자유롭게 수영 물고기에서 이동 식 Tetrodes에 의해 뉴런의 무선 전기 생리적 기록

요약

자유롭게 수영하는 금붕어의 뇌에서 세포 외 신경 신호를 기록하기위한 새로운 무선 기술이 제시됩니다. 기록 장치는 두 개의 테트로데스, 마이크로 드라이브, 신경 데이터 로거 및 방수 케이스로 구성됩니다. 데이터 로거와 커넥터를 제외한 모든 부품은 맞춤 제작됩니다.

초록

물고기는 모든 척추 동물의 대부분을 구성하지만 물고기 행동을 지배하는 신경 메커니즘은 대부분 알 수없는 남아있다. 자유롭게 움직이는 물고기에서 뇌 활동을 기록하는 능력은 상당히 물고기 행동의 신경 기초에 연구를 진행합니다. 또한, 뇌의 기록 위치를 정밀하게 제어하는 것은 물고기 뇌의 영역에서 조정 된 신경 활동을 연구하는 데 중요합니다. 여기서는 자유롭게 수영하는 물고기의 뇌에서 무선으로 기록하는 기술을 제시하면서 기록 위치의 깊이를 제어합니다. 이 시스템은 마이크로 드라이브 제어 테트로드에 의해 기록 위치를 조정할 수있는 새로운 수성 호환 임플란트와 관련된 신경 로거를 기반으로합니다. 시스템의 기능은 금붕어의 텔렌세팔론에서 녹음을 통해 설명된다.

서문

물고기는 척추동물의 가장 크고 가장 다양한 그룹이며, 다른 척추동물과 마찬가지로 탐색, 사교, 수면, 사냥 등과 같은 복잡한 인지 능력을 발휘합니다. 그럼에도 불구 하 고, 물고기 행동을 지배 하는 신경 메커니즘 은 대부분 알 수 없는 남아.

지난 수십 년 동안, 고정 된 물고기에서 세포 외 기록은 주로 행동^1,2의신경 기초의 다른 측면을 조사하기 위해 구현되었습니다. 이 기술은 일부 감각 시스템에 적합하지만, 고정화 동물에서 불가능하지 않은 경우 행동의 신경 기초의 전체 스펙트럼의 조사는 어렵다. 첫 번째 발전은 테더 드 수영 물고기^3,4의Mauthner 세포에서 녹음을 포함. 그러나 Mauthner 셀은 불균형적으로 크고 몇 mV만큼 높게 갈 수있는 기록 된 동작 전위 진폭은 기록을 용이하게합니다. 나중에 Canfield 등은^물고기5의 말레전성에서 기록하기 위해 테더된 동물을 사용할 때 개념 증명을 설명했습니다. 물고기에서 신경 활동을 기록 하기 위한 또 다른 최근 기술은 칼슘 이미징 (오거와 드 폴라비에야^6에의해 리뷰를 참조, 그리고 Vanwalleghem^{외. 7).} 이 기술은 피부와 두개골이 애벌레 단계 동안 투명하기 때문에 얼룩말 유충과 함께 사용하기 위해 개발되었다. 그러나 이 기술은 개발 의 후반 단계에서 복잡한 행동을 연구하는 데 사용할 수 없습니다.

여기에서, 우리는 자유롭게 수영 물고기의 두뇌에서 세포 외 신경 활동을 기록하기위한 새로운 기술을 제시한다. 이것은 Vinepinsky 외^8에설명 된 프로토콜의 수정 된 버전입니다. 주요 혁신은 수술 후 전극의 위치를 제어 할 수 있게하는 마이크로 드라이브의 추가입니다. 이 기술은 마이크로 드라이브를 통해 신경 데이터 로거에 연결된 테트로데스 세트를 사용하여 금붕어의 말살망에서 기록하도록 설계되었습니다. 전체 설정은 무선이며 물고기의 두개골에 고정되어 있습니다. 시스템의 특정 무게는 물고기가 자유롭게 수영 할 수있는 작은 플로를 추가하여 물 특정 무게에 균등화됩니다.

이 기술은 온보드 메모리 장치에 신호를 증폭, 디지털화 및 저장하는 신경 데이터 로거를 사용합니다. 로거 원격 분석 시스템은 레코딩을 시작하고 중지하고 비디오 카메라와 동기화하는 데 사용됩니다. 이 프로토콜에서는 마이크로드라이브와 함께 방수 상자에 내장된 16채널 신경 로거가 사용됩니다.

