between resuming the interrupted task and abandoning the interrupted task to complete an alternative task instead. Among participants whose cognitive goals had been activated at the earlier stage, the task resumption rate should be higher if the task was perceived as an opportunity to satisfy (versus not satisfy) the goal. Such a finding would provide empirical evidence that the cognitive goal has been activated and pursued. In previous research, this protocol has been used to test whether causal uncertainty activates an abstract thinking goal. Adapting the protocol to test the activation of other cognitive goals is also discussed.

This protocol was designed to test the activation and pursuit of cognitive goals (e.g., an abstract thinking goal) using the task interruption and resumption paradigm. The protocol is suitable for cognitive goals that are automatically pursued once activated, as the distraction procedure prevents goal pursuit during the interruption period.

작업 중단과 추상 생각 목표의 테스트 활성화 및 추적에 대한 재개의 패러다임

This protocol is based on the task interruption and resumption paradigm, the premise of which is that active goals lead to persistent behavior and thus a ...

A Simple and Low-cost Assay for Measuring Ambulation in Mouse Models of Muscular Dystrophy

Measuring functional outcomes in the treatment of muscular dystrophy is an essential aspect of preclinical testing. The assessment of voluntary ambulation in mouse models is a non-invasive and reproducible activity assay that is directly analogous to measures of patient ambulation such as the 6-minute walk test and related mobility scores. Many common methods for testing mouse ambulation speed and distance are based on the open field test, where an animal&#39;s free movement within an arena is measured over time. One major downside to this approach is that commercial software and equipment for high-resolution motion tracking is expensive and may require transferring mice to specialized facilities for testing. Here, we describe a low-cost, video-based system for measuring mouse ambulation that utilizes free and open-source software. Using this protocol, we demonstrate that voluntary ambulation in the dystrophin-null mdx mouse model for Duchenne muscular dystrophy (DMD) is decreased relative to wild-type mouse activity. In mdx mice expressing the utrophin transgene, these activity deficits are not observed and the total distance traveled is indistinguishable from wild-type mice. This method is effective for measuring changes in voluntary ambulation associated with dystrophic pathology, and provides a versatile platform that can be readily adapted to diverse research settings.

This protocol describes a flexible, low-cost system for measuring mouse ambulation in an open field activity assay. We show that a 6-minute ambulation assay based on this system detects a decrease in voluntary movement in mdx mice, and accurately distinguishes improvement in a muscle-specific rescue of these animals.

근이 영양 증의 마우스 모델에서 Ambulation를 측정 하기 위한 간단 하 고 저렴 한 비용 분석 결과

Measuring functional outcomes in the treatment of muscular dystrophy is an essential aspect of preclinical testing. The assessment of voluntary ambulation ...

A Simple Non-invasive Method for Temporary Knockdown of Upper Limb Proprioception

Proprioception may be the least well measured of all contributors to the neural control of movement. New precise, reliable measures of proprioception are needed for clinical diagnosis of impairment, and to measure outcomes of proprioceptive training. The purpose of this simple, non-invasive method is to temporarily knockdown upper limb proprioception in healthy adults, to an extent that would be useful in the development and testing of upper limb proprioception measures. Knockdown models have two main advantages over studying humans with impaired proprioception: participant availability and the ability to control the extent of impairment across participants. Current published methods of temporary proprioception knockdown of the upper limb, such as ischemic nerve blocks and cryotherapy, are invasive, impractical, or uncomfortable for the participant. Here, vibration over the ulnar groove was used to reduce upper limb proprioception. High frequency vibration may reduce proprioceptive acuity by inhibiting pacinian corpuscle-induced input. The effect of vibration used in this protocol was confirmed using two quantitative measures. This method was simple to administer, comfortable for participants, and practical.

The goal of this protocol is to demonstrate a practical method to temporarily interfere with proprioception in the upper limb of healthy humans.

상 지 Proprioception의 임시 최저에 대 한 간단한 비-침략 적 방법

Proprioception may be the least well measured of all contributors to the neural control of movement. New precise, reliable measures of proprioception are ...

Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two behavioral components: a reluctance to avoid humans (passive tameness) and a motivation to approach humans (active tameness). To quantify these components in mice, we previously developed behavioral tests for active tameness, passive tameness, and the willingness to stay on a human hand, each designed to be completed within 3 min. The data obtained were used for selective breeding, with a large number of mice analyzed per generation. The active tameness test measures the movement of the mouse toward a human hand and the contact it engages in. The passive tameness test measures the duration of time that a mouse tolerates human touch. In the stay-on-hand test, a mouse is placed on a human hand and touched slowly using the thumb of that hand; the duration of time that the animal remains on the hand is measured. Here, we describe the test set-up and apparatus, explain the procedures, and discuss the appropriate data analysis. Finally, we explain how to interpret the results.

Tameness in animals includes a reduction of avoidance responses to humans (passive tameness) and an increase in active approaches to humans (active tameness). Here, we describe detailed protocols for three behavioral tests (active tameness, passive tameness, and stay-on-hand tests) to separately measure the active and passive tameness of mice.

마우스에서 별도로 측정 능동 및 수동 Tameness

Domesticated animals such as dogs and laboratory mice show a high level of tameness, which is important for humans to handle them easily. Tameness has two ...

Computerized Adaptive Testing System of Functional Assessment of Stroke

The computerized adaptive testing system of the functional assessment of stroke (CAT-FAS) can simultaneously assess four functions (motor functions of the upper and lower extremities, postural control, and basic activities of daily living) with sufficient reliability and administrative efficiency. CAT, a modern measurement method, aims to provide a reliable estimate of the examinee's level of function rapidly. CAT administers only a few items whose item difficulties match an examinee's level of function and, thus, the administered items of CAT can provide sufficient information to reliably estimate the examinee's level of function in a short time. The CAT-FAS was developed through four steps: (1) determining the item bank, (2) determining the stopping rules, (3) validating the CAT-FAS, and (4) establishing a platform of online administration. The results of this study indicate that the CAT-FAS has sufficient administrative efficiency (average number of items = 8.5) and reliability (group-level Rasch reliability: 0.88 - 0.93; individual-level Rasch reliability: &#8805;70% of patients had Rasch reliability score &#8805;0.90) to simultaneously assess four functions in patients with stroke. In addition, because the CAT-FAS is a computer-based test, the CAT-FAS has three additional advantages: the automatic calculation of scores, the immediate storage of data, and the easy exporting of data. These advantages of the CAT-FAS will be beneficial to data management for clinicians and researchers.

Here, we present a protocol to develop the computerized adaptive testing system of the functional assessment of stroke (CAT-FAS). The CAT-FAS can simultaneously assess four functions (two motor functions [upper and lower extremities], postural control, and basic activities of daily living) with sufficient reliability and administrative efficiency.

뇌졸중의 기능 평가의 전산화 적응 테스트 시스템

The computerized adaptive testing system of the functional assessment of stroke (CAT-FAS) can simultaneously assess four functions (motor functions of the ...

Olfactory Context Dependent Memory: Direct Presentation of Odorants

Information is retrieved more effectively when the retrieval occurs in the same context as that in which the information was first encoded. This is termed context dependent memory (CDM). One category of cues that have been shown to effectively produce CDM effects are odors. However, it is unclear what the boundary conditions of these CDM effects are. In particular, given that olfaction has been called an implicit sense, it is possible that odors are only effective mnemonic cues when they are presented in the background. This assertion seems even more likely given that previous research has shown odors to be poor cues during paired associate memory tests, where odors are in the focus of attention as mnemonic cues for other information. In order to determine whether odors are only effective contextual mnemonic cues when presented outside the central focus of an observer, an olfactory CDM experiment was performed in which odorants were presented directly, rather than ambiently. Direct presentation was accomplished with the aid of an olfactometer. The olfactometer not only allows for direct presentation of odorants, but provides other methodological benefits, including the allowance of trial by trial manipulations of odorant presentations and, relatedly, time-specific releases of odorants. The presence of the same odor during both encoding and retrieval enhanced memory performance, regardless of whether the odor was presented ambiently or directly. This finding can serve as a basis for future olfactory CDM research which can utilize the benefits of direct presentation.

The use of an olfactometer for directly presenting odorants opens exciting opportunities for researchers of olfactory memory. The current paper discusses issues related to this methodology as related to a previously published experiment on olfactory context dependent memory.

Odorants의 후 각 컨텍스트 종속 메모리: 직접 프레 젠 테이 션

Information is retrieved more effectively when the retrieval occurs in the same context as that in which the information was first encoded. This is termed ...