(; BH 스미스 공동 PI J Trumble PI)와 애리조나 주립 대학이 연구는 NIH NCRR (BHS에 R01 RR014166), NIH NIDCD (R01 DC011422 BHS 공동 PI), 미국 농무부 (USDA)에서 자금을 지원했다. 학생 (그림 4의 데이터)를 훈련 워크숍 자금은 칠레의 과학 재단에 의해 제공되었다.

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The authors have no conflicts of interest to disclose.

이 프로토콜은 PER의 절차를 사용하여 조절을 위해이 신뢰할 수있는 방법을 제시했다. 다음은 성공적으로 27, 21을 사용되어왔다 여러 가지 방법이 있습니다. 우리는 지속적으로 신뢰성으로도 다른 실험자에 걸쳐, PER를 사용하는 모든 실험 연구에 대한 방법이 사용한다. 동일한 기본 절차는 다른 조절 자극과 다른 행동 반사의 사용을 포함하여 꿀벌과 연구의 많은 다른 종류에 적응하고있다. 또한 28, 29, 13,14,30 뇌에서 후각 인식과 기억의 생리 학적 상관 관계를 학습 차이의 유전 적 기초의 조사에 연결하고 한 행동 15,16,31의 조절 성 및 분자 유전 학적 기초 . 때문에 100 년 전 칼 폰 프리쉬에 의해 처음 연구를 시작 꿀벌에 후각 학습의 생태 학적 관련성의 고급 지식의 <sup&gt; 31, PER 결과 쉽게 콜로니의 생존 요구에 연결될 수있다. 가장 최근에, 그것은 농약과 환경 독소 (17)의 치사 행동 미치는 영향을 조사하기 위해 농업 연구에 적용되고있다. 기본 절차는 또한 다른 종류의 문제를 조사하기 위해 적용 할 수 있다는 점에서 강력하다. 두 나방 종, 만두 카의 sexta 및 스포 도프 테라 리토 랄은 냄새 식별 및 각 종의 후각 학습 기능 (32, 33)의 신경 기초를 조사하기 위해 PER 연구에 사용되어왔다. 초파리와 PER 실험은 chemosensation과 34 학습과 관련된 분자 신호 폭포에 많은 통찰력을 제공하고 있습니다. 그리고 PER은 최근 벼룩 (Rhodnius의 prolixus)의 습관화 35 중요한 질병 벡터를 연구하는 데 사용되었습니다. 일반적으로, 절차는 방법의 변화에​​ 강하다; (D)의 사용ifferent 방법은 처리 군 간의 차이를 동일 상대적인 가능성을 생성한다. 비교적 간단한 절차에도 불구하고, 몇 가지 문제는 시간은 냄새 자당 협회 학습에서 꿀벌을 방지 할 수 있습니다에서. 다음 항목에서는 프로토콜과 PER 조절하는 동안 발생할 수있는 일반적인 문제들을 가능한 변화입니다. 컨디셔닝 프로토콜의 수에 대한 고려 사항 및 시험의 종류 어떤 학습 프로토콜 취득 단계에서 시험 번호 꿀벌의 노출을 필요로 할 것이다. 이 숫자는 크게 작업의 난이도에 따라 달라집니다. 꿀벌 한 번의 시험 후 간단한 작업을 알 수 있지만, 장기 기억 형성을 유도하는 적어도 세 개의 실험이 필요하다. 예상대로, 꿀벌은 적절하게 어려운 작업을 배우고 훨씬 더 많은 실험이 필요합니다. 일반적으로 꿀벌이 더 이상 크게 개선하지 않는 이상 시험의 최대 수는있다적외선 성능을 제공합니다. 이 최대 값은 특정 태스크, 악취 유형 및 농도, 및 수크로오스 농도에 의존한다. 다른 냄새와 시험의 하나 이상의 유형을 사용하는 경우, 악취 프레젠테이션 간단한 시퀀스를 기억하는 대신 취기 (36) 사이의 차이를 학습에서 꿀벌 유지 의사 랜덤 시퀀스에 다른 시험 유형을 제시한다. 이러한 의사 랜덤 시퀀스에서, 악취 유형 각각에 대한 시험이 동일한 수 있어야한다. 