Name: simple and computer-assisted olfactory testing for mice
Uploaded: 2015-06-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 40 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice at JoVE.com

This work is funded by the Swiss National Foundation (31_138429) and Synapsis Foundation for the support of research on Alzheimer&#8217;s disease.

Alle tierischen Verfahren sind in Übereinstimmung mit der EU-Richtlinie 2010/63 / EU über den Schutz von Tieren zu wissenschaftlichen Zwecken verwendet werden und werden von der lokalen Animal Care Committee (Kanton Freiburg, Schweiz) genehmigt. 1. Vorbereitung der Tiere <ol><li> Versuchstiere <ol><li> Führen Sie Experimente an erwachsenen männlichen Wildtyp und transgenen Mäusen (C57BL / 6 Hintergrund) von 3-5 Monaten. Die drei Gruppen von Mäusen entsprechen Wildtyp-Wurfgeschwister-Kontrollen (Gruppe A, Jagged1 flox / flox 19) und zwei bedingte KO Mauslinien (Gruppe B, und C Jagged1ncKO, Jagged1gcKO). </li><li> Hausmäuse unter Standardlaborbedingungen in einem belüfteten Raum mit einer 12 Stunden kontrolliert hell / dunkel-Zyklus und bieten Nahrung und Wasser ad libitum. </li></ol></li></ol> 2. Versuchsaufbau <ol><li> Experimental-Arena <ol><li> Für die experimentelle Arena, mit einem sauberen sterilisiert Maus Käfig (36 cm Länge x 20,5 cm Breite x 13.5 cm Höhe) (Abbildung 1A). </li><li> Ordnen Sie jedem der Maus auf ein Nummern Käfig mit frischer Bettwäsche, 3 cm hoch. Wenn Käfige wieder verwendet werden, wie in der Geruchsempfindlichkeit Test, die folgenden Maßnahmen, um Kreuzkontaminationen zwischen Gerüchen und Mäusen zu vermeiden. <ol><li> Markieren Sie die Wasserseite. </li><li> Reinigen der schmalere Wände der Käfige mit zwei Tissue-Papiere mit 70% Ethanol, eine für jede Seite besprüht. </li><li> Stapeln sich Käfige nach dem Genotyp der Mäuse und die temporäre Speicherung unter einer laminaren Haube. </li></ol></li></ol></li><li> Kamera <ol><li> Montieren einer Kamera auf einem Dreibeinstativ angefertigt, mit dem Ziel bei 58 cm von der Unterseite des Käfigs (1A). Fixieren Sie die Position des Stativs und des Käfigs und begrenzen mit Markierungen, damit für die Kamera auf der Oberseite des Käfigs zentriert werden. </li><li> Nehmen Sie Videos auf 320 Pixel x 240 Pixel, 15,08 Bilder pro Sekunde als MOV-Dateien. </li></ol></li><li> Gerüche <ol><li> Resuspendieren scents, wenn angegeben ist, in dem Lösungsmittel, in dem sie löslich sind. </li><li> Für die Präferenztest Verwendung Erdnussbutter. Resuspendieren Erdnussbutter in Erdnussöl (10% w / v). </li><li> Zur Vermeidung Test Verwendung reiner 2-Methyl (2-MB) Säure (98%). </li><li> Für den Empfindlichkeitstest, verwenden weiblichen Urin aus der gleichen Maus Kolonie und Hintergrund (C57BL / 6). <ol><li> Zur Bequemlichkeit Sammeln des Urins 1-2 Tage vor dem Geruchstest. Zurückhalten, halten Sie die Maus unter der Haube mit dem Bauch über dem Käfiggitter. Unter dem Käfiggitter eine Plastikpetrischale, um die Tropfen Urin zu sammeln. </li><li> Sammeln Sie den Urin von jeder Frau in einem 1,5-ml-Röhrchen und mischen Sie alle Urinproben für die Variabilität zwischen den Tieren zu normalisieren. Lagerung bei -20 ° C bis zur Verwendung. </li><li> Am Tag des Experiments wurden auftauen Urin und auszuführen 4 Verdünnungen in bidestilliertem Wasser bei einem Verdünnungsfaktor von 10 (1:10, 1: 100, 1: 1.000, 1: 10.000). </li></ol></li></ol></li></ol>3. Olfactory Testing Hinweis: In diesem Protokoll Gerüche bewusst gewählt worden, die als starke Lockstoffe (Erdnussbutter und weiblichen Urin) oder starke abstoßende (2-MB-Säure) 15 wahrgenommen werden. Es ist wichtig, vor Durchführung der Präferenz und Empfindlichkeitstests, um angenehme Gerüche zu