Nosso protocolo é um dos primeiros que utiliza um modelo de rato para descrever a cirurgia de suspensão do ligamento uterossacro e, portanto, pode realmente servir como um modelo para futuros investigadores estudarem os resultados pré-clínicos e as modificações da cirurgia. O ligamento raduariossacro é semelhante em anatomia, celularidade, arquitetura histológica e composição em comparação com o ligamento uterossacro humano. Esses componentes combinados com o custo-benefício e a viabilidade o tornam um ótimo modelo para estudar o aumento e os resultados da cirurgia de suspensão do ligamento uterossacro.
O método de ensaio de tração pode ser adaptado para uso em outros modelos animais do assoalho pélvico. Além disso, futuros investigadores poderiam usar uma configuração de cirurgia geral para informar outras cirurgias de prolapso e roedores, como a sacrocolpopexia. Para começar, use avental cirúrgico, capa para a cabeça, máscara e luvas estéreis.
Escorra o animal com um campo estéril deixando apenas o abdômen exposto. Pode haver algum sangramento devido ao trauma do clipping ao redor do par caudal de mamilos. Se necessário, este pode ser feito hemostático com pressão ou nitrato de prata.
Faça uma incisão de sete centímetros pela linha alba logo abaixo do processo xifoide até a linha inferior do mamilo usando uma lâmina de bisturi. A incisão deve terminar 0,5 a um centímetro do rostro do orifício uretral. Em seguida, faça uma incisão através da camada muscular abaixo.
Monte o afastador abdominal e inspecione a cavidade abdominal. Usando pinça de íris, localize suavemente o corno uterino esquerdo. Eleve suavemente o chifre uterino esquerdo com um pinça ou pinça de mosquito.
Comece a histerectomia ligando o chifre abaixo do ovário e oviduto usando uma braçadeira de mosquito. Para continuar a histerectomia, pinçar e aparar a vasculatura adjacente, o tecido conjuntivo e a gordura do corno uterino usando microtesoura. Lembre-se de apertar o tecido conjuntivo antes da remoção para reduzir o sangramento.
Coloque as pinças o mais próximo possível da interface uterina e até a junção uterocervical. Aperte o chifre uterino perto do ponto de bifurcação usando pinças de mosquito. Excise o corno ipsilateral apenas cefálico à pinça para evitar sangramento.
Devido ao pequeno calibre dos vasos das ratas, a ligadura dos cotos uterinos com pinça temporária foi suficiente para esta cirurgia. No entanto, essa técnica pode ser modificada conforme a necessidade, seja selando os pedículos com eletrocautério ou ligadura de sutura. Ajustar o afastador abdominal para expor a pelve inferior.
Inspecione a abóbada vaginal exposta e os tecidos ligamentares e conjuntivos de suporte do assoalho pélvico ligados à vagina e ao colo do útero. Identificar o ureter bilateralmente, que é apenas medial aos ovários. Identificar os ligamentos uterossacrais que podem ser encontrados ligados ao colo do útero logo abaixo dos cotos restantes dos cornos uterinos.
O ligamento é traçado na orientação medial cefálica em direção ao sacro. Coloque uma sutura de polidioxanona de três zero em uma pequena agulha cônica e coloque um ponto através do ligamento uterossacro esquerdo localizado no alto do ligamento e próximo ao sacro. Puxe o ponto para garantir que ele tenha capturado o ligamento uterossacro, garantindo que a estrutura ligamentar se insira no colo do útero com a origem se dividindo atrás do reto, onde se liga ao sacro.
Novamente, identifique o ureter para garantir que ele não tenha sido incorporado ou torcido com o ponto uterossacral. Em seguida, passe o ponto de polidioxanona esquerda através da face esquerda da abóbada vaginal, incorporando os aspectos anterior e posterior do manguito vaginal. Repita estes passos para completar o procedimento de suspensão do ligamento uterossacro no lado direito.
Após a colocação dos pontos uterossacrais bilateralmente, amarre firmemente a sutura com um nó quadrado de tal forma que a abóbada vaginal seja elevada em direção ao sacro. Primeiro, disseque o tecido adiposo até que a abóbada vaginal esteja visível. Continue a remover os coxins de gordura abdominal até que o ligamento uterossacro intacto seja claramente visível ou na junção entre o ligamento uterossacro e a abóbada vaginal seja visível.
Usando uma régua flexível, meça a distância entre a inserção uterossacra e a abóbada vaginal para estimar o comprimento original do tecido. Rosqueie a fita umbilical atrás do ligamento uterossacro intacto ou da junção de suspensão do ligamento uterossacro de tal forma que o tecido esteja centrado na fita umbilical. Medir a altura e a largura do tecido onde este se cruza com a fita umbilical utilizando paquímetro digital.
Para estimar os valores, utilizado para calcular a área de secção transversal. Para o ensaio de tração, posicione o animal de tal forma que o espécime fique centralizado sob a pega. Imobilizar a região pélvica ao redor do espécime, prendendo o animal à placa.
Abaixado as células de carga de tal forma que as caudas da fita umbilical alcançam facilmente a aderência. Fixe a fita umbilical no punho deixando a fita frouxa para evitar a manipulação do espécime. Em seguida, abra o teste de pré-condicionamento na interface do software e rotule o teste com o nome da amostra.
Certifique-se de que o método de pré-condicionamento inclua a etapa de pré-carga. Clique para iniciar o teste de pré-condicionamento que irá pré-carregar a amostra a 0,015 Newton. Uma vez que a força de pré-carga esteja estável, o teste pré-condicionará a amostra a uma taxa de alongamento de 0,1 milímetros por segundo durante 30 segundos.
Após 30 segundos, deixe o tecido descansar por um minuto. Enquanto isso, carregue o regime de teste pull to failure. Rotule o teste com o nome da amostra e clique em Avançar para ir para a próxima janela.
Insira o comprimento do medidor da amostra e, em seguida, clique em ao lado de fazer a transição para a página de teste. Salve tudo e clique em Iniciar. Permitir que o teste seja executado a uma taxa de alongamento de 0,1 milímetros por segundo até que o tecido tenha sido puxado até a falha.
O teste produzirá dados de deslocamento de carga. Após a colocação das suturas com esse protocolo, a junção neoformada entre o ligamento uterossacro e a abóbada vaginal foi elevada cefálica em direção ao sacro e impediu a movimentação do coto cervical. Para a amostra de suspensão do ligamento uterossacro intacto e do ligamento uterossacro, o ensaio de tração foi avaliado por gráficos como curva de deslocamento de carga, análise de tensão e equação de ajuste da curva de reta inclinação da reta.
Os dados mostraram que todas as propriedades estruturais do material da amostra de reparo foram menores do que as do ligamento uterossacro nativo. As estruturas são pequenas e, portanto, identificá-las requer a prática de dissecção meticulosa. O teatro especificamente pode ser difícil de identificar, então um escopo de dissecação pode ser útil.
Também sugerimos a prática com cirurgias em cadáveres antes de cirurgias de sobrevivência. Descrevemos uma via para o aumento da suspensão do ligamento uterossacro, bem como uma nova metodologia para o teste mecânico do ligamento. O objetivo é que o aumento descrito em nosso protocolo torne a cirurgia de prolapso mais bem-sucedida no futuro e, portanto, melhor para os pacientes.