또한, 한 종류의 냄새 시험의 확률은 선행과 같은 냄새이어서, 또는 임의의 다른 냄새는 모든 악취위한 같아야된다. ABBABAAB :이 냄새를 들어 - - A와 B 다음 순서를 사용합니다. 여덟 시험 동안 각 냄새는 네 번 표시됩니다. 각 실험에 대한 악취 원하는 수에 도달하기 위해 동일한 서열을 연결. 에 관계없이 실험 설계, 유지해야합니다 몇 가지 매개 변수가학습을 최적화하기 위해 정수입니다. CS와 미국 사이의 중복 효과적인 조절에 중요​​합니다. 간 재판 간격 (도 1, 표 1)를 일정하게하고 불규칙하거나 너무 짧거나 너무 긴 간 재판 간격이 크게 조절 프로토콜 1의 효과에 영향을 미칠 수 있기 때문에 최적화 될 필요가있다. 행동 테스트 시험의 중요성 및 디자인에 대한 고려 사항 CS와 US가 함께 제공됩니다 실험의 &#39;취득 단계&#39;동안 기록 응답은 유용 할 수 있습니다. 그러나, 냄새 제시 조건이 재판의 한 유형에서 다른 다를 수 있음을주의하십시오. 강화 시험 중에 수크로오스 다음 냄새 꿀벌의 응답에 영향을 미칠 수있는 시각적 자극 (수크로오스 액 적을 전달하기위한 장치의 이동)과 함께 제공된다. 그리고 꿀벌은 삼초가s는 응답 (; 그림 한 네 냄새 자극의 초 마이너스 크로스 프레 젠 테이션으로 한 초 오버랩)을 표시합니다. 실험이 냄새를 구별하는 학습 꿀벌을 포함하는 경우 (예를 들어, 강화 및 비 강화), 대체 시험에 소개 된 비 강화 냄새 보상 프레젠테이션의 시각적 자극없이 발생하고 꿀벌 응답 할 수있는 전체 사초 있습니다. 따라서,이 냄새에 대한 반응은 취득시 완전히 비교할 수 없습니다. 모든 조절 프로토콜로, 인수 곡선 일에만 의존하지 않습니다. 더 나은 꿀벌 학습 한 내용을 확인하기 위해 모든 자극의 시험이 동일한 조건에서 발생하는 것을 보장도 냄새가 강화되는 동안 비 강화 테스트 일련의 실험을, 소개합니다. 실험의 특정 목적에 따라 테스트 조건 악취 나 에어컨 OD와 시험 시리즈의 단일 테스트 실험 구성 될 수나 또는 조절 및 신규 냄새의 조합. 에어컨 냄새의 단일 테스트 시험은 꿀벌 &#39;에어컨 냄새를 기억하는지 여부의 간단한 분석을 제공합니다. 그러나, 첫 번째 테스트 재판 응답은 꿀벌 &#39;동기 레벨뿐만 아니라 냄새 조절들의 회수를 반영 할 수있다. 시험 시험 시리즈, 에어컨 냄새 또는 컨디셔닝 및 하나 이상의 신규 한 냄새의 단일 일련의 테스트의 흡광 시험 시리즈 중 하나는 또한 메모리를 평가하기 위해 사용될 수있다. 멸종 시험의 시리즈는 꿀벌 &#39;조건 협회 기억의 강도를 평가할 수 있습니다. 조건 반응을 소화하는 데 필요한 시험의 더 많은 수의 리콜 강한. 컨디셔닝 및 신규 냄새의 단일 일련의 테스트는 특이에게 에어컨 냄새의 꿀벌 &#39;메모리를 평가할 수 있습니다. 이는 제어 및 상태와 같은 시점에서 처리 군 모두를 테스트하는 것이 필수적이다. 비교 예곧 긴 시간 동안 개최 꿀벌로 조절 한 후 꿀벌의 성능을 보내고 이유로 인해 포만에 꿀벌을 공급하여 자당 미국에 대한 노출의 문제가있다. 예를 들어, 긴 간격 후의 성능 저하는 메모리 붕괴에 기인 될 수 또는 그 결과가 모호하기 때문에 비 강화 US에 노출에 의해 유도 동기 상태 및 / 또는 학습의 변화 일 수있다. 따라서, 처리 군의 성능이 항상 조건과 동일한 시점에서 테스트 대조군에 대하여 판단한다. 악취 농도 및 무결성 냄새 (CS)의 농도 및 무결성이 손상 될 수있는 몇 가지 방법이 있습니다. 악취 전달에 가장 널리 퍼진 문제는 남용에서 냄새 카트리지의 고갈 (그림 2)입니다. 이 함정을 피하기 위해 카트리지 10-12 사용 (5 꿀벌의 그룹과 매 2 또는 3 시험)를 교체합니다. 