먼저 채취한 등뿌리 신경절을 채취합니다. 깨끗한 벤치에서 60mm 페트리 접시에 트리밍 미디어를 채웁니다. 해부 스코프와 유리 비드 멸균기를 배치하고 트리밍 도구가 있는 오토클레이브 도구 상자를 스코프 옆에 놓습니다.
절개 내시경을 사용하여 등뿌리 신경절 주변의 과도한 조직을 제거하고 등뿌리 신경절 몸체에 가까운 신경근을 다듬습니다. 이제 두 번째 60mm 페트리 접시에 새 매체를 채웁니다. 절개 스코프를 사용하여 다듬은 등뿌리 신경절을 약 0.5mm로 자릅니다.
절단된 등뿌리 신경절을 얼음 위에 배지가 들어 있는 새로운 24웰 플레이트에 옮깁니다. 그런 다음 사전 혼합된 하이드로겔 65.1 및 52.8 마이크로리터를 각각 소마 및 신경석 구획에 피펫팅합니다. 잘린 등뿌리 신경절을 소마 구획에 조심스럽게 삽입합니다.
섭씨 37도에서 30분 동안 인큐베이터의 하이드로겔을 열적으로 가교합니다. 그런 다음 90초 동안 하이드로겔을 UV 가교합니다. 그 후, 등쪽 뿌리 신경절 성장 배지를 하이드로겔과 등쪽 뿌리 신경절에 추가합니다.
1시간 후에 전체 미디어 교체를 수행하여 미디어에서 반응하지 않거나 남아 있는 광시작제를 제거합니다.