마이크로 드라이브 어셈블리는 마이크로 드라이브 자체와 마이크로 드라이브 하우징(그림 1A, B)의두 가지 주요 구성 요소에서 제작됩니다. 하우징은 마이크로드라이브와 테트로젠을 보유하며, 또한 두개골과 로거 박스 사이의 앵커역할을한다(도 1C). PVC 로거 박스는 기계 공정을 사용하여 제작되고 O-링(도1E-G, 보조 도 1, 보충 도2 및 3차원 [3D] 다이어그램에 대한 보충 도면 3참조)을 사용하여 밀봉됩니다. 한쪽 끝에서, 폴리스티렌 폼의 조각은 임플란트의 무게를 보상하고 부력 중립 임플란트와 물고기를 제공하기 위해 로거 상자에 부착된다. 프로토콜에 기재된 마이크로드라이브의 구성은 Vandecasteele^{등 9에} 의해 제시된 절차를 따르며, 하우징에 마이크로드라이브를 부착하는 변형을 갖는다(도1A). 모든 주요 단계가 표시됩니다.

물고기 두개골을 준비하는 프로토콜에 기재된 절차는 Vinepinsky et^al.8에 제시된 것과 유사하며 프로토콜에 간략하게 설명된다. 수술 후 하루, 물고기는 일반적으로 완전히 마취의 효과에서 회복하고 행동 실험에 대한 준비가되어 있습니다. 마이크로 드라이브 나사를 돌려 테트로드 위치를 조정할 수 있습니다. 나사는 전체 회전당 300 μm의 간격을 가지며 목표 뇌 위치에 도달 할 때까지 75 μm의 전진을 권장합니다. 적절한 뇌 아틀라스는 관심있는 특정 뇌 영역을 대상으로 상담해야합니다. 배터리 또는 메모리 카드 교체를 위해 물고기를 마취 할 때마다 전극 임피던스를 테스트하는 것이 좋습니다.

프로토콜

모든 수술 절차는 동물 복지에 관한 지역 윤리 위원회(예: IACUC)의 승인을 받아야 합니다.

1. 마이크로 드라이브 하우징 의 건설

1. 하우징을 구성하려면 1mm 너비의 황동 플레이트를 톱을 사용하여 19mm x 29mm x 1mm 플레이트로 자른다. 각 슬릿이 좁은 면에서 6.5 mm 떨어져 있도록 가장자리에 수직으로 긴 면각각에 두 개의 5.5 mm 슬릿을 잘라냅니다(그림 2A).
2. 펜치를 사용하여 긴 측면의 슬릿 사이의 영역을 안쪽으로 접은 다음 아래쪽 부분을 안쪽으로 접고 위쪽을 바깥쪽으로 접어 하우징을 얻습니다(그림2B,C).
3. 3mm 드릴 비트를 사용하여 마이크로 드라이브 하우징의 나사 구멍을 만듭니다.
   참고: 이러한 구멍은 나중에 하우징을 로거 박스에 부착하는 데 사용됩니다(그림2D).
4. 하우징의 측면을 납땜합니다.
5. 미세한 원형 파일을 사용하여 하우징 하단에 반원형 슬릿을 반경 1.5 mm의 작은 생성합니다(그림2E).
   참고: 이것은 전극을 안내하기 위해 스테인레스 스틸 튜브를 삽입하는 데 나중에 사용됩니다.
6. 1mm 드릴 비트를 사용하여 테트로드의 하우징 뒷면에 구멍을 뚫습니다(그림2F).
   참고: 하우징의 3D 모델은 보조 housing.stl 파일에서찾을 수 있습니다.

