この方法は、異なる環境要因に応じて、茶葉毛虫の子犬の生態、異なる環境要因に応じてそれらの子犬の行動および子犬の生存率などの外萎縮性の生態に関連する重要な情報を提供することができる。この技術の主な利点は、あなたがそのような子犬の好みを測定し、外萎縮グリセンの出現の成功を測定するなどの簡単な方法を使用することができます。まず、茶の植物から新鮮な芽をカットします。
その後、水道水で250ミリリットル三角形のフラスコを満たし、フラスコに芽を入れます。3~4個のフラスコをプラスチック製の洗面器に移します。次に、1,000~2,000の幼虫をE.grisescensの実験室コロニーから茶芽の葉に放出する。
制御された実験室の条件で幼虫を維持する。芽の葉から落ちる成熟した、最後のインスターの幼虫を取得し、積極的に流域の底に沿ってさまよいます。80°Cのオーブン乾燥機で3日間、土壌と砂を殺菌します。
その後、土壌と砂の両方を摂氏50度で数週間乾燥させます。この基板サンプルは、時間の経過とともに重量が変化しない場合に十分に乾燥する。乾燥した土壌を粉砕するために木製の害虫とモルタルを使用してください。
その後、3ミリメートルのふるいを通して砂と地面の土壌をふるいにかける。必要な量の蒸留水を、基板を含む密閉袋に加え、十分に混ぜます。次に、PVCシートを使用してポリプロピレン容器を6つの等しいチャンバーに分割します。
PVCシートを固定し、ホット接着剤で亀裂を密封します。次に、同じタイプの基板を異なる水分内容で6つのチャンバーに充填します。ポリプロピレン容器の蓋の内面に4〜6枚の新鮮な葉を貼り付けるテープの小片を使用してください。
次に、チャンバー容器の蓋にペーストした葉に30の成熟した最後のインスター幼虫を放出する。蓋を慎重に裏返し、容器を覆います。26°Cで14〜10光周期で環境室でバイオアッセイアリーナを維持します。
5日目に、各チャンバ内の基板表面の子犬の数を数える。バイオアッセイを解体し、子犬の数を数えます。まず、PVCシートを使用してポリプロピレン容器を4つのチャンバーに分割します。
その後、ホットグルーでPVCシートを固定し、密封します。同じ水分含有量とランダムに割り当てられた注文を持つ4種類の基材で容器のチャンバーを充填します。その後、テープを使用して新鮮な茶葉を蓋に貼り付け、容器にひっくり返します。
次に、幼虫を葉に移し、テキストプロトコルに概説されているようにデータを記録して分析します。12基質水分含有処理を調製した後、プラスチック容器に基板を加える。その後、各アリーナの基板に15成熟した最後のインスターの幼虫を解放します。
26°Cで14〜10光周期で環境室でバイオアッセイアリーナのそれぞれを維持します。3日目には、各アリーナの基質の表面上の子犬と死んだ幼虫の数を数えます。最後に、新しい成人が15日間出現しなくなるまで、毎日新興成人の数を記録します。
このプロトコルでは、水分および基質選択バイオアッセイを用いて、E.グリセンの子犬好みを研究した。水分選択バイオアッセイは、80%の水分砂と比較して、より多くの個体が5%および35%の湿気砂の上または内で子犬を示した。しかし、有意に多くの個体が中間水分含量の土壌上または内部での子犬を好む。
基質選択バイオアッセイは、砂が20%の水分条件下で、および80%の水分条件下でE.grisescensによって最も好ましいことを明らかにした。しかし、50%の水分条件下で4つの基質の中で子犬の好みは見つからなかった。開発後、この技術は昆虫学の分野の研究者が多くの土壌を子犬昆虫の子犬の生態学を探求する道を開いた。