또한 사용하는 것이 중요합니다폐 카트리지가 차별적으로 고갈 될 수 있기 때문에 시험 시험에 대한 신선한 카트리지, 따라서 현재 불평등 한 냄새 자극. 또 다른 일반적인 문제는 완전히 세정하지 않고 하나 이상의 악취 카트리지를 사용으로 인한 악취 오염 카트리지이다. 오염이나 오염 된 공기 흐름은 또한 실수 부가 후각을 자극 (활성탄 필터 배경 오염을 방지 할 수있다) 도입 할 수있다. 냄새에 생리적 반응의 측정과 컨디셔닝 PER 결합 할 때 특히 문제가된다. 꿀벌이 재판이 냄새 자극의 돌출을 감소시킨다 시작하기 전에 악취에 노출되어 있기 때문에 새는 냄새 카트리지 문제를 제시한다. 밸브가 인위적으로 의도 된 냄새로 꿀벌의 반응을 감소 열 때 냄새 전달을위한 공기 공급 장치에 넉넉한 거의 또는 전혀 냄새가 전달 될 수 있습니다. 자당 솔루션과 무조건 자극 (보상) 마운트는, US로서 사용 자당 용액의 농도 및 무결성이 실험의 성공에 필수적이다. 컨디셔닝은 US 37로 사용 양과 자당 수용액의 농도의 함수이다. 방법 2에 사용되는 마이크로 미터 주사기 US 전달의 매우 정밀한 (0.2 μL로) 제어를 허용하고, 우리는 기술 두 가지 방법을 위해 그들을 사용하는 것이 좋습니다. 이쑤시개 (방법 1)의 사용, 또는 저급 예산 분야에서 큰 학생 그룹, 작업 훈련에서와 같은 고가의 주사기가 사용될 수없는 상황에 적합하다. 타이밍이 자당의 축적 (및 배달 농도)를 방지하기 위해 이쑤시개의 정기 교환으로 유지되는 방법 하나주의 깊게 구현 한 괜찮습니다. 그러나, 이쑤시개를 이용하여 정확하게 제어하고 조절 연구 한 중요 양과 US 전달의 크기를 추정하기 어렵다. 필요에 수크로오스 농도작업의 어려움과 꿀벌의 내부 상태 또는 년의 시간에 따라 달라질 수 있습니다 조건 관계를 배울 동기 꿀벌을 유지하기 위해 충분한 보상을 제공합니다. 더 어려운 작업은 꿀벌 &#39;작업을 성공적으로 배울 수있는 더 높은 자당 솔루션을 필요로합니다. 실험 기간 동안 꿀벌의 건강과 보상의 인식에 영향을 미치는, 솔루션의 무결성이 손상 될 수도 5 ° C에서 자당 솔루션의 금형 수 축적. 그것은 며칠마다 솔루션을 교체하는 것이 가장 좋습니다. 정밀, 타이밍 및 CS와 US 배달의 일관성 적절한 PER 절차의 구현, 또는 그 문제에 대한 조절 절차에 대한 가장 중요한 문제는 정밀도 타이밍과 CS의 일관성과 미국의 배달 (그림 1)를 포함한다. 절차에 새로운 연구자들은 자주 하나 또는 두 자극의 전달에 대한 부정확하다. ISI의즉, CS 오버랩을 허용하는 실패 US 불량 컨디셔닝 성능을 초래한다. PLC는 실험 악취 전달의 발병 후 자당 3 초를 제공하기위한 소리 신호를 자동화합니다. 연구자들은 신호 후 신속한 배달을 위해 꿀벌에 가까운 크로스 / 물방울을 보유해야한다. 이러한 절차는 일관성있는 ISI를 혼입 도움이됩니다. 에어컨 분야에서 스톱워치를 배치하는 것은 이전과 자극의 전달 후 두 분야에서 꿀벌의 시간을 모니터링뿐만 아니라 재판의 편리한 시간에 배치 할 수 있습니다. 그 방법은 ITI 년대는 상대적으로 일관성이 있어야하고 전체 절차는 제어 된 속도로 실행할 수 있습니다. 너무 짧은 ITI의, 너무 오래 예를 들어보다 1 분, 또는 가난한 에어컨 성능 1로 이어질 수 있습니다. 꿀 꿀벌 성능에, 계절, 환경, 상황에 맞는 효과 꿀벌의 성능이 크게 주변 환경에 의해 영향을받을 수있다이전 및 컨디셔닝 동안 모두. 자주, 계절의 변화와 함께 온도와 음식 가용성의 변동은 배울 수있는 꿀벌 &#39;의욕을 변경합니다. 꽃이 피어있을 때, 꿀벌 &#39;동기는 실험실에서 조절 협회 (38)을 감소 배울 수 있습니다. 