TGFRは、腎機能のリアルタイム評価を提供します。従来のマーカーと比較して、TGFRは同じ動物の腎機能の変化を複数回監視できます。さらに、この技術は採血や尿の採取を必要としません。
異種移植の最近の進歩に伴い、豚モデルを使用してより多くの研究が行われます。したがって、このツールはトランスレーショナルリサーチに不可欠であり、今後数年間で臨床的に利用される可能性が高いと考えています。実験は3〜7日齢の子豚で行われます。
動物は低体温、血液量減少、および手術から生じる他の合併症を起こしやすいです。したがって、手順全体を通して綿密な監視が必要です。また、この方法論には気管切開術と血管カニューレが含まれるため、練習が必要です。
手順のために動物を準備した後、ブタの盲腸は左傍腰椎窩にあるので、外科用刃を使用して5〜6センチメートルの左傍正中垂直切開を作成します。表在性上腹部血管の損傷を避けて、腹壁層を解剖します。腹膜層を切開したら、開創器を使用して腹腔内構造へのアクセスを改善し、腹部の左上の象限にあるらせん状結腸を特定します。
盲腸を見つけるには、らせん状の結腸を尾側と背側にたどります。盲腸の基部にあるらせん状結腸は腸骨に接合されています。回盲部接合部のちょうど遠位に盲腸を結睦する。
18ゲージの針を使用して、盲腸に7つの穴を開け、腹膜領域に糞便を押し出します。単純な中断または連続ステッチを使用して、3/0シルク縫合糸で腹部層を閉じます。可能であれば、ステープラーを使用してスキン層を閉じることもできます。
8時間の盲腸結紮後、経皮GFR測定を開始します。MB サービス ソフトウェア バージョン 3.0 を使用して、GFR デバイスのサンプリング レートを調整します。USBコネクタを使用して、経皮GFRデバイスをコンピューターに接続します。
MBサービスソフトウェアを開きます。[接続]をクリックして、タイミングを4, 000ミリ秒に調整します。[書き込み]をクリックして設定を保存し、[切断]をクリックします。
透明な窓のある両面粘着パッチをデバイスの片側に取り付けます。バッテリーをデバイスに接続し、発光ダイオードが透明なウィンドウの上に重なってトレーサーを検出できるようにします。バッテリーを取り付けたら、すぐに粘着パッチをデバイスを所定の位置に貼り付けます。
しっかりと固定されていることを確認してください。子豚は深く麻酔されているため、デバイスを所定の位置に保持するためにテープが不要になる場合があります。生理食塩水でFITCシニストリン溶液1ミリリットルあたり50ミリグラムを調製し、適切な投与量を注射器に引き込みます。
薬の入った注射器を三方活栓の片側に取り付け、生理食塩水を活栓の反対側にフラッシュします。FITCシニストリンを押し、すぐに5ミリリットルの生理食塩水ボーラスを押してから、子豚の静脈への三方活栓を閉じます。デバイスを子豚に4時間取り付けたままにします。
この間のモーションアーチファクトを避けるために、原稿に記載されているように子豚を麻酔下に置いてください。4時間の終わりに、デバイスを取り外し、すぐにバッテリーを外します。サプライヤーが提供するUSBコネクタを使用して、経皮GFRデバイスをコンピューターに接続します。
MB ラボ ソフトウェアを開いて、デバイスからデータを取得します。生データを保存するには、[接続] をクリックして [読み取り] を選択します。次に、デバイスが読み取りを完了するのを待ちます。
[名前の変更]をクリックし、最後に[保存]をクリックします。保存されたデータは、マニュアルの指示に従って分析ソフトウェアで処理および評価されます。簡単に言うと、MBスタジオを開き、[ロード]をクリックして保存データをインポートします。
自動マーカーを使用して、オフセット、開始位置、停止位置を調整します。必要に応じてアーティファクトを削除します。3コンパートメントモデルを選択し、フィットをクリックしてFITCシニストリンクリアランスを分単位で示す読み出しを取得し、この式を使用してTGFRを計算します。
偽動物と敗血症動物の両方が同等の体重を持っていました。敗血症の12時間後、敗血症のマーカーであるC反応性タンパク質の血清レベルの上昇が敗血症群で観察されました。FITCシニストリンクリアランス曲線は、術後12時間の偽子豚および敗血症子豚について示されました。
腎機能障害を有する敗血症性ブタは、曲線下面積の増加を示した。敗血症の子豚はFITCシニストリンのクリアランス障害を示し、急性腎障害を示した。偽群と敗血症群のFITCシニストリンの平均半減期はそれぞれ114分と537分でした。.
偽群の平均GFRは敗血症群よりも有意に高かった。0時間および12時間の血清クレアチニンレベルは、偽群で同様でした。しかしながら、12時間後に敗血症ブタのクレアチニンレベルに有意な増加が観察された。
バッテリーが子豚に正しく接続されていることを確認してください。電池が外れると、デバイスは動作しません。複数のピークを防ぐために、FITCシニストリンを1つの流体ボーラスに注入してみてください。
また、モーションアーチファクトを防ぐために、デバイスが子豚に正しく接続されていることを確認してください。GFRをリアルタイムに測定することで、腎機能を適切に評価して早期AKIを検出し、場合によっては調査中の治療薬を評価することができます。
