ヒト以外の霊長類モデルにおける変性網膜疾患の網膜色素上皮移植

網膜色素上皮移植移植時の卵胞外傷は、視力低下の結果をもたらす可能性がある。この提案された方法は、従来の技術と比較して、葉の涙の可能性を低減することができます。提案された方法は、陰部下の癒着の放出、レチン層のより良い視覚化、およびブレブ形成中の接線剪断力を含む、卵胞外傷に寄与する複数の要因に対処する。

この技術は、硝子体内プラスミノーゲン前処理、顕微鏡統合OCT誘導性レティナルブレブ形成、およびデュアルボアカニューレを使用したパーフルオロカーボン液体硝子タンポネードを含む、より穏やかな手順で卵胞外傷の可能性を生成する。この手順のデモンストレーションは、劉善平上級研究員と、研究室の研究助手であるダニエル・ソ・リン・ウォン氏です。シニアコンサルタントのゴパル・リンガム教授も手術手順をデモンストレーションします。

まず、360度の結膜周囲の結膜を切開するためのVannasはさみを使用し、腹膜を拡大するために鈍い解剖を行います。25ゲージのマイクロビトレオレチナルブレードを使用して、右目の8時または左目の4時に、スクレラで3ミリメートルの切開を行います。7-0のVicryl縫合線を使用して25ゲージのカスタム側ポート注入カニューレと縫合を挿入します。

ビトリアル内の位置を確認した後、バランスの取れた塩溶液の注入を開始し、20ミリリットルの水銀の眼圧を維持するようにシステムを設定します。25ゲージのフラットヘッドトロカールを使用して、右目の2時または左目の10時にスクレラを切開します。25ゲージのシャンデリアライトをフラットヘッドトロカーに挿入し、粘着テープで光を固定します。

光源を約60%に調整し、10時に右目で別の硬化性を発揮し、図示したように左目に対して2時に別の硬化性を発揮します。結び目を結ぶことなく、強膜の周りにU字型のVicryl 7-0縫合を配置します。強膜切開術を通して、四面体を挿入します。

エントリーポートの周りに座間切開術を行い、続いて短いコアの小腸切開術を行い、1分間に最大5,000カット、水銀400ミリメートルで最大吸引します。より良いウイルスの視覚化のためにトリアムシノロンの20〜50マイクロリットルを注入する。網膜から膜炎の体を分離して、後部の膜膜剥離を誘発する。

後部の膜子剥離の穏やかな誘導を可能にするために、光ディスクの上にビトレクターを置きます。ビトレクターは、切断を伴うことなく最大400ミリメートルの水銀で吸引でのみ維持します。必要に応じて、25ゲージの眼内鉗子を使用して、剥離を促進するために腹膜皮質を引き裂く。

カッターで後舌膜を開き、取り外した膜状のスカートを、膜底まで取り除きます。残りのトリアムシノロンを残り、残りは、残り、残りは、その表面に吸引する。パーフルオロカーボン液を1~2ミリリットル注入し、後極を前部および中周部のレチナまで覆います。

眼下注射カニューレで眼を入る。25 x 41ゲージカスタマイズされたデュアルボア副レティナル注射カニューレまたは25 x 38ゲージの副レティナリ注射カニューレを、250マイクロリットルシリンジに接続して、副レチンゲル注射に使用します。眼圧を水銀の0~4ミリメートルに設定します。

BSSの網膜下注射を穏やかに行い、局所的な網膜剥離を誘発する。ブレブが窩を横切ったら、BSSを注入するのをやめなさい。別の方向から 2 番目のブレブを作成します。

両方のブレブをマージして、フォビアを完全に取り外します。術中光学コテレンス断層撮影機能を有効にして、ブレブ形成を可視化し、ラインスキャンとキューブスキャンが高精細モードであることを確認して、foveaで画像を取得します。垂直25ゲージのビトレオレチナルはさみで1.5ミリメートルに、移植のための副腎腔へのアクセスを可能にする。.

眼圧を水銀50ミリメートルに設定します。パーフルオロカーボン液を除去するためにブラシをかけたシリコーンの先端カニューレを使用してください。1.4ミリメートルの切開ナイフを使用して、硬化切開を延長します。

20ゲージ拡張可能ループ器械を入力し、掻き取ることによって、眼下宿主網膜色素上皮を取り除く。シューティングデバイスの先端を硬化切開術に挿入し、20ミリメートルの水銀の眼圧で膜内空洞を通過します。ブルックス膜に面した細胞キャリア側と感光移植体が感光体に面したレティノトミーの表面から作られたレティノトミーエッジを介して、インプラントを受け目下腔に注入します。

術中の光コテレン断層撮影機能を有効にすることで、インプラントの位置を可視化します。下レチナル注入カニューレまたは25ゲージ湾曲した眼内はさみでインプラント位置を調整して、インプラントが無傷の上にあるレチナリの空間のブルックス膜に平らに置かれていることを確認し、作成されたレチノトミーから遠く離れた位置にあり、レチノトミー部位に影響を与えないようにします。流体空気交換にはブラシをかけたシリコーンチップカニューレを使用し、網膜がインプラントの上に再び取り付けられるまで、ブレブ網膜剥離と網膜切除エッジアポ位置から網膜下液を穏やかに吸引します。

次に手術を終了するには、あらかじめ配置された7-0のVicryl縫合糸を使用して、作業用ポート硬化性を閉じます。8時の側膜切開術で、2ミリグラム当たり0.05ミリリットルのビトリアクチノロンを投与する。シャンデリアと注入カニューレを取り外します。

Vicryl縫合糸でこれらの強結膜を閉じます。眼内圧が許容範囲内であることを確認するために眼を触診する。必要に応じて、30ゲージ針を介してフィルタされた空気またはBSSを注入します。

様々なイメージングモダリティに対する左眼下網膜色素上皮移植移植のインビボイメージングを、最大3ヶ月間実施した。眼窩の写真は、窩で移植された移植片が時間の経過とともに移動しなかったことを示した。眼管の自己蛍光イメージングは、網膜色素上皮移植片と重なり合うハイパーオート蛍光の最小変化を示した。

初期および後期の眼科フルオレセイン血管造影は、移植片を取り巻く漏れを示さなかった。黄斑光コテレンス断層撮影画像は、時間が経つにつれて移植片上の外側網膜層の保存を示し、網膜色素上皮細胞の機能性を示唆した。HE染色は、マイクロ涙の証拠のない無傷のレチン層を示した。

術中光学コテレン断層撮影は、眼窩剥離中のブレブ寸法および潜在的な窩涙の視覚化を可能にする。涙の存在は、ブレブ形成を妨げる可能性があります。正しいブレの形成の成功は、涙の欠如によって示された。

網膜の機能評価のために、網膜色素上皮異種異種眼の全視野電解電解評価を行った。電解波波形の著しい劣化がないことは、異種移植片と共にロッドと錐錐体の両方の機能が維持されたことを示唆している。局所的なレチナルブレブの作成中に、ジェット速度の急激な変化が頭葉の涙につながる可能性がありますので、非常に穏やかにそれを行います。

このステップをゆっくりと実行することは、頭外損傷を軽減するための鍵です。眼道の自己蛍光、蛍光血管造影、および光コヘレンス断層撮影、および電気生理学研究を含むマルチモーダルイメージングは、移植片の生存性およびそれに影響を与える因子に関するより大きな洞察を提供することができる。