vermeiden Test, um die Möglichkeit einer Störung des Geruchsverhalten zu beseitigen. Jedoch für die der Einfachheit halber in diesem Papier Präferenz und Vermeidungstest werden beide unter der Wahrnehmungstest beschrieben. Jeder Verhaltens Sitzung beginnt mit einer Gewöhnungsphase. <ol><li> Gewöhnungsphase <ol><li> Legen Sie das Tier in den Käfig sauber zugeordnet und lassen Sie es für 5 min (1B) zu erkunden. Da die Umgebung der Versuchskäfig ist dem Heimkäfig ist dies kurz genug ist, um die Gewöhnung ermöglichen. </li><li> Wenn die Empfindlichkeit Test wird in einem Tag abgeschlossen, führen Gewöhnung nur einmal vor dem application der höchsten verdünnter Geruch. Wenn die Empfindlichkeit Test wird an verschiedenen Tagen durchgeführt, an jedem Tag eine Gewöhnungsphase an einem neuen sauberen Käfig benötigt wird. </li></ol></li><li> Wahrnehmungstest <ol><li> Nach Gewöhnung, aktivieren Sie die Kamera und sofort pipettieren 60 ul der angenehmen Duft (Erdnussbutter) und 60 &amp; mgr; l der neutralen Duft (Leitungswasser) auf die gegenüberliegende Wände des Käfigs bei etwa 10 cm vom Boden (1C). </li><li> Lassen Sie die Maus erkunden Sie die Gerüche für 2 min (1D). Danach schalten Sie die Kamera aus. </li><li> An diesem Punkt, fahren Sie mit der nächsten Maus ausgehend von der Gewöhnungsphase. Führen die Vermeidungstest genau auf die gleiche Weise, indem 60 ul des Repellents Geruch (2-MB-Säure) und 60 ul Wasser. </li></ol></li><li> Empfindlichkeitstest <ol><li> Bewerten Sie die Attraktion Schwelle von männlichen Mäusen zu steigenden Konzentrationen von weiblichen Urin in der folgenden Reihenfolge: 1: 10.000; 1: 1000; 1: 100; 1:10 und pure Urin. </li><li> Nach Gewöhnung, aussetzen jede Maus, um die höchste Verdünnung vom Experimentator pipettiert, wie zuvor in 3.2.1 beschrieben. </li><li> Notieren Sie sich die Erkundungsverhalten von Urin im Vergleich zu Wasser, in einem 2 Minuten Zeitrahmen auf einer Videokamera. Nachdem alle Mäuse Kohorten für die höchste Verdünnung (1: 10000) getestet, aussetzen, um eine höhere Konzentration von Urin, wie oben angegeben. </li></ol></li></ol> 4. Post-hoc Datenanalyse Hinweis: Alle beschriebenen Verhaltenstests werden im Anschluss an die Datenanalyse Anweisungen verarbeitet post hoc. <ol><li> Öffnen Sie MOV-Dateien in ImageJ für Windows-Systeme <ol><li> Installieren Sie Quicktime für Java unter Verwendung der benutzerdefinierten Einstellungen aus http://www.apple.com/quicktime/download. </li><li> Installieren Sie den Quick Time-Plugin aus dem ImageJ Website (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/qt-capture.html). </li><li> Importieren Sie die QTJava.zip (C: Programme Quicktime QTSystem) in die Bibliothek extensIon von ImageJ (.ImageJ jre lib ext). </li><li> Kopieren Sie auch die QTJava.zip im Ordner Plugins und benennen Sie sie als QTJava.jar. </li><li> Installieren Sie die sechs Skripte im Ordner Macros angebracht (ImageJ plugins Macros). </li><li> Öffnen ImageJ und zu kompilieren und die Quick Time-Plugin, danach enge ImageJ. </li><li> Öffnen Sie erneut ImageJ und öffnen Sie die MOV-Datei mit Datei&gt; Importieren&gt; mit Quick Time. </li></ol></li><li> Video Adjustment <ol><li> Sobald die Videodatei in ImageJ geöffnet wird, schneiden die Video um einen konstanten 2 min Erforschung vom Zeitpunkt der Experimentator die Riechstoffe in den Käfig (T0) pipettiert erhalten. Identifizieren Sie den Rahmen entsprechend der T0 und entfernen Sie die vorhergehenden Frames mit Schritten von 1 (ImageJ Bild Stacks ToolsSlice Entferner). Verwenden Sie den gleichen Befehl, um alle Bilder Überschreitung der 2 min Exploration löschen. </li><li> Stellen Sie sicher, dass der Käfig zentriert und, wenn erforderlich, mit