1. 동물의 주택과 새 환경 순응 절차 <ol><li> 동식물 사육장에 도착 시간에 3백~3백25g 무게 남성 롱 에번스 쥐는, 물 병 음식을 수용 와이어 그리드 뚜껑과 재활용 종이 펠렛의 침구를 포함하는 표준 플라스틱 새장에 개별적으로 보관되어있다. </li><li> 쥐는 온도 및 습도 제어 동식물 사육장에서 역방향 빛을 어둠 일정 (19시에서 7시까지 불을)에 유지됩니다. </li><li> 음식과 물이 실험을하는 동안 가정의 새장에서 사용할 수있는 광고 libitum입니다. </li><li> 쥐는 수술을하기 전에 일주일 동안 동식물 사육장과 주거 조건에 순응 수 있습니다. 이 기간 동안 쥐가 먹이를, 일상적인 청소를 제외하고 그대로 남아 있으며, 체중의 모니터링. </li></ol> 2. 정맥 Catheterization 외과 <ol><li> isoflurane 가스 마취 및 표준 무균 수술 기법을 사용 쥐가 오른쪽 경정맥 정맥에 카테터 silastic와 준비가되어 있습니다. 두개골의 표면에 수정 정맥 (프라스틱 원) 및 정맥에 카테 테르의 출구는 보석상 &#39;나사 및 치과 시멘트로 두개골에 마운트됩니다. 수술 절차에 대한 자세한 내용은, 8 7 참조하십시오. </li><li> 수술의 끝에, 카테터는 50 %의 헤파린 (1000 IU)와 50 %의 덱스 트로 오스 (25 g/50 ML)를 포함하는 솔루션의 약 0.2 ML로 플러시됩니다. 플라스틱 차단기는 외부 잔해에서 카테터를 보호하고, 카테 테르의 명백을 유지하기 위해 정맥의 개통을 통해 배치됩니다. </li><li> 수술 당시 다시 수술 다음날에 쥐가은 진통 케토프로펜 5 MG / kg, SC를 관리하고 있습니다. </li><li> 쥐는 적어도 7 일 이내에 실험을하기 전에 수술에서 회복하기 위해 사용할 수 있습니다. 이 기간 동안, 쥐는 청소와 먹이 일상의 예외, 그리고 무게 및 일반 건강 일일 모니터링과 홈 새장에 그대로 남아 있습니다. 복구 기간의 마지막 날, 카테터는 카테 테르의 명백을 확인하기 위해 헤파린 / 덱스 트로 오스 솔루션 (섹션 2.2)로 플러시됩니다. </li></ol> 3. 행동 절차 모든 행동 절차 메드 어소 주식 회사 (세인트 알반스, VT)가 제공하는 장비를 사용하여 수행됩니다. 전용 방에 보관되어 장비, 표준 operant 회의소, 사운드 attenuating 인클로저에 포함된 각각의 집합을 포함합니다. 각 operant 챔버는 두 개폐식 레버, 스테인리스 막대 바닥 위에 모두 높은 6.5 cm를 갖추고 있습니다. 하얀 자극 라이트는 한 레버 위에 위치하고 있으며, 그 레버 (소위 &quot;활성&quot;레버) 주입 펌프 (Razel 과학 계측기, 세인트 알반스의 자극 빛과 활성화의 동시 조명의 결과에 반응입니다 VT). 펌프는 단지 operant 챔버 밖에서 선반에 위치한지만, 사운드 attenuating 인클로저 내에 있습니다. 다른 레버 (소위 &quot;비활성&quot;레버)는 모든 실험 절차를 통해 챔버에 확장 남아,이 레버에 대한 응답 결과 않고 있습니다. 마지막으로, 각 챔버는 강철 막대 바닥에 변환기를 통해 일정한 전류, 간헐, 피할 수없는, 전기 footshock를 제공하기 위해 갖추고 있습니다. 모든 실험 조건 (예를 들어, 자극 프레 젠 테이션, 약물 혼합, 충격 전달)뿐만 아니라, 데이터 기록 및 통합은 시험 챔버와 중앙 컴퓨터 운영 메드 어소 소프트웨어 (MED - IV) 사이의 인터페이스를 통해 달성됩니다. 실험은 5 단계로 수행됩니다 : 1) 요법 이니를, 2) 코카인 SA, 3) 의약품 무료 기간, 4) 소멸, 그리고 5) 복직에 대한 테스트. 모든 단계 (마약없는 기간 제외)에서 쥐가은 주거 공간에서 operant 테스트 챔버 매일 세션에 전송됩니다. 동물은 작은 플라스틱 용기에 개별적으로 전송됩니다. 음식과 물이 operant 실에서 사용할 수 없습니다. <ol><li> 요법 이니 <ol><li> 첫 번째 코카인 SA 세션을 (. 섹션 3.2 참조) 앞의 스물넷 시간은, 쥐가는 단일 2 H 세션 동안 operant 방으로 길들 허용하는,이 세션 동안 활성 레버가 철회됩니다. </li></ol></li><li> 코카인 SA 교육 <ol><li> 각각의 일일 훈련 전에 쥐가는 주택 방에 무게입니다. 이후 그들은 operant 방으로으로 전송됩니다. </li><li> operant 실, 봄, 튜브 어셈블리 (약물 주입 펌프의 확장)에 배치되는 즉시이 두개골 장착 정맥에 연결되어 있습니다. </li><li> 쥐가 허용하는 매일 동안 코카인 HCL을 자체 관리 3 - H의 80~10일 총 세션 (중 연속적으로 또는 세션 5와 6 사이를 둘 다 개입 &quot;휴일&quot;로). </li><li> 아침 (9시에서 12시까지)과 오후 (13시부터 16시까지) 사이 대체 SA 세션. 