2. 마이크로 드라이브의 건설

1. 커터를 사용하여 단일 행 남성 핀 헤더 스트립(그림 1H)에서3핀 조각을분리합니다. 펜치를 사용하여 가운데 핀을 당깁니다.
2. 커터를 사용하여 나머지 핀을 길이 10mm(나사 길이보다 2mm 낮음)로 자른다. 또 다른 가능성은 더 긴 나사를 사용하는 것입니다 (단계 2.4 참조).
3. 중간 핀 구멍을 통해 #65 드릴 비트를 사용하여 구멍을 뚫습니다. 00−99 탭을 사용하여 스레드를 드릴합니다.
4. 마이크로 드라이브와 황동 플레이트 (7.5 mm x 2.5 mm x 0.6 mm, 보조 그림 4참조)를 조립하여 황동 플레이트가 핀에 닿는 것을 확인하십시오. 첫 번째 황동 플레이트를 통해 나사 (#00-90 라운드 헤드, 12mm, 황동)를 삽입 한 다음 핀 헤더 스레드와 두 번째 황동 플레이트를 통해 삽입하십시오. 마지막으로 너트를 나사에 놓고 조립된 마이크로드라이브를 부드럽게 조입니다.
5. 황동 플레이트와 함께 핀을 납땜하고 나사 끝으로 너트를 납땜합니다.
6. 마이크로 드라이브 황동 플레이트의 측면에 있는 4개의 지점에서 마이크로드라이브 하우징에 마이크로드라이브를 납땜합니다.
7. 내경 1.5mm의 내경으로 6mm 길이의 스테인레스 스틸 튜브 1개를 자르고 내경 1.2mm의 다른 스테인레스 스틸 튜브를 3mm 길이로 자르십시오.
8. 에폭시를 사용하여 마이크로 드라이브 하우징 하단의 작은 반원형 슬릿에 6mm 길이의 튜브를 붙입니다. 3mm 길이의 스테인리스 스틸을 핀 헤더에 붙이고 하우징에 6mm 길이의 튜브를 부착합니다.
9. 직경 0.64mm의 5cm 길이의 실리콘 튜브 세그먼트 2개와 직경 0.250mm의 5cm 길이의 폴리이미드 튜브 1개를 잘라냅니다.
10. 세 개의 튜브를 두 개의 스테인리스 스틸 튜브에 삽입합니다. 시아노아크릴레이트 접착제를 사용하여 핀 헤더에 부착된 스테인리스 스틸 튜브에 튜브를 붙입니다. 마이크로 드라이브를 끝까지 조이고 두 개의 강철 튜브의 상단과 하단에서 과도한 튜브를 차단합니다.
    참고: 하우징이 있는 마이크로 드라이브를 사용할 준비가되었습니다(그림 1C).

3. 테트로드 어레이 준비

1. 각 tetrode에 4 개의 전극이있는 2 tetrode 임플란트를 제작하려면 직경 25 μm 의 텅스텐 와이어 중 12cm 길이의 Formvar 절연 된 8 개의 와이어를 준비하십시오.
   참고: 동일한 디자인은 4 개의 테트로드를 수용 할 수 있습니다.
2. 현미경 아래에 16채널 전극 인터페이스 보드(EIB-16) PCB용 홀더를 놓습니다(재료 표참조).
3. 부드러운 팁 트위저와 라이터를 사용하여 불꽃을 사용하여 한쪽에 있는 8개의 전선각각에서 코팅을 제거합니다.
   참고: 이는 나중에 와이어가 PCB 커넥터에 제대로 연결되도록 하기 위한 것입니다.
4. 구멍에 코팅 된 면으로 EIB-16의 구멍 중 하나에 와이어를 밀어 넣습니다. 핀을 놓고 펜치를 사용하여 누릅니다. 와이어의 핀과 코팅되지 않은 면 사이의 저항을 측정하여 연결을 확인합니다.
   참고: 저항은 옴의 수십의 순서에있다.
5. 8개의 와이어를 모두 가지고 3.4 단계를 반복합니다.
6. 각 와이어의 끝에 덕트 테이프를 사용하여 함께 네 개의 와이어의 두 그룹을 테이프.
   참고: 각 그룹은 나중에 함께 붙어 테트로드를 형성합니다.
7. 50 μm 직경으로 12cm 길이의 텅스텐 와이어 한 조각을 잘라냅니다. EIB-16 연결 중 하나에 연결합니다.
   참고: 이 와이어는 기준 전극역할을 할 것이다.
8. 75 μm 직경으로 12cm 길이의 베어 실버 와이어 2개를 자르면 기록 로거의 근거가 됩니다. EIB-16의 접지 연결에 두 와이어를 납땜합니다.
9. EIB-16을 전동 선삭 장치 위에 놓고 전동 튜닝 장치에 4개의 와이어로 구성된 한 그룹의 덕트 테이프 끝을 놓습니다. 시계 방향으로 130라운드를 적용한 다음 시계 반대 방향으로 20회 회전합니다. 티트로드를 덮기 위해 시아노아크릴레이트 접착제를 바친다.
10. 접착제가 치료될 때까지 기다립니다. 덕트 테이프 에 가까운 tetrode를 잘라.
11. 두 번째 tetrode와 3.9 및 3.10 단계를 반복합니다.
    참고: 이렇게 하면 완성된 2-테로드어레이(도 1D)가생성된다.