Bild&gt; Transformieren&gt; Drehen Befehl, um ihn auszurichten. </li></ol></li><li> Video Verarbeitung Hinweis: Video Verarbeitung ist vollständig computergestützte und verwendet diese Begleitpapier Makros Befehle. <ol><li> Um die Gegend auf den Käfig eines 127 Pixel x 218 Pixel Größe beschränken führen Sie den Schritt 1 Makro aus dem Plugin&gt; Makros&gt; Ausführen-Befehl. Bewegen Sie den festen Rechteck über dem Käfig (Abbildung 2, Schritt 1). </li><li> Schneiden Sie das Gebiet des Käfigs auf dem Gebiet von Interesse (ROI) mit dem Schritt 2 Makro (Abbildung 2, Schritt 2). </li><li> Verwenden Sie den Schritt 3, um den Makro-Maus Bild aus dem Hintergrund durch die Zuweisung einer Schwellenwertsignal, Entfernen von Flecken und das Filtern der Signalvarianz zu extrahieren. Die Ausgangswerte in der Z-Achse Grundstück zeigen die mittleren Grauwerte, entsprechend der Intensität des Maus-Schatten, die innerhalb der ROI des &quot;Wasserkammer&quot; in der 2 min Exploration. Kopieren Sie die Ergebnisse in ein Arbeitsblatt mit dem Namen nach der ROI in einem Spreadsheet-Datei (Abbildung 2, Schritt 3). </li><li> Verwenden Sie den Schritt 4 Makroextrahieren Sie die mittleren Grauwerte von der Maus in die ROI &quot;Geruchskammer&quot;. Kopieren Sie die Ergebnisse in ein Arbeitsblatt mit dem Namen nach der ROI in der gleichen Tabellendatei wie in 4.3.3 (Abbildung 2, Schritt 4). </li><li> Um die Analyse der Mausbewegung in der ROI &quot;Wasser Umfang&quot; weiter einschränken benutzen Sie Schritt 5 Makro. Kopieren Sie das Ergebnis auf dem Arbeitsblatt mit dem Namen nach der ROI in der gleichen Tabellendatei wie in 4.3.3 (Abbildung 2, Schritt 5). </li><li> Um die Analyse der Mausbewegung in der ROI &quot;Geruch Umfang&quot; zu beschränken verwenden Sie den Schritt 6 Makro. Kopieren Sie das Ergebnis auf dem Arbeitsblatt mit dem Namen nach der ROI-Kalkulationstabellendatei wie in 4.3.3 (Abbildung 2, Schritt 6). </li><li> Alle Videos verarbeiten und überprüfen Sie die Konsistenz in der Anzahl der Bilder pro Tier. Hier Aufzeichnung aller Tiere für 1.810 Frames entsprechend einem 2 min Exploration Sitzung. </li><li> Für jedes Tier und für jede ROI Art Rahmen mit mittleren Grau vaLues größer als 0 Teilen Sie die Anzahl der Frames, die durch die Werte auf 1 Sekunde entspricht und erhalten die Sekunden in jedem ROI verbracht. </li></ol></li></ol> 5. Statistische Analyse <ol><li> Für jeden Test überprüfen Homogenität der Varianz innerhalb der Gruppen / Genotypen von Bartlett-Test unter Verwendung des verfügbaren Formel auf http://www.real-statistics.com/one-way-analysis-of-variance-anova/homogeneity-variances/. </li><li> In der Anziehung und Vermeidungstest, führen Vergleiche durch zwischen die Zeiten verbrachte mit Wasser gegen Geruch innerhalb einer Gruppe unter Verwendung eines ungerichteten Student-t-Test unter der Annahme gleicher oder ungleicher Varianzen Abhängigkeit von den Ergebnissen der Bartlett-Test. Vergleichen Sie das mal mit den Gerüchen von der Zeit mit Wasser verbracht zwischen den Genotypen von Einweg-ANOVA mit Bonferroni post-hoc-Test abgezogen verbracht. </li><li> In der Sensitivitätstest analysieren die Vergleiche der Zeit mit dem Geruch von der Zeit abgezogen verbrachte mit wate verbrachtr zwischen den Gruppen bei einer spezifischen Verdünnungen des Urins durch Einweg-ANOVA mit Bonferroni post-hoc-Test. Vergleichen Sie die Empfindlichkeit zwischen den Gruppen auf die wachsende Geruchskonzentrationen von 2-Wege-ANOVA mit Wiederholungen mit Bonferroni post-hoc-Test. </li><li> Interaktion zwischen Genotypen und Behandlungen in der Anziehung und Vermeidungstest werden durch 2-Wege-ANOVA mit Bonferroni post-hoc-Test untersucht. </li></ol>