실험 (즉, 멸종과 테스트)의 후속 단계의 절차는 t 모두에서 발생하기 때문에 SA 세션의 타이밍이 가끔 해있다모든 동물들에게 하루 임즈은 (제 3.4 및 3.5 참조), 따라서이 협정 이후의 약물 추구 행동에 대한 하루 중 시간의 혼란함을 주죠 효과를 방지합니다. </li><li> 각 훈련 세션은 동물 활성 레버 철회와 operant 실에 배치되는 동안 5 분 새 환경 순응 기간 앞에 있습니다. </li><li> 트레이닝 세션의 시작 부분에 활성 레버는 챔버로 확장되고 자극 라이트는 (활성 레버 위에있는) 30 켜집니다 S. 또한, 집안의 조명이 시간에 활성화되며, 세션에 걸쳐 조명 남아있다. 함께, 이러한 이벤트는 코카인의 가용성을 신호. </li><li> 세션 동안, 활성 레버의 반응은 강화의 고정 비율 - 1 일정에 코카인의 3 - S 주입 (0.23 mg/65 μL, IV)에 의해 강화됩니다. 주입 펌프 및 약물 전달의 활성화와 동시는 활성 레버 위에 자극 조명의 20의 활성화입니다. 이 20 S 라이트 프리젠 테이션 추가 활성 레버 응답 기록했지만 강화하지하는 동안 &quot;시간 초과&quot;기간에 해당합니다. </li><li> 동물 3 - H 세션 당 50 혼합 최대 사용할 수 있습니다. 우리는 일상적으로 우리의 일을이 기준을 부과하고, 우리의 경험, 그것이 크게면 제거하지, 과다 복용으로 인한 사망 사건을 줄일 것으로 나타났습니다. </li><li> 각 일일 세션이 끝날 때, 쥐가 &#39;카테터는 헤파린 - 덱스 트로 오스 솔루션 0.2-0.3 ML로 플러시 아르 (섹션 2.2 참조)과 쥐들은 홈 케이지에 반환됩니다. </li></ol></li><li> 의약품 - 무료 기간 <ol><li> 칠일 최소 자신의 홈 케이지의 마지막 코카인 SA 세션 후, 쥐가는 (먹이, 일상적인 청소를 제외하고, 그리고 무게의 모니터링) 그대로 남아 있습니다. </li></ol></li><li> 코카인 - 훈련된 행동의 멸종 <ol><li> 쥐는 멸종 훈련 9시에서 10시까지 간의 operant 방으로으로 전송됩니다. </li><li> 봄 튜브 어셈블리는 두개골 장착 정맥에 연결되어 있습니다. </li><li> SA 교육에 대한 조건과 일치, 멸종 교육의 매일은 동물 활성 레버 철회와 operant 실에 배치되는 동안 5 분 새 환경 순응 기간 앞에 있습니다. </li><li> 쥐 그런 다음 30 분 간격으로 구분하여, 넷 60 분 멸종 세션을 제공하고 있습니다. 각 60 분 세션은 교육 세션의 시작 (즉, 주택 조명 조명, 활성 레버의 확장, 그리고 활성 레버 위에 자극 빛을 30 초 조명)에서 발생하는 동일한 사건에 의해 시작됩니다. 세션 전반에 걸쳐, SA 교육 중에있었습니다 모든 조건이 해당 활성 레버 반응을 제외하고 (즉, 20 초 및 주입 펌프 3 - S 활성화를위한 자극 빛을 반응 우발 조명) 유지 코카인 혼합과 함께 더 이상 강화 아르 . 각 60 분 멸종 세션을 별도로 30 분 간격 동안, 활성 레버가 철회되고 집안 라이트는 소멸됩니다. </li><li> 마지막 60 분 세션이 끝날 때, 쥐가 자신의 홈 케이지에 반환됩니다. </li><li> 단계 3.4.1. 3.4.5 있습니다. 연속 3 일 동안 반복하고 있습니다. </li></ol></li><li> footshock 스트레스 코카인 훈련된 행동의 복귀 <ol><li> 쥐는 9시부터 10시까지 사이 operant 방으로 전송 </li><li> operant 실에 배치되는시, 봄 및 튜브 어셈블리는 두개골 장착 정맥에 연결되어 있습니다. </li><li> 교육 및 멸종에 대한 조건과 일치, 5 분 새 환경 순응 기간 쥐가 활성 레버와 operant 실에 배치되는 동안 철회 제공됩니다. </li><li> 쥐는 다음 멸종 단계 중에주는 사람에게 동일하게 30 분 간격으로 구분이 60 분 멸종 세션 (3.4.4을 참조하십시오.) 부여됩니다. </li><li> 두 번째로 60 분 수업 후 이전에 활성 레버에 대한 반응의 총 개수가 15보다 적으면, 동물은 추가로 30 분 간격 후 복직에 대한 검사를받습니다. 이 30 분 간격에서 footshock 또는 가짜 footshock (예, 아니 footshock)은 (3.5.6을 참조하십시오.) 관리합니다. 