<p class="jove_content"> 병원 아마토 루시타노, 카스텔루 브랑쿠 포르투갈. <br /> 병원 수사 마틴스, Guarda 포르투갈. </p>

<ol><li> 동맥은 3~7cm의 UC 작품에서 얻을 수 있습니다. </li><li> 동맥을 둘러싸는 와튼의 젤리는 신중하게 가위로 절단하여 제거되었습니다. </li><li> 0.6 - 1mm의 외경의 무딘 엔드 바늘은 해부 동맥의 한쪽 끝을에서 7mm에 대해 삽입했다. </li><li> 혈관 내부에 남아있는 혈액을 제거하려면 동맥은 수직으로 개최 약 20-40 ML, 생리 생리 식염수 (PSS)와 perfused, 바늘에 연결된 20 ML 주사기를 사용하고 있습니다. 필요한 경우,이 세척 단계는 여러 번 반복되었다. </li><li> 동일한 절차는 태아 소 혈청 (FBS)의 10 %를 보충 RPMI 1640을 사용하여 반복했다. </li><li> 혈관 중 하나는 말단는 폐쇄되었습니다. 10 ML 주사기는 바늘에 연결되고 collagenase 유형 I (행크의 버퍼 소금 솔루션 (HBSS) 800 단위 / ML) 3 ML과 perfused했다. 그럼 다른 extremityof은 혈관도 폐쇄되었습니다. </li><li> 인산은 37 15 분 ° C 동요와 대한 생리 식염수 (PBS)를 버퍼로 배는 incubated되었습니다. </li><li> 선박의 끝을는 무료 SMCs를 수집하기 위해 상처 나서. 동맥은 5 FBS의 %와 50 ML 튜브에 항생과 보충 DMEM - F12의 약 20-40 ML과 perfuse되었습니다. </li><li> 튜브는 상온 (250g, 8 분)에서 centrifuged되었고, 세포 펠렛은 FBS의 5 %를 보충 DMEM - F12 5 ML에 resuspended되었습니다. </li><li> 세포 현탁액은 T - 플라스크 콜라겐 - 코팅에 전송하고 37 incubated되었습니다 ° C, 5 % CO <sub>2</sub> humidified 분위기에 따라. </li><li> 5 16 H, 비 점착 성의 세포와 세포 drebis이 제거되었습니다 후 37 문화 매체의 5 ML이 추가되었으며 세포 incubated되었습니다 ° C, 5 % CO <sub>2</sub> humidified 분위기에 따라. </li><li> SMCs가 합류에 도착할 때까지 세포 배양 매체는 2 3 일마다 변경되었습니다. </li><li> 세포가 합류를 획득 후 그들은 두 개 또는 세 25cm <sup>2</sup> T - flasks에 씨앗을 품고 있었다. </li></ol><p class="jove_title"> 대청소 </p><ol><li> 샵스 컨테이너에서 바늘 폐기. </li><li> 큰 생물 학적 주사기 용기에 배출. </li><li> 작은 생물 학적 가방에 모든 조직을 넣어. -20에서 가방과 동결을 닫고 ° 소각까지 섭씨. </li><li> 적어도 10 분 virucide의 모든 악기를 만끽해보세요. </li><li> 냉장고에 사용되지 않은 미디어를 반환합니다. </li><li> 생물 학적 폐기물의 장갑 폐기. </li></ol>