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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+assays+for+mouse+models+of+neurodegenerative+disease.">Olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (90), e51804 (2014).</li></ol>

There is no conflict of interest.

Die in diesem Protokoll vorgeschlagenen Tests erlauben, verschiedene Aspekte der angeborenen olfaktorische Verhalten bei Mäusen zu bewerten: Wahrnehmung von Gerüchen, die Unterscheidung zwischen Gerüche gegen Wasser und Empfindlichkeit gegenüber Gerüchen. Dieses Protokoll kann auf jeden Geruch nach den Vorlieben und Vermeidung Maßstab zuvor gezeigt 15 aufgebracht werden. Da das Protokoll auf Erkundungstätigkeit auf der Basis ist es wichtig, dass Mäuse, keine motorischen Beeinträchtigung oder Angst, d...

Der Geruchssinn ist einer der am weitesten entwickelten und wichtigen sensorischen Funktionen bei Säugetieren. Jede Wertminderung in olfaktorischen Aktivität kann die Nahrungsaufnahme, Sozialverhalten und im schlimmsten Fall sogar das Überleben beeinflussen. Beim Menschen ist olfaktorischen Verschlechterung altersabhängig 1 und wird als ein starker Prädiktor für neurologische Störungen 2-6. Die Geruchsidentifizierungstest durch die University of Pennsylvania entwickelt derzeit für eine der am meisten verwendeten, nicht-invasive und quantifizierbar, Diagnosetests, die frühen neurologischen Defiziten 7 Bewertung und Vorhersage mit hoher Wahrscheinlichkeit das Fortschreiten der Demenz 8,9 kann. Die Zugänglichkeit des olfaktorischen Systems und die Bekanntheit des Geruchssinns bei Nagetieren, hat eine intensive Forschungslinie der Bewältigung der zugrunde liegenden Mechanismen olfaktorische Funktionen 10 ausgelöst. Wir haben zuvor gezeigt, dass der Verlust in Abhängigkeit von der Signal receptoder Notch1 wirkt Geruchsvermeidung 11. In diesem Protokoll verwenden wir Mäuse, denen die Signalisierung Liganden, Jagged1, in Neuronen oder Gliazellen zu Riechleistung zu untersuchen. Innate Geruchssinn wird durch drei Parameter wie Wahrnehmung, Unterscheidung zwischen Gerüchen und Geruchsempfindlichkeit 4 definiert. Olfaktorische Tests in Nagetieren können in einer Vielzahl von Wegen durchgeführt werden, und einige Verhaltensstudien nutzen Olfaktometer, die den Geruch des Tieres an einer bestimmten Dampfkonzentrationen und in einem genauen Zeitplan 12 liefern - 14. Dennoch ist dies Instrumentierung teuer und kann nur in spezialisierten Einrichtungen zur Verfügung stehen. In unserer Arbeit stellen wir eine einfache, schnelle und reproduzierbare Geruchstestprotokoll, das unter Verwendung von flüchtigen Duftstoffe durchgeführt wird. Die Tests beschriebene Maßnahme Wahrnehmung auf ein Lockstoff oder einer abstoßenden Geruch und die Unterscheidung zwischen dem Duft und Wasser 11,15,16 bewerten. Unter Verwendung der gleichen Einrichtung, wE kann auch die Empfindlichkeit auf einen Geruchs bei verschiedenen Konzentrationen 16,17 messen. Die Post-hoc-computergestützte Videoverarbeitung, inspiriert von der Arbeit der Seite und Kollegen 18, bietet Ergebnisse ohne die Notwendigkeit der experimentellen Blendung und damit für eine einzelne Person für die Durchführung des gesamten Experiments. Dieses Protokoll dient, einen Ausgangspunkt für die Untersuchung olfaktorische Verhalten bei Mäusen bereitzustellen.