활성 레버를 15 이하 반응의 기준은 두 번째 세션 후 달성되지 않을 경우, 추가적인 멸종 세션 (들)은 복직을 위해 테스트 이전에 주어집니다. </li><li> 두 번째로 60 분 멸종 세션 (15 이하 반응의 멸종 기준을 수립하는 데 필요한 추가 60 분 멸종 세션 (S) 이후) 이후 10 분, 동물은 간헐적인 전기 footshock 응력의 20 분 (또는 사기에 노출되는 operant 챔버에 footshock). Footshock는 활성 레버가 철회되고 주택과 자극 광이 소멸하는 시간 동안 제공됩니다. Footshock 40 S (10-70의 범위)의 의미 간격으로 가변 시간 일정에 따라 배달됩니다. 각각의 충격은 0.9 mA의 강도에 전달하고, 기간이 0.5 S입니다. footshock 이러한 매개 변수는 광범위한 파일럿 작업을 기반으로footshock 노출의 최소 강도와 기간으로 추구하는 코카인의 안정적인 복귀를 확립하기 위해 우리가 실험실에서 실시. 이러한 매개 변수에서, 동물은 0.5의 충격을 재귀 점프 응답을 전시하고, 때때로 간단한 발성을 방출. 동물이 충격 기간에 걸쳐 관찰 있지만, 충격의 강도는 고통보다 발음이 흔적을 유발하기에 충분한 크기의 것이 아니다. </li><li> 즉시 멸종 조건 (즉, 아래 footshock 세션의 다음과 같은 종료가, 활성 레버가 확장되고 쥐가 레버를 누르 수 있으며, 답변은 코카인과 철근 아니지만, 주입 펌프의 자극 조명 및 활성화의 조명으로 인해 계속 할 ). 시간이 기간은 복직을위한 시험으로 정의하고 기간이 일반적으로 1~3시간입니다. 대부분의 응답은 테스트 세션의 초기 부분 (최초 30 분 - 1 H)에서 발생하고, 이후 추가 연장 시험 기간 동안 소멸. 따라서, 1 H 테스트 긴 테스트 기간이 효과를보다 완벽하게 멸종 프로필을 제공하여, 복직 효과를 포착하기 위해 충분하다. </li><li> 반복 측정 설계를 고용하면 각 쥐의는 footshock와 가짜 footshock 조건에서 테스트됩니다. 단계 3.5.1. 로 3.5.8는 후속 시험 당일 반복하고, 복직 (footshock 또는 가짜 footshock)에 대한 대체 시험은 실시됩니다. </li></ol></li></ol> 4. 대표 결과 : <img src="/files/ftp_upload/2265/2265fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 자기 관리 훈련, 멸종, 그리고 복귀 테스트 기간 동안 활성 및 비활성 레버스에서 활동화한 응답 프로필. 그림 1은 여기 설명된 실험 프로토콜의 다양한 단계에서 얻은 이들의 전형화한 operant 응답 프로파일을 제공합니다. 1. 액티브 레버 응답 <ol><li> 코카인 SA 교육. 그림 1 (왼쪽 패널)는 혼합 및 활성 레버 프레스의 총 수를 두 숫자를 포함하는 전형적인 마약 SA 교육 곡선을 보여줍니다. 쥐 일반적으로 동작이 설정되면 후속 세션을 통해 약물 섭취의 안정적인 속도를 (일반적으로 20 % 미만 사이의 세션 분산) 유지, 1-3 세션 내에서 코카인 SA를 취득합니다. </li><li> 코카인 - 훈련된 행동의 멸종. 그것은 멸종 1 일에, 응답은 처음이 아닌 철근 때, 활성 레버에 대한 응답의 총 수가 처음보다 높은 것을 (중간 패널) 그림 1에서 볼 수있다 훈련 단계 (소위 &quot;멸종 버스트&quot;에 해당)의 끝, 점차, 네 개의 세션을 통해 멸종, 감소 응답. 일 2 멸종의 3 (전날의 마지막 세션 동안 관찰되는 상대) 응답의 일부 복구 관찰 수 있지만, 응답은 일반적으로 일반적으로 멸종의 전날의 시작보다 적게, 그리고 멸종 그날 네 개의 세션을보다 빠르게 진행됩니다. </li><li> 코카인의 복귀가 추구. 그것은 간헐 footshock에 노출 20 분 이외의 철근 앞의 멸종 세션의 끝에 관찰되는 상대, 활성 레버에 대한 응답의 증가를 유도되는 그림 1 (오른쪽 패널)에서 볼 수 있습니다. Footshock은 또한 가짜 footshock가 시행되는 상황에서 관찰되는에 상대적으로 응답 증가를 유도. 따라서 footshock 스트레스에 의해 추구하는 코카인의 복귀가로 중 표현할 수 : 1) 멸종 세션에서 응답에 상대적 footshock에 노출 후 비 철근 반응의 증가 수, footshock 또는 이외의 강화 2) 증가하기 전에 번호 위장 footshock에 footshock 상대 후 반응. </li></ol> 2. 비활성 레버 응답 그것은 모두 실험 단계에 걸쳐, 비활성 레버와 관련된 매우 낮은 응답 수준이 있으며, 그림 1 (레드 라인)에서 볼 수 있습니다. 그러나,이 레버에 대한 응답에 겸손한 증가는 때로 footshock 스트레스 다음 노출을 관찰합니다. 에도 응답 이러한 증가가 발생하는 경우에, 응답 활성 레버의 증가는 비례 훨씬 커야하는 경향이있다.