식민지가 강조 될 때 - 온도가 너무 높거나 낮은 곳, 식량 부족, 질병 관련 스트레스 - 꿀벌 &#39;내 자신의 학습 성능의 감소를 보여줍니다. 꿀벌은 잠시 동안 잘 배울 수있는 비행 방에 보관하지만,이 역시 질병의 스트레스와 시간이 지남에 따라 자신의 학습 성능을 저하 노화. 에어컨 동안 컨텍스트는 또한 꿀벌의 성능을 줄일 수 있습니다. 불필요한 냄새, 운동 및 기타 자극 실험 자극에서 꿀벌을 방해 할 수 있습니다. 이 문제를 방지하려면, 합리적으로 일관, 단순화 된 시각적 컨텍스트를 유지한다. 유전자형과 경험 PER 성능에 영향을 &lt;P 클래스 = &quot;jove_content&quot;&gt; 꿀 꿀벌 노동자 인해 작업의 전문화, 유전자형, 또는 다른 환경 적 요인 20 모든 조절 절차에 성능이 상당히 다를 수 있습니다. 따라서, 가능한 한 많이, 표준화하기 위하여 실험에 사용 된 동물의 종류 개인간 편차를 줄이는 것이 중요하다. 그녀는 많은 다른 드론과 성관계를 의미 오픈 성관계 여왕이 이끄는 식민지에서 노동자들은 아버지의 유전자형과 다를 수 있습니다. 유전 적 배경 극적인 감각 응답 39의 차이 및 성능 (29) 학습으로 이어질 수 있습니다. 도구 적 단일 드론 28에서 정자 인공 수정 왕비가 이끄는 식민지를 사용하면이 간 개인차를 줄일 수 있습니다. 위에서 설명한 프로토콜은 둥지 입구에서 꿀벌 근로자를 수집하는 방법을 포함한다. 그러나 이러한 꿀벌은 연령이나 행동 작업에 관해서는 서로 다릅니다. 그들은 (inexperien 젊은 될 수있다CED) 또는 그 이상 (경험) 기계. 그들은 그들의 첫번째 방향의 항공편을 만드는 젊은 꿀벌 수 있습니다. 아니면 가드 벌 수있다. 변동성을 줄이기 위해, 빠른 건조 에나멜 페인트 또는 표시 태그 꿀벌을 표시하거나 그들은 성인 (나이를 통제하는)과 같은 등장으로 / 또는 그들은 (경험을 제어하는​​) 꼴을 시작으로. 그 후, 몇 일 후, 컨디셔닝 표시된 꿀벌를 수집합니다. 간호 행위에 종사하는 근로자는 하이브 내의 프레임에서 수집 할 수 있습니다. 그들은 내부의 유충에 대한 공급 및 관리하는 브루 셀에 머리를 삽입 할 때 간호사가 긍정적으로 식별 할 수 있습니다. PER 컨디셔닝 버진 퀸 또는 드론을 사용하여 작업자 꿀벌뿐만 아니라, 처녀 꿀벌 여왕과 드론 쉽게 성능 28 학습에 차이가 꿀벌의 유전 라인을 개발하기위한 연구에 PER 절차에서 조절 될 수있다. 버진 퀸 번째 직후 수집해야어이가 번데기에서 등장하고 마취없이 금지 하네스에 직접 배치했다. 식민지 내부의 골똘히 빗에서 수집 한 젊은, 미숙 한 무인 항공기는 일반적으로 배울 동기를 부여하지 않습니다. 그들이 항공편 짝짓기 시작 후 드론 쉽게 PER 작업 28을 배웁니다. 그들은 여왕을 양육하는 데 사용되는 식민지에 작은 새장에 하룻밤 상대 비행에서 돌아가 압도하면서 그들은 수집해야합니다. 그들에게 에어컨 전에 일을 활용하지 마십시오; 그들은 마구 하룻밤 잘 생존하지 않습니다. 에어컨 이전 시간 드론은 케이지에서 수집 마취없이 금지 하네스에 배치 할 수있는 몇입니다. 결론 PER이 절차는, 방법의 방식으로, PER 실험 설계를위한 시작점에 도달한다. 대부분 PER 프로토콜은 어떤 방식으로 변경 될 설명한 절차는 실험과 accommodat의 특정 목표를 구현하는 것이 필요전자 여러 치료 그룹. 그것은 쉽게 구현할 수있다. 그러나 적절한 구현 세부 사항과 실천에 대한 관심이 필요합니다. 일단은 다른 곤충 종의 여러 기초 및 응용 연구 프로그램에 대한 연구 도구로 추가 할 수있는 강력한 절차가 될 수 마스터.