<table><tbody><tr><td>Mouse cage</td><td>Italplast (Italy)</td><td>1144B</td><td>36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height</td></tr><tr><td>Chipped wood bedding</td><td>Abedd (Austria)</td><td>LTE E-001</td><td>3 cm high</td></tr><tr><td>Peanut butter</td><td>Migros (Switzerland)</td><td>NA</td><td>1:10</td></tr><tr><td>2-Methylbutyric</td><td>Sigma Aldrich (Switzerland)</td><td>W269514</td><td>Pure</td></tr><tr><td>Female urine from fertile females of same mouse strain</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Dilution series</td></tr><tr><td>Camera</td><td>Olympus (US)</td><td>Camedia C-8080</td><td>MOV files</td></tr><tr><td>Quicktime for Java (Windows)</td><td>Apple (USA)</td><td>NA</td><td>video plugin for visualizing MOV files</td></tr><tr><td>ImageJ for Windows</td><td>NIH (USA)</td><td>NA</td><td>Video Processing/Analysis</td></tr></tbody></table>

simple and computer-assisted olfactory testing for mice

Der Geruchssinn ist stark zwischen den Arten konserviert und ist für die Fortpflanzung und das Überleben notwendig. Beim Menschen ist olfaction auch einer der Sinne, die mit der Alterung betroffen ist und ist ein starker Prädiktor für neurodegenerative Erkrankungen. Somit wird olfaction Testen als nicht-invasives diagnostisches Verfahren zu neurologischen Defiziten frühzeitig detektieren. Um die Mechanismen olfaktorischen Netzwerk Anfälligkeit zugrunde zu verstehen, hat Geruchsforschung in Nagetieren Dynamik in den letzten zehn Jahren gewonnen. Hier präsentieren wir eine sehr einfache, Zeit effiziente und reproduzierbare Geruchstestverfahren der angeborenen Geruchswahrnehmung und Sensitivität in Mäusen ohne die Notwendigkeit einer vorherigen Nahrung oder Wasser Beschränkung. Die Tests werden in einer vertrauten Umgebung zu den Mäusen durchgeführt, erfordern nur die Düfte und ein 2 min-Sitzung von Geruchsbelastung. Die Analyse wird durchgeführt, Post-hoc, mit computergestützten Befehlen auf ImageJ und kann deshalb sein,, Durchgeführt von Anfang bis von einem Forscher zu beenden. Dieses Protokoll erfordert keine spezielle Hardware oder Konfiguration und wird für jedes Labor Interesse an einem Test Geruchswahrnehmung und Empfindlichkeit angezeigt.

Die Wahrnehmung Test misst die Anziehungskraft auf Erdnussbutter und Vermeidung zu 2-MB-Säure. Drei Gruppen von Mäusen getestet und die Zeit, in der &quot;Geruch Perimeter&quot; verbracht werden quantifiziert im Vergleich zu Wasser. In der Präferenz-Test, in der Kontrollgruppe A zeigt signifikante Bevorzugung der Geruch im Vergleich zu Wasser (t 8 = 2,52, p &lt;0,05). Auf der anderen Seite, wird die Gruppe B keine signifikante Anziehungskraft auf Erdnussbutter zeigen und verbringt mehr Zeit mit Wasser (t <...

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Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

Einfache und Computergestützte Riechtests für Mäuse

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

simple-and-computer-assisted-olfactory-testing-for-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

10.0K Aufrufe.  University of Fribourg. We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing. 