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동물 실험 동물 관리 및 토론토 동물 관리위원회 대학의 캐나다 협의회가 정한 지침과 규정에 따라 수행되었다. 이 비디오의 제작이 문서에서 사용되는 악기를 생산 메디컬 어소 주식 회사에 의해 후원되었다.

지난 몇 십년 동안, SA의 복직 절차의 3 개의 유사 콘텐츠는 실험실 쥐와 원숭이를 추구하는 약물의 복직을 연구하기 위해 개발되었습니다. 절차적 유사 정의 차이는 주로 약물 SA, 멸종, 그리고 테스트 세션 1 당일 내에서 또는 다른 요일에 발생 여부를 관계. 우리가이 종이에 설명되어있는 절차는 일반적으로 멸종 및 테스트 세션에서 별도의 &quot;내 사이&quot;세션 변화, 약물 SA 매일 세션 동안 발생하기 때문에 (사이 세션 방식으로 즉,)로 불리는, 근데 멸종 그리고 테스트 당일 (즉, 시간 - 세션 방식으로) [예, 7, 9]에서 발생합니다. 또는 &quot;세션 사이&quot;이른바 절차, 실험의 모든 단계가 순차적으로 발생 SA, 멸종, 그리고 시험 세션 (즉, 모든 단계는 세션 사이) 다른 일에 부여되는 등 [예, 8, 10, 11]. 대조적으로, &quot;세션 내에서&quot;전체 절차에, SA 교육, 멸종, 그리고 테스트 세션은 모두 같은 일 이내에 [예 12]가 발생합니다. 복직 절차의 다른 유사 콘텐츠를 사용하고자하는 약물의 footshock 유도된 복귀의 보고서를이 출판하고 있지만, 우리는 멸종하고 테스트가 동일한에서 발생 때이 스트레스가 (적어도 코카인 SA의 역사를 가진 동물)을 가장 효과적으로 발견 일 (즉, &quot;시간 사이에&quot;세션 방식으로). 또한, 우리는 &quot;세션 사이에&quot;완전히를 사용하여 프로 시저를 추구하는 코카인의 신뢰성 footshock 유도된 복귀를 얻는 성공을했지만, 경우에만 동물 멸종하고 테스트하는 동안 실험 8 또는 적어도 전역 SA 실에서 보관되어있는 조건 하에서 13. 이 사이에 세션 접근, 현재 프로토콜에서 설명한 이상의 단점은, 그것이 훈련하고 한 번에 테스트할 수 과목의 수를 제한하고, 따라서, 데이터 수집의 효율성을 감소한다는 것입니다. 현재 프로토콜의 조건에서 동물의 한 그룹이 영원히 사라지지 수 있으며 주어진 시간에 테스트이지만, 더 큰 처리량은 한 주 단위로 쥐 두 그룹에 대한 SA 교육 단계의 시작 시간을 압도하여 얻을 수 있습니다. 두 번째 그룹 SA 훈련의 주 2 입력으로이 시나리오에서는 쥐의 첫 번째 그룹이 약물없는 단계를 입력할 수 있으며, 두 번째 그룹은 마약을하는 동안 이후, 멸종 및 시험은 첫 번째 그룹에서 실행 될 수 있습니다 무료 위상. 이러한 접근 방식은 자원의보다 효율적인 이용을 허용하는 매우 효과적인 그리고 신뢰할 수있는 footshock 유발 복직에 이르는 동안 데이터 수집의 속도를 가속. 중요한 것은, 우리 프로 시저에, 복직에 대해 이전에 약물 철근 행동과 테스트의 멸종은 마약 관련 단서의 존재에 발생합니다. 우리가 약물 관련 단서의 부재에서 멸종 훈련이나 테스트를 실시 적이 있지만, 그것은 (테스트 진화 단서의 부재에서 발생했을 때 스트레스가 사실에 복직을 유도에서 효과가있을 수 있습니다, 개인 통신을 기반으로, 우리의 이해는 적어도 코카인 SA의 역사를 가진 동물의 경우). 이 변수의 체계적 조사하고, 그것이 포즈 이론적 의미는 미래의 연구에 중요한 질문이다. 최종 절차적 요소가되는 보증의 댓글 복귀에 footshock 스트레스의 효과가 문맥의 조작에 매우 민감한 것으로 보인다는 점이다. 예를 들어, footshock의 스트레스가 마약 SA와 멸종이 발생하는 환경에서 시행하는 경우에는 추구하는 약물의 복직을 유도에서만 효과가있다, 즉, footshock이 소설의 맥락 속에서 스트레스에 노출이 발생하면 원하는 약물을 복원하지 않습니다, 복직 14 일 미치는 영향에 스트레스 및 약물 환경 사이의 중요한 상호 작용을 제안. 결론 footshock의 복직 절차에서이 논문에서 설명하는 것과 같은, 스트레스 및 약물 재발 사이의 관계를 지배하는 기본적인 행동 및 신경 생물학 메커니즘을 명료하게하다에 상당한 성공을 함께 사용되었습니다. 사실,이 절차는 약리 pretreatments 또는 특정의 연결 기판을 대상으로 neurochemical 조작을 수용할 수 있도록 수정하면 스트레스에 의해 추구 약물로 복직의 신경 생물학을 특성화를위한 강력한 도구로 검색할 수 있습니다.