많은 곤충 생태 학적으로 중요한 자극에 대해 배우고, 그들은 그들의 환경에서 새로운 예측 관계에 적응하기 위해 그 자극에 자신의 행동 반응을 변경합니다. 몇 가지 다른 메커니즘이 행동 가소성의 기초 (예, 비 연관, 연관 / 파블로프 및 조건화 / 1 악기). 소성 이러한 유형의 자극이나 행동이 식품의 발생, 친구, 또는 위험과 같은 중요 이벤트와 관련된 방법에 차이가 있습니다. 가소성이 양식을 이해하는 것은 신경계가 새로운 기억이를 인코딩 변경하는 방법에 대한 기초 연구에 매우 중요합니다. 그것은 작물 생산 (꿀벌) 또는 해충으로 하나, 또한 농업 적으로 중요한 중요한 질병의 벡터 (예를 들면, 체체 파리와 모기) 및 곤충 곤충의 적응 행동을 이해하는 것이 중요합니다. 어떤 ANIM에서 행동 가소성을 공부Al을 1 필드에서 달성 아닌 다수의 변수 위에 실험 제어 레벨을 요구한다. 그것은 더 제어 된 조건 하에서 사용될 수 있으며, 아직은 천연 조건 하에서 동작에 관련되는 강력한 에어컨 프로토콜의 개발을 필요로한다. 꿀벌 (아피스 mellifera이는) 행동 소성 3,4의 제어 분석을 수행하기위한 프로토콜을 개발하는 방법에 대한 훌륭한 모델입니다. 꿀벌의 코 확장 응답 (PER)은 꿀벌은 설탕 용액과 더듬이 자극에 대한 응답으로는 코를 확장하는 자연스러운 행동 반사입니다. 꿀벌은 꽃에서 꿀을 발견하면 정상적인 먹이를 찾아 다니는 행동을하는 동안, PER가 발생합니다. 다행히 꿀벌은 쉽게 실험실에서이 간단하고 쉽게 정량화 할 수있는 동작을 전시 할 예정이다. 이 제어 된 분위기에서, 연구하는 것이 가능하게,이 생태 학적으로 중요한 행동 5 영향 메커니즘. PER의 캘리포니아N 또한 소성 (6)을 기초 행동 및 신경 메커니즘을 나타 내기 위해 설계된 다양한 처리 조건 하에서 자극 인식과 학습과 기억을 조사하기 위해 에어컨 프로토콜 내에서 사용 될 수있다. Kuwabara 7에 의해 처음 연구하기 때문에, PER 조절 널리 비 연관, 연관 및 꿀벌 팔에 행동 가소성의 기초 조작 적 메커니즘을 나타 내기 위해 사용되었다. 이러한 메커니즘은 자유롭게 비행하는 꿀벌 (9)의 연구에서 밝혀 동일합니다. 자유롭게 비행 꿀벌의 연구 달리 PER 컨디셔닝 프로토콜은 전기 생리학 10,11 또는 뇌의 살아있는 세포 형광 이미징 12-14과 결합 될 수있다. 또한 PER 프로토콜은 neur 같은 네트워크의 특정 구성 요소의 역할에 대한 가설을 테스트하기 위해 분자 유전 학적 또는 약리학 적 치료를 통한 신경 경로의 실험 조작을 허용omodulators (15, 16). PER 프로토콜은 또한 환경 조건뿐만 아니라 건강에 독소와 꿀벌 (17)의 꼴을 효율성의 치사 효과를 평가하는 중요한 방법을 제공하고 있습니다. 이 절차는 병렬이 악취 전달 방법을 설명한다. 방법 1 냄새와 크로스 보상을 제시 저렴하고 기술적으로 간단한 방법을 제공하는 냄새와 무조건 자극 (자당) 배달의 버전입니다. 이 방법은 기본 교육에 대한 좋은 및 자동화가 가능하지 않을 때. 그것은 교실이나 교육 기관에이 기술을 소개 할 수있는 좋은 방법입니다. 더욱 어려운 작업과 악취 인식, 학습, 또는 메모리의 결합을 포함하는 생리 학적 평가 실험 컨디셔닝 동안, 정확하고 정밀하게 자극의 개시, 지속 전달의 타이밍을 조절하는 것이 매우 중요하다. 가장 신뢰할 수있는 자극 납기, 악취 전달을 자동화하는 방법을 사용ND 보상 전달의 정확한 방법. 방법 2 악취 전달 및 더 정확한 크로스 전달을 자동화 사용한다. 이것은 기술적으로 더 복잡하고 방법 1보다 더 초기 설정이 필요하지만 크게 조절에 사용 자극의 타이밍과 양의 일관성을 증가시키고, 가능한 한 사용되어야한다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1278">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:203px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:587px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Sucrose</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S9378-1KG</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Odorant compounds (for example):</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td rowspan="6" style="width:587px;">For additional examples of odorants, see any of the papers on olfactory processing from the Smith lab</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">1-hexanol</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">471402-100ML</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:371px;">2-octanone</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">W280208-800G-K</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">heptanol</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">51778-5ML</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">gerianol</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">163333-25G</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">nonanal</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">131210-100ML</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Hexane</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">296090-1L</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Heavy Mineral Oil</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">330760-1L</td>
			<td style="width:587px;">Make sure it&#8217;s odorless</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Ethanol</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">459836-1L</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Scintillation vials</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">Z190535-1PAK</td>
