Este método puede proporcionar información importante relacionada con la ecología de la pupación de las orugas de hoja de té, Ectropis grisescens, como sus comportamientos de pupa y la supervivencia de las pupas en respuesta a diferentes factores ambientales. La principal ventaja de esta técnica, permite utilizar un método simple como medir la preferencia de pupación y el éxito de emergencia de Ectropis grisescens. Para empezar, corta brotes frescos de plantas de té.
A continuación, llene un matraz triangular de 250 mililitros con agua del grifo y coloque los brotes en el matraz. Transfiera de tres a cuatro matraces a una cubeta de plástico. A continuación, libera de 1.000 a 2.000 larvas de una colonia de laboratorio de E.grisescens en las hojas de los brotes de té.
Mantener las larvas en condiciones de laboratorio controladas. Obtener las larvas maduras, de última estrella que caen de las hojas de los brotes y vagan activamente por el fondo de la cuenca. Esterilice el suelo y la arena en un secador de horno de 80 grados Celsius durante tres días.
Luego seque el suelo y la arena a 50 grados centígrados durante varias semanas. Las muestras de sustrato se secan lo suficiente cuando el peso no cambia con el tiempo. Utilice un pestillo de madera y mortero para moler el suelo seco.
A continuación, tamizar la arena y el suelo del suelo a través de un tamiz de tres milímetros. Agregue la cantidad necesaria de agua destilada a las bolsas selladas que contienen los sustratos y mezcle bien. A continuación, utilice láminas de PVC para dividir los contenedores de polipropileno en seis cámaras iguales.
Fije las láminas de PVC y selle las grietas con pegamento caliente. A continuación, llene las seis cámaras con el mismo tipo de sustrato con diferentes contenidos de humedad. Utilice pequeños trozos de cinta para pegar de cuatro a seis trozos de hojas frescas en la superficie interior de la tapa del recipiente de polipropileno.
A continuación, libere 30 larvas maduras de última generación en las hojas pegadas a la tapa del recipiente con cámara. Gire con cuidado la tapa y cubra el recipiente. Mantenga la arena de bioensayos en una cámara ambiental con un fotoperiodo claro/oscuro de 14 a 10 grados a 26 grados centígrados.
En el quinto día, cuente el número de pupas en la superficie del sustrato en cada cámara. Desmontar el bioensayo y contar el número de pupas. En primer lugar, utilice láminas de PVC para dividir los contenedores de polipropileno en cuatro cámaras.
A continuación, fijar y sellar las hojas de PVC con pegamento caliente. Llenar las cámaras del recipiente con cuatro tipos de sustrato con el mismo contenido de humedad y órdenes asignadas aleatoriamente. Luego, use cinta adhesiva para pegar hojas de té fresco en la tapa antes de darle la vuelta al recipiente.
A continuación, transfiera larvas a las hojas y registre y analice los datos como se describe en el protocolo de texto. Después de preparar los 12 tratamientos de contenido de humedad del sustrato, agregue el sustrato a los recipientes de plástico. Luego libera 15 larvas maduras de última estrella en el sustrato de cada arena.
Mantenga cada una de las arenas de bioensayo en una cámara ambiental con un fotoperiodo claro/oscuro de 14 a 10 grados centígrados a 26 grados centígrados. En el tercer día, cuente el número de pupas y cualquier larva muerta en la superficie del sustrato de cada arena. Por último, registre el número de adultos emergentes cada día hasta que no surjan nuevos adultos durante 15 días.
En este protocolo, se utilizaron bioensayos de humedad y elección de sustrato para estudiar la preferencia de pupación de E.grisescens. Los bioensayos de elección de humedad mostraron que más individuos pupe en o dentro de la arena de 5% y 35% de humedad en comparación con la arena de 80%humedad. Sin embargo, significativamente más individuos prefirieron pupar en o dentro del suelo con contenido intermedio de humedad.
Los bioensayos de elección de sustrato revelaron que la arena era más preferida por E.grisescens bajo condiciones de humedad del 20%, y bajo 80%condiciones de humedad. Sin embargo, no se encontró ninguna preferencia de pupación entre los cuatro sustratos bajo condiciones de humedad del 50%. Después del desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la entomología exploraran la ecología de la pupación de muchos insectos que se quemaban el suelo.