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		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package</td>
<td>&nbsp;</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>MED-008-CT-B1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Deep extra tall MDF sound attenuating cubicle</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-018MD</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Standard modular test chamber with drug infusion top and waste pan</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-008CT</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stainless steel grid floor</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-005</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>House light, hooded, 28V</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-215M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stimulus light 1&#x201D; white lens</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-221M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Low profile retractable response lever</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-112CM</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SmartCtrl 8 Input/16 output package</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>DIG-716P2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Single speed syringe pump, 3.33 RPM</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>PHM-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rat self infusion package</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>PHM-119B-23-D</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Drug Delivery, Arm assembly </td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>PHM-110-SAI</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Square wave aversive stimulator</td>
<td>Footshock Stress Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-414S</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Patented quick disconnect harness for stainless steel grid floor</td>
<td>Footshock Stress Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-005-QD</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Shock output cable</td>
<td>Footshock Stress Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>SG-219G-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MED-PC IV Software</td>
<td>Software</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>SOF-735</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

a procedure for studying the footshock-induced reinstatement of cocaine seeking in laboratory rats

약물 중독의 가장 교활한 측면은 재발에 대한 높은 성향이다. 복직 절차로 알려진 재발의 동물 모델은, 약물 사용에 재발의 신경 생물학과 현상론을 연구하기 위해 널리 사용되었습니다. 절차적 변화는 지난 몇 년간 부상하고 있지만, 가장 일반 복직 절차는 약물 자기 관리 (SA) 모델을 기반으로합니다. 이 모델에서는 동물이 약물을 얻기 위해 operant 응답을 수행하는 훈련입니다. 이후, 문제는 원천 반응을 파견 보강에 의해 소멸됩니다. 약물 추구의 복귀는 다음과 같은 훈련 약물, 약물 - 관련 단서를 다시 노출, 또는 스트레스 1 노출의 주입으로 개별 이벤트에 의해 트리거됩니다. 복직 절차는 원래 쥐와 원숭이 1, 2에서 추구하는 약물을 복원하기 위해 훈련 약물로 급성 비 파견 노출의 능력을 연구하기 위해 개발되었습니다. 복직 절차부터 1, 3, 4를 찾는 약물로 재발에 마약 관련 단서 및 스트레스의 여러 형태에 노출을 포함하여 환경 자극의 역할을 연구하기 위해 수정되었습니다. 지난 15 년 동안 복직 문학의 주요 초점은 약물 재발 스트레스의 역할을하고 있습니다. 이 관계를 공부에 대한 스트레스가 가장 일반적으로 사용되는 형태 중 하나는 약한, 간헐, 전기 footshocks에 급성 노출합니다. 추구하는 약물의 복귀를 유도하기 위해 footshock 스트레스의 기능은 원래 정맥 주사 마약 SA 5 역사를 가진 쥐의 Shaham 및 동료 (1995)에 의해 입증되었다. 이후, 효과는 정맥 코카인, 암페타민과 니코틴 SA뿐만 아니라 구술 에탄올 SA 3, 6 역사와 함께 쥐에 일반했다. 약물 추구의 footshock 유도된 복귀가 안정적으로 견고하게 얻을 수 있지만, 그것은 특정 parametrical 변수에 민감한 경향이 효과가있다. 이들은 멸종하고 복귀 테스트 세션의 배열, footshock 스트레스의 강도와 기간, 그리고 멸종과 복직에 대한 테스트 기간 동안 마약 관련 단서의 존재를 포함합니다. 여기서 우리는 스트레스와 추구하는 코카인 사이의 관계를 연구하기 위해 일관성있는 성공과 함께 사용할 것을 추구하는 코카인의 footshock 유발 복직을위한 프로토콜을 제시한다.

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A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

복직 절차로 알려진 재발의 동물 모델은, 약물 추구하는 재발 스트레스의 역할을 연구하기 위해 널리 사용되었습니다. 여기, 우리는 온화, 간헐적인 전기 footshock에 급성 노출을 통해 실험실 쥐에서 찾는 코카인의 복직을 유도하는 방법에 대한 리포트입니다.

실험실 쥐의 추구 코카인 Footshock 유발 복직을 유학을위한 절차

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

a-procedure-for-studying-footshock-induced-reinstatement-cocaine

Research

JoVE Journal

Neuroscience

20.8K 조회수.  University of Toronto Scarborough. 복직 절차로 알려진 재발의 동물 모델은, 약물 추구하는 재발 스트레스의 역할을 연구하기 위해 널리 사용되었습니다. 여기, 우리는 온화, 간헐적인 전기 footshock에 급성 노출을 통해 실험실 쥐에서 찾는 코카인의 복직을 유도하는 방법에 대한 리포트입니다.

