Cette méthode peut fournir des informations importantes liées à l’écologie de la pupaation des chenilles des feuilles de thé, ectropis grisescens, tels que leurs comportements de pupation et la survie des pupes en réponse à différents facteurs environnementaux. Principal avantage de cette technique, elle vous permet d’utiliser une méthode simple comme mesurer la préférence de pupation et le succès d’émergence d’Ectropis grisescens. Pour commencer, couper les pousses fraîches des plants de thé.
Remplissez ensuite un flacon triangulaire de 250 millilitres avec de l’eau du robinet et placez les pousses dans le flacon. Transférer trois à quatre flacons dans un bassin en plastique. Ensuite, relâchez 1000 à 2000 larves d’une colonie de laboratoire d’E.grisescens sur les feuilles des pousses de thé.
Maintenir les larves dans des conditions de laboratoire contrôlées. Obtenez les larves matures de dernière image qui tombent des feuilles des pousses et errent activement le long du fond du bassin. Stériliser le sol et le sable dans un séchoir à four de 80 degrés Celsius pendant trois jours.
Ensuite, séchez le sol et le sable à 50 degrés Celsius pendant plusieurs semaines. Les échantillons de substrat sont suffisamment séchés lorsque le poids ne change pas au fil du temps. Utilisez un pilon et un mortier en bois pour moudre le sol séché.
Tamisez ensuite le sable et le sol à travers un tamis de trois millimètres. Ajouter la quantité requise d’eau distillée dans les sacs scellés contenant les substrats et bien mélanger. Ensuite, utilisez des feuilles de PVC pour diviser les contenants en polypropylène en six chambres égales.
Fixer les feuilles de PVC et sceller les fissures avec de la colle chaude. Ensuite, remplissez les six chambres avec le même type de substrat avec un contenu d’humidité différent. Utilisez de petits morceaux de ruban adhésif pour coller quatre à six morceaux de feuilles fraîches à la surface intérieure du couvercle du contenant en polypropylène.
Ensuite, relâchez 30 larves matures du dernier stade sur les feuilles passées au couvercle du récipient chambé. Retourner délicatement le couvercle et couvrir le récipient. Maintenir l’arène de bioassay dans une chambre environnementale avec une photopériod légère/foncée de 14 à 10 à 26 degrés Celsius.
Le cinquième jour, comptez le nombre de pupes à la surface du substrat dans chaque chambre. Démanteler le bioassay et compter le nombre de pupes. Tout d’abord, utilisez des feuilles de PVC pour diviser les contenants en polypropylène en quatre chambres.
Ensuite, fixez et scellez les feuilles de PVC avec de la colle chaude. Remplissez les chambres du récipient de quatre types de substrat avec la même teneur en humidité et des ordres assignés au hasard. Ensuite, utilisez du ruban adhésif pour coller des feuilles de thé fraîches sur le couvercle avant de le retourner sur le contenant.
Ensuite, transférez les larves vers les feuilles et enregistrez et analysez les données décrites dans le protocole textuel. Après avoir préparé les 12 traitements de teneur en humidité du substrat, ajouter le substrat aux contenants en plastique. Relâchez ensuite 15 larves matures du dernier stade dans le substrat de chaque arène.
Maintenir chacune des arènes de bioassay dans une chambre environnementale avec une photopériod légère/foncée de 14 à 10 à 26 degrés Celsius. Le troisième jour, comptez le nombre de pupes et de larves mortes à la surface du substrat de chaque aréna. Enfin, enregistrez le nombre d’adultes émergents chaque jour jusqu’à ce qu’aucun nouvel adulte n’émerge pendant 15 jours.
Dans ce protocole, des bioassays de choix d’humidité et de substrat ont été utilisés pour étudier la préférence de pupation des E.grisescens. Les bioassays de choix d’humidité ont prouvé que plus d’individus ont pupated sur ou dans le sable d’humidité de 5% et 35% comparé au sable d’humidité de 80%. Cependant, beaucoup plus d’individus ont préféré se puper sur ou à l’intérieur du sol avec la teneur intermédiaire en humidité.
Les bioassays de choix de substrat ont indiqué que le sable était le plus préféré par E.grisescens dans des conditions d’humidité de 20%, et dans des conditions d’humidité de 80%. Cependant, aucune préférence de pupation n’a été trouvée parmi les quatre substrats dans des conditions d’humidité de 50%. Après le développement, cette technique a ouvert la voie à des chercheurs dans le domaine de l’entomologie pour explorer l’écologie de la pupaison de nombreux insectes pupating du sol.