<ol>
	<li>Van Rijen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gap+junctions+in+human+umbilical+cord+endothelial+cells+contain+multiple+connexins.">Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins.</a> <em style='font-style: italic'>The American journal of physiology</em>. <b>272</b> (1 PT 1), C117-C117 (1997).</li><li>Mart&#237;n de Llano, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procedure+to+consistently+obtain+endothelial+and+smooth+muscle+cell+cultures+from+umbilical+cord+vessels.">Procedure to consistently obtain endothelial and smooth muscle cell cultures from umbilical cord vessels.</a> <em style='font-style: italic'>Translational Research</em>. <b>149</b> (1), 1-9 (2007).</li><li>Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+human+endothelial+cells+derived+from+umbilical+veins.+Identification+by+morphologic+and+immunologic+criteria.">Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria.</a> <em style='font-style: italic'>J Clin Invest</em>. <b>52</b> (11), 2745-2756 (1973).</li><li>Cairr&#227;o, E., Santos-Silva, A., Alvarez, E., Correia, I., Verde, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+human+umbilical+artery+smooth+muscle+cells+expressing+functional+calcium+channels.">Isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells expressing functional calcium channels.</a> <em style='font-style: italic'>In Vitro Cellular &#38; Developmental Biology-Animal</em>. <b>45</b> (3), 175-184 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> SMC는 분리, 압축시키는 것 약품과 함께 미래를 assays를위한 모델로 사용 구조적, L - 타입 칼슘 채널을 특징 혈관 기능의 세포 및 분자 측면을 연구하고 조직 공학을 사용하실 수 있습니다. SMCs 및 내장 컴퓨터가 인간에 사용되는 세미 합성 혈관의 생산에 사용될 수있는 새로운 biomaterials의 발전을위한 기본입니다. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM-F12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>095K8311</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biochrom-AG</td>
<td>0117T</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>3103806</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>067K2302</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Antibiotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>10 &mu;L/ 1 mL of medium</td>
</tr>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sterilized</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diameter of 0.6-1mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>10 - 20 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Physiological Saline Solution (PSS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>20-40 mL per artery</td>
</tr>
<tr>
<td>Collagenase type I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>047K1052</td>
<td>3 mL per artery</td>
</tr>
<tr>
<td>Hank's Buffered Salt Solution(HBSS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diluted collagenase </td>
</tr>
<tr>
<td>Phosphate buffered saline solution (PBS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Warmed to 37&deg;C</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

isolation of human umbilical arterial smooth muscle cells (huasmc)

<p class="jove_content">인간의 탯줄 (UC)는 쉽게 바로 출산 후 얻을 수있다 생물 학적 샘플입니다. 이것은 생물 학적 샘플, 대부분의 시간이다 삭제하고 컬렉션은 신생아지나 어머니의 건강에 어떠한 추가 위험을 의미하지는 않습니다. 또한 아무런 윤리적 문제가 제기되지 않습니다. UC 한 정맥 내피 세포와 모두있는 (내장 컴퓨터) 2 동맥에 의해 구성되어있다<sup&gt; 1</sup&gt;와 평활근 세포 (SMCs)<sup&gt; 2</sup&gt; 혈관의 주요 세포 구성 요소의 두, 격리 수 있습니다. 이 프로젝트에서는 SMCs는 이에 따라 UC의 동맥의 효소 치료 이전에 자페에 의해 설명하는 실험 절차 후에 얻은되었습니다<em&gt; 외</em<sup&gt; 3</sup&gt;. 세포 분리 후 그들은 DMEM - F12은 태아 소 혈청의 5 %를 보완하고 여러 구절에 대한 교양했던 T - 플래시에 보관했다. 세포는 서로 다른 세대에서 형태학의 다른 phenotypic 특성을 유지. 본 연구의 목적은 압축시키는 것 약물과 함께 미래를 assays를위한 모델로 사용하기 위해서는 부드러운 근육 세포를 분리하는 것이었다, 분리 및 구조적 혈관 기능의 세포 및 분자 측면을 연구, L - 타입 칼슘 채널을 특징<sup&gt; 4</sup&gt; 및 조직 공학을 사용할 수 있습니다.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC at JoVE.com

Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC

<p class="jove_content">탯줄 코드는 여러 가지 방법으로 부드러운 근육 세포를 분리하는 데 사용됩니다. 이 작품에서 우리는 고립 평활근 세포에 효소 처리를 사용합니다.</p>

인간의 탯줄 아티 평활근 세포 절연 (HUASMC)

The human umbilical cord (UC) is a biological sample that can be easily obtained just after birth. This biological sample is, most of the time, discarded ...

isolation-of-human-umbilical-arterial-smooth-muscle-cells-huasmc

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells (HUASMC)

13.8K 조회수.  Universidade da Beira Interior. 탯줄 코드는 여러 가지 방법으로 부드러운 근육 세포를 분리하는 데 사용됩니다. 이 작품에서 우리는 고립 평활근 세포에 효소 처리를 사용합니다.