비디오: A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended upon this work to develop a simple quantitative measure of forepaw dexterity that is sensitive to lateralized impairments and age-dependent changes. Rodents learn skillful forepaw and digit movements to manage thin pasta pieces, which they eagerly consume. We have previously described methods for quantifying vermicelli handling in rats and showed that the measures are very sensitive to forelimb impairments resulting from unilateral ischemic lesions, middle cerebral artery occlusions and unilateral striatal dopamine depletion [Allred, R.P., Adkins, D.L., Woodlee, M.T., Husbands, L.C., Maldonado M.A., Kane, J.R., Schallert, T. &amp; Jones, T.A. The Vermicelli Handling Test: a simple quantitative measure of dexterous forepaw function in rats. J. Neurosci. Methods 170, 229-244 (2008)]. Here we present a more detailed protocol for this test in rats and compare it with a newly developed version for mice, the Capellini Handling Test. Rats and mice are videotaped while handling short lengths of uncooked vermicelli or capellini pasta, respectively, with a camera positioned to optimize the view of paw movements. Slow motion video playback allows for the identification of forepaw adjustments, defined as any distinct removal and replacement of the paw, or of any number of digits, on the pasta piece after eating commences. Forepaw adjustments per piece are averaged over trials per each testing session. Repeated testing permits sensitive quantitative analysis of changes in forepaw dexterity over time. Protocols for pre-testing habituation and handling practice, as well as procedures for characterizing atypical handling patterns, are described. Because rats and mice perform the pasta handling tests slightly differently, species-specific differences in administration and scoring of these tests are highlighted. All animal use was in accordance with protocols approved by the University of Texas at Austin Animal Care and Use Committee.

The Vermicelli and Capellini Handling Tests of forepaw dexterity take advantage of the natural inclination of rodents to manipulate food items using skillful forepaw and digit movements. Animals are videotaped while handling short strands of uncooked dry pasta. Slow motion video playback allows for the quantification of forepaw adjustments.

베르 미 첼리와 Capellini 처리 시험 : 쥐 및 생쥐의 손재주가 앞발 기능의 단순 양적 측정

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

연구

신경과학

Operant Sensation Seeking in the Mouse

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior. These 'self-administration' methods have been used extensively in drug addiction research due to their high construct validity. Operant studies provide researchers a tool for preclinical investigation of several aspects of the addiction process. For example, mechanisms of acute reinforcement (both drug and non-drug) can be tested using pharmacological or genetic tools to determine the ability of a molecular target to influence self-administration behavior1-6. Additionally, drug or food seeking behaviors can be studied in the absence of the primary reinforcer, and the ability of pharmacological compounds to disrupt this process is a preclinical model for discovery of molecular targets and compounds that may be useful for the treatment of addiction3,7-9. One problem with performing intravenous drug self-administration studies in the mouse is the technical difficulty of maintaining catheter patency. Attrition rates in these experiments are high and can reach 40% or higher10-15. Another general problem with drug self-administration is discerning which pharmacologically-induced effects of the reinforcer produce specific behaviors. For example, measurement of the reinforcing and neurological effects of psychostimulants can be confounded by their psychomotor effects. Operant methods using food reinforcement can avoid these pitfalls, although their utility in studying drug addiction is limited by the fact that some manipulations that alter drug self-administration have a minimal impact on food self-administration. For example, mesolimbic dopamine lesion or knockout of the D1 dopamine receptor reduce cocaine self-administration without having a significant impact on food self-administration 12,16. 
Sensory stimuli have been described for their ability to support operant responding as primary reinforcers (i.e. not conditioned reinforcers)17-22. Auditory and visual stimuli are self-administered by several species18,21,23, although surprisingly little is known about the neural mechanisms underlying this reinforcement. The operant sensation seeking (OSS) model is a robust model for obtaining sensory self-administration in the mouse, allowing the study of neural mechanisms important in sensory reinforcement24. An additional advantage of OSS is the ability to screen mutant mice for differences in operant behavior that may be relevant to addiction. We have reported that dopamine D1 receptor knockout mice, previously shown to be deficient in psychostimulant self-administration, also fail to acquire OSS24. This is a unique finding in that these mice are capable of learning an operant task when food is used as a reinforcer. While operant studies using food reinforcement can be useful in the study of general motivated behavior and the mechanisms underlying food reinforcement, as mentioned above, these studies are limited in their application to studying molecular mechanisms of drug addiction. Thus, there may be similar neural substrates mediating sensory and psychostimulant reinforcement that are distinct from food reinforcement, which would make OSS a particularly attractive model for the study of drug addiction processes. The degree of overlap between other molecular targets of OSS and drug reinforcers is unclear, but is a topic that we are currently pursuing. While some aspects of addiction such as resistance to extinction may be observed with OSS, we have found that escalation 25 is not observed in this model24. Interestingly, escalation of intake and some other aspects of addiction are observed with self-administration of sucrose26. Thus, when non-drug operant procedures are desired to study addiction-related processes, food or sensory reinforcers can be chosen to best fit the particular question being asked. 
In conclusion, both food self-administration and OSS in the mouse have the advantage of not requiring an intravenous catheter, which allows a higher throughput means to study the effects of pharmacological or genetic manipulation of neural targets involved in motivation. While operant testing using food as a reinforcer is particularly useful in the study of the regulation of food intake, OSS is particularly apt for studying reinforcement mechanisms of sensory stimuli and may have broad applicability to novelty seeking and addiction.