4. 임플란트 조립

1. 마이크로 드라이브를 끝까지 나사로 조입니다.
2. 1 x 3M 필립스 라운드 헤드 나사를 사용하여 EIB-16을 PVC 플레이트에 부착하십시오.
3. 소프트 엔드 핀셋을 사용하여 로거 박스 커버 앞면의 구멍을 통해 모든 테트로디와 와이어를 당깁니다.
4. 2 x 6M Phillips 플랫 헤드 나사를 사용하여 PVC 플레이트를 로거 박스 커버에 부착합니다. EIB-16 에 로거를 장착할 수 있도록 EIB-16 커넥터를 올바른 방향으로 유지합니다. 기록된 신호의 모션 아티팩트를 피하기 위해 EIB-16이 제자리에 고정되어 있는지 확인합니다.
5. 에폭시를 사용하여 상자에 와이어를 밀봉합니다. 1차 밀봉은 나중에 실온 가황(RTV)에 의해 수행되기 때문에 가능한 한 적게 적용하십시오.
6. 2mm 나사를 사용하여 마이크로 드라이브 하우징을 로거 박스 커버에 부착합니다.
7. 마이크로 드라이브 하우징 뒤쪽의 구멍을 통해 테트로데스와 모든 와이어를 나사로 연결합니다. 마이크로 드라이브의 두 실리콘 튜브를 통해 테트로드를 스레드합니다. 마이크로 드라이브의 폴리이미드 튜브를 통해 50 μm 텅스텐 와이어를 스레드합니다.
8. 움직임이 마이크로 드라이브와 일치하는지 확인하기 위해 튜브의 상단끝에 시아노 아크릴레이트 접착제를 적용하여 테트로데스와 와이어를 튜브에 붙입니다. 마이크로 드라이브를 끝까지 나사로 조입니다.
9. 움직임을 방지하기 위해 노출 된 테트 로드 및 마이크로 드라이브 하우징 내부의 전선에 부드러운 석유 (재료 표참조)를 적용하십시오.
10. 가열 된 면도날을 사용하여 12mm x 14.5 mm 페트리 접시 바닥 창을 잘라냅니다. 에폭시가 있는 마이크로드라이브 하우징 전면에 창을 부착합니다. 접지 선을 창 외부에 보관하십시오.
11. 로거 박스 커버와 마이크로드라이브 하우징 사이에 노출된 테트로데스와 와이어에 RTV 코팅을 적용합니다.
12. RTV가 경화되면 내부에 작은 무게로 상자를 닫고 밤새 물에 담그어 상자에 물이 새지 않도록하십시오.
13. 날카로운 가위를 사용하여 테로데스와 레퍼런스 와이어를 원하는 길이로 자른다.
14. 표시된 압출 폴리스티렌 폼(재료 표참조)을 상자에 부착합니다. 수조에 잠길 때 부력이 균형을 이루지 않도록 크기를 조정합니다.
15. tetrode 팁을 백금 블랙 용액에 담그고 직접 전류 (-0.2 μA)를 사용하여 전극을 코팅하고 원하는 대로 전극의 임피던스를 설정하십시오. 코팅 및 임피던스 측정에는 다중 전극 임피던스 테스터(재료 표참조)를 사용합니다.
    참고: 금붕어 골륨에서는 40 kOhm의 값이 가장 좋습니다. 용도에 따라, 전극 임피던스는 백금 블랙^{코팅(10,11)을}변형시킴으로써 조절될 수 있다.

5. 마취 준비 — 1% MS-222 주식 솔루션

주의 사항: 마취 제제에는 발암 물질인 분말 MS-222의 사용이 포함됩니다. 따라서 5.2 단계와 5.3 단계는 장갑을 사용하여 화학 후드에서 수행해야합니다.

1. 100 mL 이상을 포함할 수 있는 튜브에 100 mL의 물을 추가합니다.
2. 화학 후드에 일회용 웨이트 플레이트를 스케일에 놓습니다. 주걱을 사용하여 MS-222 분말 1 g을 추가 한 다음 튜브에 분말을 추가합니다.
3. 튜브를 잘 흔들어주세요.
   참고: 액체 형태로, MS-222장갑을 착용 화학 후드 외부에서 사용할 수 있지만 마스크를 필요로하지 않습니다.
4. 일회용 가중치 플레이트를 저울에 놓습니다. 주걱을 사용하여 중탄산나트륨 2 g을 추가 한 다음 튜브에 분말을 추가합니다. 튜브를 잘 흔들어주세요.

