私たちのプロトコルは、ラットモデルを使用して子宮仙靭帯サスペンション手術を説明する最初のプロトコルの1つであるため、将来の研究者が前臨床結果と手術の変更を研究するための青写真として実際に役立ちます。ラド子宮仙靭帯は、人間の子宮仙靭帯と比較して、解剖学的、細胞性、組織学的構造、および組成が似ています。これらのコンポーネントは、コストメリットと実現可能性を組み合わせることで、子宮仙靭帯サスペンション手術の増強と結果を研究するための非常に優れたモデルになります。
引張試験方法は、他の骨盤底動物モデルでの使用に適合させることができます。さらに、将来の研究者は、一般的な手術のセットアップを使用して、他の脱出手術や仙骨肛門固定術などのげっ歯類に通知できます。まず、手術用ガウン、ヘッドカバー、マスク、滅菌手袋を着用します。
腹部だけを露出させたまま滅菌フィールドで動物を覆います。尾側の乳首の周りのクリッピングによる外傷による出血があるかもしれません。必要ならば、これを圧力または硝酸銀で止血させることができる。
メスの刃を使用して、剣状突起のすぐ下から下部乳首のラインまで、リネアアルバを下って7センチの切開を行います。切開は尿道開口部から0.5〜1センチメートルのロストロで終了する必要があります。次に、下の筋肉層を切開します。
腹部開創器を組み立て、腹腔を検査します。虹彩鉗子を使用して、左子宮角をそっと見つけます。グラスパーまたは蚊のクランプで左の子宮角をそっと持ち上げます。
蚊のクランプを使用して卵巣と卵管の下の角を結紮することによって子宮摘出術を開始します。子宮摘出術を続けるには、マイクロハサミを使用して子宮角から隣接する血管系、結合組織、および脂肪をクランプしてトリミングします。出血を減らすために、除去する前に結合組織をクランプすることを忘れないでください。
クランプを子宮界面のできるだけ近くに、子宮頸部接合部まで配置します。蚊の鉗子を使用して分岐点近くの子宮角を横切ってクランプします。出血を避けるために、同側の角をクランプにちょうど頭状に切除します。
ラット血管の口径が小さいため、この手術には一時的なクランプによる子宮断端の結紮で十分でした。しかしながら、この技術は、電気焼灼または縫合結糸のいずれかで椎弓根を密封することによって必要に応じて修正することができる。腹部開創器を調整して、骨盤下部を露出させます。
露出した膣金庫と骨盤底支持靭帯と膣と子宮頸部に付着した結合組織を検査します。卵巣の内側にある両側の尿管を特定します。子宮角の残りの切り株のすぐ下の子宮頸部に付着している子宮仙骨靭帯を特定します。
靭帯は、仙骨に向かって頭側の内側の向きで追跡されます。小さな先細りの針に3つのゼロポリジオキサノン縫合糸を置き、靭帯の高い位置にあり仙骨の近くにある左子宮仙靭帯にステッチを置きます。ステッチを引っ張って子宮仙骨靭帯を捕らえたことを確認し、靭帯構造が子宮頸部に挿入され、原点が直腸の後ろで分割され、仙骨に付着することを確認します。
繰り返しになりますが、尿管を特定して、子宮仙骨縫合に組み込まれたり、子宮仙骨縫合でねじれたりしていないことを確認します。次に、左のポリジオキサノンステッチを膣ボールトの左側の側面に通し、膣カフの前部と後部の両方を組み込みます。これらの手順を繰り返して、右側の子宮仙靭帯吊り下げ手順を完了します。
子宮仙骨ステッチを両側に配置した後、膣の金庫が仙骨に向かって頭蓋骨が高くなるように、正方形の結び目を使用して縫合糸をしっかりと結びます。まず、膣金庫が見えるまで脂肪組織を解剖します。無傷の子宮仙骨靭帯がはっきりと見えるか、子宮仙骨靭帯と膣金庫の間の接合部が見えるまで、腹部脂肪パッドを取り除き続けます。
柔軟な定規を使用して、子宮仙骨挿入と膣金庫の間の距離を測定し、組織の元の長さを推定します。組織が臍帯の中心になるように、無傷の子宮仙靭帯または子宮仙靭帯サスペンション接合部の後ろに臍帯テープを通します。デジタルキャリパーを使用して、アンビリカルテープと交差する組織の高さと幅を測定します。
値を推定するために、断面積の計算に用いられる。引張試験では、試験片がグリップの下の中央になるように動物を配置します。動物をプラテンに固定することにより、標本を囲む骨盤領域を固定します。
アンビリカルテープの尾がグリップに届きやすいようにロードセルを下げました。試料の操作を避けるために、テープをたるませたままアンビリカルテープをグリップに固定します。次に、ソフトウェアインターフェイスでプレコンディショニングテストを開き、テストにサンプル名のラベルを付けます。
プレコンディショニング方法にプリロードステップが含まれていることを確認します。クリックしてプレコンディショニングテストを開始し、サンプルを0.015ニュートンでプリロードします。予圧力が安定したら、テストはサンプルを毎秒0.1ミリメートルの伸び率で30秒間事前調整します。
30秒後、組織を1分間休ませます。それまでの間、プルから障害テスト体制をロードします。テストにサンプル名のラベルを付け、[次へ] をクリックして次のウィンドウに移動します。
サンプルのゲージ長を入力し、横をクリックしてテストページに遷移します。すべてのバランスを取り、[開始]をクリックします。組織が破損するまで、毎秒0.1ミリメートルの伸長率でテストを実行できるようにします。
テストでは、荷重変位データが生成されます。このプロトコルを使用して縫合糸を配置した後、子宮仙骨靭帯と膣金庫の間に新たに形成された接合部は、仙骨に向かって頭蓋骨を上昇させ、頸部断端の動きを妨げました。無傷の子宮仙靭帯および子宮仙骨靭帯懸垂サンプルについて、引張試験は、荷重変位曲線、応力ひずみ解析、および折れ線曲線適合式の傾きなどのプロットによって評価されました。
データは、修復サンプルのすべての構造材料特性が天然の子宮仙靭帯のそれよりも低いことを示しました。構造は小さいため、それらを特定するには綿密な解剖の練習が必要です。特に演劇は特定が難しい場合があるため、分析範囲が役立つ場合があります。
また、サバイバル手術の前に死体手術で練習することをお勧めします。子宮仙靭帯懸濁液の増強経路と、靭帯の機械的試験のための新しい方法論について説明します。目標は、私たちのプロトコルに記載されている増強が、脱出手術を将来より成功させ、したがって患者にとってより良いものにすることです。