FACS単離マウスサテライト細胞のCUT&RUN解析のための効率的なプロトコール

私たちの研究室では、20年以上前から核内受容体の病態生理学的役割に関心を持っています。in vivoの機能を解読するために、その発現を空間的・時間的に制御できるマウスモデルを作製しました。並行して、マウス組織における分子機能を調べるための最先端の技術を開発しました。

私たちの科学的関心は、最近、骨格筋を含むさまざまな組織におけるセコステロイドおよびステロイド受容体のシグナル伝達を決定することにつながりました。我々は最近、骨格筋の細胞を分化させる筋線維のアンドロゲン受容体が、骨格筋の収縮機能や代謝機能に関与していることを実証しました。私たちの最近の発見は、筋肉関連疾患の効果的な治療法を開発するために不可欠な骨格筋の病態生理学的ダイナミクスのより深い理解を提供します。

このプロトコールは、in vivoで筋幹細胞のシストロム解析を行えるように開発されました。以前のすべてのプロトコルは、in vitroモーダルを使用しており、調査を生物全体のコンテキストから完全に切り離します。低コストで時間効率が良いことに加えて、このプロトコルは骨格筋前駆細胞のトランスクリプション因子の募集そしてクロマチンの景色を調査する有効な実験設定を提供する。

このプロトコルによって調製されたクロマチンは、サテライトセルにおけるARシストロムのゲノムワイドな分析を初めて提供し、遺伝子制御に関する将来の研究を促進します。私たちの将来の目標は、これらの研究を他のオキソステロイド受容体に拡張し、骨格筋の再生プロセスに関与するさまざまな細胞タイプにおけるそれらの特定の共調節因子を探索することです。