In this protocol we describe a method of operant learning using sensory stimuli as a reinforcer in the mouse. It requires no prior training or food restriction, and it allows the study of motivated behavior without the use of a pharmacological or natural reinforcer such as food.

마우스의 추구 Operant 감각

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior.  These 'self-administration' methods have been used extensively in drug ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

쥐에서 자당의 갈망의 보육을 평가하기위한 일반적인 방법

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity to normally innocuous stimuli1. Hyperalgesia and allodynia have been studied in many different rodent models of diabetes mellitus2. However, as stated by B&ouml;lcskei et al, determination of "pain" in animal models is challenging due to its subjective nature3. Moreover, the traditional methods used to determine behavioral responses to noxious thermal stimuli usually lack reproducibility and pharmacological sensitivity3. For instance, by using the hot-plate method of Ankier4, flinch, withdrawal and/or licking of either hind- and/or fore-paws is quantified as reflex latencies at constant high thermal stimuli (52-55 &deg;C). However, animals that are hyperalgesic to thermal stimulus do not reproducibly show differences in reflex latencies using those supra-threshold temperatures3,5. As the recently described method of B&ouml;lcskei et al.6, the procedures described here allows for the rapid, sensitive and reproducible determination of thermal nociceptive thresholds (TNTs) in mice and rats. The method uses slowly increasing thermal stimulus applied mostly to the skin of mouse/rat plantar surface. The method is particularly sensitive to study anti-nociception during hyperalgesic states such as PDN. The procedures described bellow are based on the ones published in detail by Alm&aacute;si et al 5 and B&ouml;lcskei et al 3. The procedures described here have been approved the Laboratory Animal Care and Use Committee (LACUC), Wright State University.

Here, we describe a rapid reliable and simple procedure to determine the lowest temperature at which rats or mice show nocifensive behavior, i.e. the thermal nociceptive threshold (TNT). This method applies a slowly increasing thermal stimulus allowing precise and reproducible estimation of TNTs with minimum, if any, stress to the animals.

당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity ...

Methods for Studying the Mechanisms of Action of Antipsychotic Drugs in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans is a simple genetic organism amenable to large-scale forward and reverse genetic screens and chemical genetic screens. The C. elegans genome includes potential antipsychotic drug (APD) targets conserved in humans, including genes encoding proteins required for neurotransmitter synthesis and for synaptic structure and function. APD exposure produces developmental delay and/or lethality in nematodes in a concentration-dependent manner. These phenotypes are caused, in part, by APD-induced inhibition of pharyngeal pumping1,2. Thus, the developmental phenotype has a neuromuscular basis, making it useful for pharmacogenetic studies of neuroleptics. Here we demonstrate detailed procedures for testing APD effects on nematode development and pharyngeal pumping. For the developmental assay, synchronized embryos are placed on nematode growth medium (NGM) plates containing APDs, and the stages of developing animals are then scored daily. For the pharyngeal pumping rate assay, staged young adult animals are tested on NGM plates containing APDs. The number of pharyngeal pumps per unit time is recorded, and the pumping rate is calculated. These assays can be used for studying many other types of small molecules or even large molecules.

Methods for Studying the Mechanisms of Action of Antipsychotic Drugs in Caenorhabditis elegans

Approaches for testing the effects of antipsychotic drugs (APDs) in Caenorhabditis elegans are demonstrated. Assays are described for testing drug effects on development and viability and on pharyngeal pumping rate. These methods are also applicable for pharmacogenetic experiments with drug classes other than APDs.

에서 항 정신병 약물의 작용 메커니즘을 공부하는 방법<em&gt; 예쁜 꼬마 선충</em

Caenorhabditis elegans is a simple genetic organism amenable to  large-scale forward and reverse genetic screens and chemical genetic screens. The C.  ...

A Procedure for Implanting Organized Arrays of Microwires for Single-unit Recordings in Awake, Behaving Animals

In vivo electrophysiological recordings in the awake, behaving animal provide a powerful method for understanding neural signaling at the single-cell level. The technique allows experimenters to examine temporally and regionally specific firing patterns in order to correlate recorded action potentials with ongoing behavior. Moreover, single-unit recordings can be combined with a plethora of other techniques in order to produce comprehensive explanations of neural function. In this article, we describe the anesthesia and preparation for microwire implantation. Subsequently, we enumerate the necessary equipment and surgical steps to accurately insert a microwire array into a target structure. Lastly, we briefly describe the equipment used to record from each individual electrode in the array. The fixed microwire arrays described are well-suited for chronic implantation and allow for longitudinal recordings of neural data in almost any behavioral preparation. We discuss tracing electrode tracks to triangulate microwire positions as well as ways to combine microwire implantation with immunohistochemical techniques in order to increase the anatomical specificity of recorded results.

