Этот метод может предоставить важную информацию, связанную с экологией щенка гусениц чайного листа, эктропис grisescens, таких как их поведение окукливания и выжившего куколки в ответ на различные факторы окружающей среды. Основным преимуществом этой техники, она позволяет использовать простой метод, такой как измерение предпочтений окукливания и появление успеха Эктропис grisescens. Для начала вырезать свежие побеги из чайных растений.
Затем заполните 250 миллилитров треугольной колбы водопроводной водой и поместите побеги в колбу. Перенесите три-четыре колбы в пластиковый бассейн. Далее, отпустите от 1000 до 2000 личинок из лабораторной колонии E.grisescens на листья побегов чая.
Поддерживайте личинки в контролируемых лабораторных условиях. Получить зрелые личинки последней звезды, которые падают с листьев побегов и активно бродят по дну бассейна. Стерилизовать почву и песок в 80 градусов по Цельсию сушилка для духовки в течение трех дней.
Затем высушите почву и песок при 50 градусах по Цельсию в течение нескольких недель. Образцы субстрата достаточно высушены, когда вес не меняется с течением времени. Используйте деревянный пестик и раствор, чтобы измельчить высушенную почву.
Затем просеять песок и почву через трехмиллиметровое сито. Добавьте необходимое количество дистиллированной воды в запечатанные мешки, содержащие субстраты, и тщательно перемешайте. Далее используйте листы ПВХ, чтобы разделить полипропиленовые контейнеры на шесть равных камер.
Исправить ПВХ листов и печать трещины с горячим клеем. Затем заполните шесть камер одним и тем же типом субстрата с различным содержанием влаги. Используйте небольшие кусочки ленты, чтобы вставить четыре-шесть кусков свежих листьев на внутреннюю поверхность крышки полипропиленового контейнера.
Затем выпустить 30 зрелых личинок последней звезды на листья, начиненые крышкой камерного контейнера. Аккуратно переверни крышку и накрой контейнер. Поддерживайте биоанализную арену в экологической камере с фотопериодом от 14 до 10 световых/темных при 26 градусах Цельсия.
На пятый день подсчитайте количество куколок на поверхности субстрата в каждой камере. Смойте биоанализ и подсчитайте количество куколок. Во-первых, используйте листы ПВХ, чтобы разделить полипропиленные контейнеры на четыре камеры.
Затем, исправить и печать ПВХ листов с горячим клеем. Заполните камеры контейнера четырьмя типами субстрата с одинаковым содержанием влаги и случайными заказами. Затем используйте ленту, чтобы вставить свежие листья чая в крышку, прежде чем превратить его на контейнер.
Затем перенесите личинки на листья и завести и проанализируйте данные, изложенные в текстовом протоколе. После подготовки 12 субстратового содержания влаги, добавьте субстрат в пластиковые контейнеры. Затем отпустите 15 зрелых личинок последней звезды в субстрат каждой арены.
Поддерживайте каждую из арен биоанализа в экологической камере с фотопериодом от 14 до 10 световых/темных при 26 градусах Цельсия. На третий день подсчитайте количество куколок и любых мертвых личинок на поверхности субстрата каждой арены. Наконец, записывать число новых взрослых каждый день, пока не появляются новые взрослые в течение 15 дней.
В этом протоколе, влаги и субстрата выбор bioassays были использованы для изучения предпочтения pupation E.grisescens. Биоанализ выбора влаги показал, что больше людей окукливаются на или в пределах 5% и 35%влаги песка по сравнению с 80%влаги песка. Тем не менее, значительно больше людей предпочитают окукливаются на почве или внутри нее с промежуточным содержанием влаги.
Субстрат выбор bioassays показал, что песок был наиболее предпочтительным E.grisescens под 20%влаги условиях, и при 80%влаги условиях. Однако среди четырех субстратов при 50%-ных условиях не было обнаружено никаких предпочтений в отношении окукливания. После разработки, этот метод проложил путь для исследователей в области энтомологии, чтобы исследовать экологию окукливания многих почвоохаскующих насекомых.