Serie: Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land (Barnes) mazes. Improved performance over sessions or trials is thought to reflect learning and memory of the escape cage/platform location. Considered less stressful than water mazes, the Barnes maze is a relatively simple design of a circular platform top with several holes equally spaced around the perimeter edge. All but one of the holes are false-bottomed or blind-ending, while one leads to an escape cage. Mildly aversive stimuli (e.g.&#160;bright overhead lights) provide motivation to locate the escape cage. Latency to locate the escape cage can be measured during the session; however, additional endpoints typically require video recording. From those video recordings, use of automated tracking software can generate a variety of endpoints that are similar to those produced in water mazes (e.g.&#160;distance traveled, velocity/speed, time spent in the correct quadrant, time spent moving/resting, and confirmation of latency). Type of search strategy (i.e.&#160;random, serial, or direct) can be categorized as well. Barnes maze construction and testing methodologies can differ for small rodents, such as mice, and large rodents, such as rats. For example, while extra-maze cues are effective for rats, smaller wild rodents may require intra-maze cues with a visual barrier around the maze. Appropriate stimuli must be identified which motivate the rodent to locate the escape cage. Both Barnes and water mazes can be time consuming as 4-7 test trials are typically required to detect improved learning and memory performance (e.g.&#160;shorter latencies or path lengths to locate the escape platform or cage) and/or differences between experimental groups. Even so, the Barnes maze is a widely employed behavioral assessment measuring spatial navigational abilities and their potential disruption by genetic, neurobehavioral manipulations, or drug/ toxicant exposure.

The dry-land Barnes maze is widely used to measure spatial navigation ability in response to mildly aversive stimuli. Over consecutive days, performance (e.g.&#160;latency to locate escape cage) of control subjects improves, indicative of normal learning and memory. Differences between rats and mice necessitate apparatus and methodology changes that are detailed here.

Barnes Maze Teststrategien mit kleinen und großen Nager-Modelle

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

Forschung

Verhalten

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

Die Prüfung auf Geruch Diskriminierung und Habituation in Mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris Wasser-Labyrinth-Test: Optimierung für Mausstamm und Testumgebung

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent studies demonstrate that environmental enrichment decreases adiposity, increases energy expenditure, resists diet induced obesity, and causes cancer remission and inhibition in mice. EE typically consists of larger living space, a variety of &#8216;toys&#8217; to interact with, running wheels, and can include a number of other novel environmental changes. All of this fosters a more complex social engagement, cognitive and physical stimulations. Importantly, the toy location and type of toy is changed regularly, which encourages the mice to adapt to a frequently changing and novel environment. Many variables can be manipulated in EE to promote health effects in mice. Thus these approaches are difficult to control and must be properly managed to successfully replicate the associated phenotypes. Therefore, the goal of this video is to demonstrate how EE is properly set up and maintained to assure a complex, challenging, and controlled environment so that other researchers can easily reproduce the protective effects of EE against obesity and cancer.

Environmental enrichment for mice requires a complex and challenging setup, as well as comprehensive husbandry and handling techniques to assure robust metabolic and anti-cancer effects in the mice. This protocol provides detailed procedures to reproduce the above mentioned effects in mice.

Ein Protokoll für die Housing Mäuse in einer angereicherten Umwelt

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

The Treadmill Fatigue Test: A Simple, High-throughput Assay of Fatigue-like Behavior for the Mouse

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of current interventions to adequately treat fatigue in all patients leaves a need for new treatment options. Despite the therapeutic need and importance of preclinical research in helping identify promising novel treatments, few preclinical assays of fatigue are available. Moreover, the most common preclinical assay used to assess fatigue-like behavior, voluntary wheel running, is not suitable for use with some strains of mice, may not be sensitive to drugs that reduce fatigue, and has relatively low throughput. The current protocol describes a novel, non-voluntary preclinical assay of fatigue-like behavior, the treadmill fatigue test, and provides evidence of its efficacy in detecting fatigue-like behavior in mice treated with a chemotherapy drug known to cause fatigue in humans and fatigue-like behavior in animals. This assay may be a beneficial alternative to wheel running, as fatigue-like behavior and potential interventions can be assessed in a greater number of mice over a shorter time frame, thus permitting faster discovery of new therapeutic options.