Implanting organized arrays of microwires for use in single-unit electrophysiological recordings presents a number of technical challenges.&#160;Methods for performing this technique and the equipment necessary are described.&#160;Also, the beneficial use of organized microwire arrays to record from distinct neural subregions with high spatial selectivity is discussed.

동물 행동하자, 깨어있는 단일 단위 레코딩을위한 Microwires의 조직 된 배열을 주입하기위한 절차

In vivo electrophysiological recordings in the awake, behaving animal provide a powerful method for understanding neural signaling at the single-cell ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional afferent fibers monitor other characteristics of the muscle environment, including metabolite buildup, temperature, and nociceptive stimuli. Overall, abnormal activation of sensory neurons can lead to movement disorders or chronic pain syndromes. We describe the isolation of the extensor digitorum longus (EDL) muscle and nerve for in vitro study of stretch-evoked afferent responses in the adult mouse. Sensory activity is recorded from the nerve with a suction electrode and individual afferents can be analyzed using spike sorting software. In vitro preparations allow for well controlled studies on sensory afferents without the potential confounds of anesthesia or altered muscle perfusion. Here we describe a protocol to identify and test the response of muscle spindle afferents to stretch. Importantly, this preparation also supports the study of other subtypes of muscle afferents, response properties following drug application and the incorporation of powerful genetic approaches and disease models in mice.

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Muscle sensory neurons are involved in proprioceptor signaling and also report on metabolic state and injury related events. We describe an adult mouse in vitro muscle-nerve preparation for studies on stretch-activated muscle afferents.

<em&gt; 체외</em근육의 구 심성의 소성 특성을 연구&gt; 성인 마우스 근육 - 신경 준비

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This complex behavior is influenced by genetic, hormonal and environmental factors. As in many organisms, previous fighting experience influences the fighting strategy of flies and the outcome of later contests: losing a fight increases the probability of losing later contests, revealing &#34;loser&#34; effects that likely involve learning and memory 2-4. The learning and memory that accompanies expression of complex social behaviors like aggression, is sensitive to pre-test handling of animals 5,6. Many experimental procedures are used in different laboratories to study aggression 7-9, however, no routinely used protocol that excludes handling of flies is currently available. Here, we report a new behavioral apparatus that eliminates handling of flies, using instead their innate negative geotactic responses to move animals into or out of fighting chambers. In this protocol, small circular fight arenas containing a food cup are divided into two equal halves by a removable plastic slider prior to introduction of flies. Flies enter chambers from their home isolation vials via sliding chamber doors and geotaxis. Upon removal of plastic sliders, flies are free to interact. After specified time periods, flies are separated again by sliders for subsequent experimentation. All of this is done easily without handling of individual flies. This apparatus offers a novel approach to study aggression and the associated learning and memory, including the formation of &#34;loser&#34; effects in fly fights. In addition, this new general-purpose behavioral apparatus can be employed to study other social behaviors of flies and should, in general, be of interest for investigating experience-related changes in fundamental behavioral processes.

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

During fruit fly fights, the behavioral patterns observed, fight dynamics, and associated learning and memory are influenced by experimental conditions. The protocol presented here describes a novel procedure that entirely eliminates handling of flies during experiments. This improves fight dynamics and allows formation of strong &#34;loser&#34; effects.

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 &quot;낙오자&quot;효과<em&gt; 초파리</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법<em&gt; 노랑 초파리</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue reactivity, the sensitivity to cues previously linked with the drug-taking experience, plays a prominent role in human craving during abstinence. Cue reactivity can be assessed as the attentional orientation toward drug-associated cues that is measurable as appetitive approach behavior in both preclinical and human studies. Herein describes an assessment of cue reactivity in rats trained to self-administer cocaine. Cocaine self-administration is paired with the presentation of discrete cues that act as conditioned reinforcers (i.e., house light, stimulus light, infusion pump sounds). Following a period of abstinence, lever presses in the cocaine self-administration context accompanied by the discrete cues previously paired with cocaine infusion are measured as cue reactivity. This model is useful to explore neurobiological mechanisms underlying cue reactivity processes as well as to assess pharmacotherapies to suppress cue reactivity and therefore, modify relapse vulnerability. Advantages of the model include its translational relevance, and its face and predictive validities.&#160;The primary limitation of the model is that the cue reactivity task can only be performed infrequently and must only be used in short duration (e.g., 1 hour), otherwise rats will begin to extinguish the pairing of the discrete cues with the cocaine stimulus. The model is extendable to any positively reinforcing stimulus paired with discrete cues; though particularly applicable to drugs of abuse, this model may hold future applications in fields such as obesity, where palatable food rewards can act as positively reinforcing stimuli.

Cue reactivity is conceptualized as sensitivity to cues linked with drug-taking experiences that contribute to craving and relapse in abstinent humans. Cue reactivity is modeled in rats by measuring attentional orientation toward drug-associated cues that results in appetitive approach behavior in a cue reactivity test following self-administration and forced abstinence.

코카인 사용 장애의 쥐 모델에서 큐 반응성을 측정 하기 위한 프로토콜

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

실험실 쥐의 추구 코카인 Footshock 유발 복직을 유학을위한 절차

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사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법

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