Leaf Pathotype Acquisition and Assessment of Poplar Resistance to Stem Canker Diseases in the Laboratory

먼저 비닐 봉지에 보관된 구내염 백신을 접종한 포플러 잎을 섭취하십시오. 잎에서 플라스틱 보호 필름을 조심스럽게 제거하고 잎 표면에서 균사체 이노큘런트를 부드럽게 제거합니다. 괴사성 반점의 모양과 색상을 검사하여 각 포플러 클론의 잎 병원형을 관찰하고 식별합니다.

그런 다음 검은 배경에 눈금자에 나뭇잎을 놓습니다. 카메라로 나뭇잎의 아래쪽 표면을 촬영하거나 스캐너를 사용하여 스캔하여 인치당 300도트 이상의 해상도로 이미지를 얻습니다. 소프트웨어 ImageJ, 1.54G에서 병든 잎의 이미지를 엽니다.

나뭇잎 이미지에 보이는 자에 따라 ImageJ에서 스케일을 설정합니다. 그런 다음 ImageJ의 지팡이 도구를 사용하여 잎의 병변을 식별하고 각 괴사 지점의 면적을 측정합니다. 모든 괴사 지점을 측정한 후 면적 값을 기록하고 추가 분석을 위해 이 값을 스프레드시트로 내보냅니다.

균사체로 덮인 동료 부위 주변의 병변이 PDA로 덮인 부위 주변의 병변보다 훨씬 큰 경우, 이를 질병 부위로 분류합니다. 균사체로 덮인 피어 부위가 병변 색상, 균사와 같은 구조, pycnidia, 분생포자, 분생포자 등의 변화를 보이면 이를 질병 부위로 정의합니다. 각 포플러 하이브리드 클론에 대한 효과적인 PDA 병변 반점의 평균 면적을 계산합니다.

균사체가 접종된 반점을 발병과 비발병의 두 가지 범주로 나눕니다. 그런 다음 테스트된 포플러 클론 질병 발병률을 계산합니다. 잎에 있는 병든 반점의 평균 면적을 계산합니다.

테스트된 모든 포플러 클론에서 질병이 발생한 반점의 평균 면적을 기반으로 5단계 질병 등급 표준을 설정합니다. 5단계 질병 등급 표준을 사용하여 각 포플러 클론의 질병 지수를 계산합니다. 다음으로, Shapiro-Wilk 테스트를 사용하여 다양한 저항 수준에서 포플러 클론 수의 정규 분포를 확인합니다.

질병 지수에 따라 테스트된 모든 포플러 클론을 5개 또는 7개의 저항성 그룹으로 분류합니다. 매우 높은 저항, 높은 저항, 저항, 저항 없음, 민감성 없음, 민감성, 높은 민감성 및 매우 높은 민감성. 줄기 구내염 병원균을 접종하면 괴사성 병변이 유발되었고, 심지어 포플러 잎에 피크니디아와 같은 구조가 생겼습니다.

더욱이, 잎의 위치와 빛의 상태는 잎의 질병 심각성에 영향을 미칩니다.