6. 물고기 두개골 준비

참고: 이 단계에서 물고기는 임플란트 수술을받을 준비가되어 있습니다. 수술 전에 모든 구성 요소와 소모품이 적절한 절차에 의해 멸균되었는지 확인하십시오. 이 단계에서는 물 밖으로 U 자형 물고기 홀더가 필요합니다. 이 프로토콜에서는 머리에서 꼬리까지 15cm 길이의 긴 금붕어에 맞는 알루미늄 홀더가 사용됩니다. 이 시스템은 아가미를 산소로 정중시키면서 물고기를 물 밖으로 내보올 수 있습니다. 자세한 내용은 비바인핀스키 외^8을참조하십시오.

1. 물고기가 잠들 때까지 20 분 동안 0.02 % MS-222 수조에 물고기를 놓습니다.
2. 멸균 장갑을 사용하여 물고기를 물에서 꺼내 홀더에 놓습니다.
   참고: 물고기를 정현으로 하는 산소화된 물은 0.02%의 농도로 MS-222를 함유하고 있어 수술 중 에도 물고기가 마취된 상태로 유지됩니다.
3. 멸균 주걱을 사용하여, 리도카인을 적용 5% 수술에 대한 지정된 장소 위의 피부에 페이스트 10 분, 다음 리도카인을 제거.
   참고: 특정 뇌 영역을 대상으로 적절한 뇌 아틀라스를 참조하십시오.
4. 멸균 15 블레이드 메스를 사용하여 임플란트 부위의 두개골 위의 피부를 제거하십시오.
5. 0.7mm 드릴 비트가 있는 치과 드릴을 사용하여 두개골에 4개의 구멍을 뚫습니다. 각 구멍에 1mm 나사(길이 3mm)를 삽입하고 나사를 삽입하기 전에 구멍에 시아노아크릴레이트 접착제를 적용합니다.
6. 치과 용 버니셔를 사용하여 나사와 노출 된 두개골 주변에 치과 시멘트를 적용하십시오.
7. 치과 드릴을 사용하여 관심있는 뇌 영역 위의 두개골에 5mm 직경의 구멍을 만듭니다. 두개골과 뇌 사이의 지방 조직을 제거하고 미세 핀셋과 연조직 종이를 사용하여 뇌 영역 대상을 노출. 두개골 아래의 큰 혈관이 손상되지 않도록주의하십시오.
   참고: 이 단계가 끝날 때까지 물고기는 프로브를 이식할 준비가 됩니다. 이 프로토콜과 관련된 주요 단계만 여기에 설명되어 있습니다. 몇 가지 수술 후 절차 (예 : 동물의 건강과 수술 도구 및 지역의 살균에 대한 자세한 문서)는 물고기 또는 작은 동물과 모든 수술에 적용 할 수 있기 때문에 제시또는 논의되지 않습니다.

7. 프로브 이식

참고: 프로토콜의 마지막 단계를 완료하려면 뇌에 삽입되는 동안 임플란트를 제자리에 고정할 수 있는 조작자가 필요합니다.

1. 조작기를 사용하여 로거 박스 덮개를 물고기 뇌를 향해 테트로드가 아래로 향하도록 합니다.
2. 테트로드가 뇌로 낮아질 때 참조가 뇌 외부에 유지되도록 기준 전극을 구부립니다.
3. 두개골에 맞도록 근거를 잘라냅니다. 선택적으로, 두개골 나사 중 하나에 하나의 접지 와이어를 연결합니다.
4. 마이크로 드라이브 하우징의 하단 부분이 두개골 근처에있는 동안 전극이 뇌에 삽입되도록 임플란트를 낮춥니다.
5. 하우징과 가장 가까운 두개골 나사 사이에 소량의 치과 시멘트를 적용하여 임플란트를 두개골에 부착하십시오.
6. 치과 시멘트의 첫 번째 부분이 경화 된 후 치과 시멘트를 적용하고 두개골 과 노출 된 두개골 위의 구멍을 닫습니다.
   참고: 일반적으로 전체 노출 된 두개골을 덮기 위해 여러 라운드의 치과 시멘트 응용 프로그램이 필요합니다.
7. 로거와 배터리를 상자에 설치하고 모든 나사로 상자를 밀봉하십시오.
8. 실험에 사용되는 생선의 종류에 따라 항생제와 국산 진통제를 적용하십시오.
9. 물고기가 깨어나기 시작할 때까지 물고기의 아가미를 깨끗한 물로 씻어 내보섭습니다. 홀더에서 물고기를 제거하고 홈 탱크에 다시 놓습니다.
   참고: 물고기는 수술 후 60 분 이내에 완전히 회복됩니다.
10. 물고기가 임플란트로 자유롭게 수영 할 수 있는지 확인하십시오(그림 3, 보조 비디오 1). 필요한 경우, 물고기가 쉽게 균형을 잡을 수 있도록 로거 박스 위의 압출 폴리스티렌 폼의 크기를 재조정하십시오.