Fatigue is a common, undertreated and frequently poorly-understood symptom in many diseases and disorders. New preclinical assays of fatigue may help to improve current understanding and future treatment of fatigue. To that end, the current protocol provides a novel means of measuring fatigue-like behavior in the mouse.

Die Tretmühle Ermüdungstest: Eine einfache, Hochdurchsatz-Assay von Fatigue-ähnliches Verhalten für die Maus

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of ...

Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible circuitry. In addition, this area's unique ability to generate new neurons throughout an organism's lifetime makes it an attractive system for developmental and regenerative biologists alike. Such interest necessitates a means for a quick, yet reliable assessment of olfactory function. Many tests of olfactory ability are complex, variable or not specifically designed for mice. Also, some tests are sensitive to memory deficits as well as defects in olfactory abilities, confounding obtained results.
Here, we describe a simple battery of tests designed to identify defects in olfactory sensitivity and preference. First, an initial general health assessment allows for the identification of animals suitable for further testing. Second, mice are exposed to various dilutions of scents to ascertain whether there is a threshold difference. Third, mice are presented with various scents, both attractive and aversive, that allow for the assessment of olfactory preference. These simple studies should make the initial characterization of olfactory behavior accessible for labs of varied resources and expertise.

Fundamental, yet unique properties of the rodent olfactory system have led to its increasing study among biologists. A relatively simple assessment of its function is then also needed. Here we describe sensitive tests for the characterization of mouse olfactory sensitivity and preference.

Olfaktorische Behavioral Testing in der adulten Maus

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible ...

Biologie

Beurteilung der Geruchsbeeinträchtigung bei Mäusen durch eingeatmete Umweltschadstoffe

Studying the Effects of Inhaled Environmental Pollutants on Olfactory Function in Mice

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental pollutants exposure may impair olfaction; thereby, there is an urgent need for methods to evaluate the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfaction. Mice are ideal models for olfactory experiments because of their highly developed olfactory system and behavioral characteristics. To assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice, a detailed buried food test and social odor discrimination experiment is provided, including the experiment preparation, the selection and construction of experimental facilities, the testing process, and indexes of time. Meanwhile, timekeeping equipment, operational details, and the experimental environment are discussed to ensure the success of the assay. Zinc sulfate is used as the treatment to demonstrate the feasibility of the experimental approach. The protocol provides a simple and clear operational process for assessing the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice.

Autor im Rampenlicht: Bewertung der olfaktorischen Wirkung von Luftschadstoffen - Tests für vergrabene Lebensmittel und soziale Gerüche

This paper provides a detailed description of the buried food test and social odor discrimination experiment to assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice.

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental ...

Umwelt

Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process and may be a useful behavioral marker for early detection. Earlier detection in neurodegenerative disease is a major goal in the field because this is when neuroprotective therapies have the best potential to be effective. Therefore, in preclinical studies testing novel neuroprotective strategies in rodent models of neurodegenerative disease, olfactory assessment could be highly useful in determining therapeutic potential of compounds and translation to the clinic. In the present study we describe a battery of olfactory assays that are useful in measuring olfactory function in mice. The tests presented in this study were chosen because they measure olfaction abilities in mice related to food odors, social odors, and non-social odors. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of Parkinson&#8217;s disease as well as in testing potential disease-modifying therapies.

Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

Riech Assays für Mausmodelle für Neurodegenerative Disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process ...

Einfache und Computergestützte Riechtests für Mäuse

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

Barnes Maze Teststrategien mit kleinen und großen Nager-Modelle

Die Prüfung auf Geruch Diskriminierung und Habituation in Mice

Morris Wasser-Labyrinth-Test: Optimierung für Mausstamm und Testumgebung

Ein Protokoll für die Housing Mäuse in einer angereicherten Umwelt

Die Tretmühle Ermüdungstest: Eine einfache, Hochdurchsatz-Assay von Fatigue-ähnliches Verhalten für die Maus

Olfaktorische Behavioral Testing in der adulten Maus

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Untersuchung der Auswirkungen von eingeatmeten Umweltschadstoffen auf die Geruchsfunktion bei Mäusen

Riech Assays für Mausmodelle für Neurodegenerative Disease