결과

녹음 세션 동안 금붕어는 사각 물 탱크에서 자유롭게 수레를 수레로, 말렌세팔론의 신경 활동은 기록되었습니다. 이 실험의 목표는 단 하나 세포의 신경 활동이 물고기의 행동을 결정하는 방법을 연구하는 것이었습니다. 이렇게 하려면 기록된 데이터에서 스파이크 활동을 식별해야 했습니다. 뇌 활동은 기록되는 동안 31,250 Hz에서 디지털화되었으며 데이터 로거에 의해 300...

토론

이 프로토콜은 자유롭게 수영 금붕어의 말살망에 tetrode 배열을 이식에 관련된 단계를 자세히 설명합니다. 이 기술은 뇌의 테트로드 위치를 조정할 수있는 마이크로 드라이브와 함께 최대 16 채널에서 획득 한 신호를 증폭하고 기록하는 신경 로거를 구현합니다. 마이크로 드라이브는 기록을 최적화하기 위해 뇌의 위치를 조정할 수 있습니다.

이 프로토콜은 다른 뇌 영역(유사?...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.7 mm round drill bits			Compatible with the drill.
15-blade Scalpel	Sigma-Aldrich
16 channel PCB board	Neurlynx	EIB-16
1X3M phillips flat head screws			Stainless steel. Any type.
1X3M phillips round head screws			Stainless steel. Any type.
27 cm X 19 cm X 1 mm brass plate			See Figure 2
2X6M phillips flat head screws			Stainless steel. Any type.
3140 RTV coating	Dow Crowning	2767996
75 µm Silver wire	A-M Systems
Brass machine screws #00-90		947-1006
Brass plates 7.5mm X 2.5mm X 0.6mm			A 3D drawing is provided. See supplementary 1
Coated Tungsten wire 25µm	California Fine Wire Company	5000160	Depending on the appication the tetrodes can be fabricated from any type of wire. Popular wires are nicrome wires that can be found with lower diameters (eg. A-M systems, 762000)
Coated Tungsten wire 50µm	A-M Systems	795500	Can be replaced with any other wire with low impedance
Cyanoacrilic glue
Dental Burnisher	ComDent UK		Any small sterille stainless-still tool will do.
Dental cement - GCFujiPLUS	GC	431011	Other dental cements would probably will work as well although we have never tried any other.
Dental drill or nail polish drill			Dental drills are expensive, a nail polish drill can be a cheap replacement.
Drill bit #65		947-65
Fast curing epoxy			Any 5 minutes curing epoxy can be used here.
Logger box with O-ring sealing			A 3D drawing is provided. See supplementary 1-3. The box should be machine fabricated (do not use 3D printers). Use transperant material, to be able to see the indicator LEDs on the logger.
Motorized turning device			Custom made as described in "open ephys" website. Can also be purchusaed from neurolynx ("Tetrode Spinner 2.0") or bulit by other means.
Mouselog-16 Neural logger	Deuteron Technologies Ltd		There are several neural loggers available on the market, including: SpikeGadget (UH32 32channels) and Neurologger 2/2A/2B of Alexei Vyssotski. It should be noted that weight is not a major contraint since it can be counterbalanced with floating Styrofoam
MS-222	Sigma Aldrich	E10521	Ethtl 3-aminobenzoate methanesulfonate 98%
Nano-Z plating	White Matter LLC		The nano-Z can be bought from several supllieres. Any impedance meter can be used, e.g. IMP-1 / 6662 / 2788, BAK Electronics.
PCB pins	Neurlynx	Neuralynx EIB Pins
Polymide tubing 250µm	A-M Systems	822000
Rechargable battery			3.7 Lipo battery, 370 mAh. Holds about 6 hours of recording. Smaller or larger battries can be used to reduce the weight or extend recording time.
Silicone tubing 0.64 mm	A-M Systems	806100
Stainless steel 1.5 mm	A-M Systems	846000
Sudium Bicarbonate	Sigma Aldrich	S9625
Tap #00-90		947-1301
Vaseline			Any type of soft petroleum skin protectant can be used here.