			<td style="width:587px;">Use a small drill bit to bore a small hole in the cap of the vials&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Bee harness</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;">Custom-made from 0.9 cm diameter plastic soda straws or hard plastic/metal tubing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Duct tape</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Kimwipes</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">Z188956-1PAK</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Wash bottles</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">Z560847-3EA</td>
			<td style="width:587px;">For the 70% ethanol&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Small fan in mountable housing</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Dryer tubing</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">FOR METHOD 1 ONLY</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Name</td>
			<td style="width:203px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:587px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">20 ml disposable plastic syringes</td>
			<td style="width:203px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">WU-07945-18</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">15 mm filter paper circles</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">Z274844-1PAK</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Pushpins</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Toothpicks</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">FOR METHOD 2 ONLY</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Name</td>
			<td style="width:203px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:587px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Gilmont Micrometer syringe, 0.2 mL</td>
			<td style="width:203px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-07840-00</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Gilmont micrometer syringe tip</td>
			<td style="width:203px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-07841-00</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">26G 3/8&#8221; Leur hub hypodermic needles</td>
			<td style="width:203px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">14-826-10</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:371px;">1cc tuberculin syringes (plastic/glass)</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">Z181641-1EA&#160;&#160; OR &#160;&#160;Z192090-200EA</td>
			<td style="width:587px;">glass tuberculin syringes are available, but plastic syringes are much less expensive and will work well for a limited number of uses</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small rubber/silicone restrictors</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>EW-95702-02</td>
			<td>Made from 4.8 mm outer diameter silicone tubing or the rubber tips of the 1 cc syringe plungers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Parafilm</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P7793-1EA</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">75 X 100 mm filter paper</td>
			<td style="width:203px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">Z695106-500EA</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:371px;">Direct Logic 05 Programmable Logic Controller</td>
			<td style="width:203px;">Koyo Electronics Industries Co, Ltd</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;">http://www.koyoele.co.jp/&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; OR&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; english/support/dlc.html#plc</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:371px;">1 mm, 4mm &#38; 6 mm inner diameter PVC or silicone tubing&#160;</td>
			<td style="width:203px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">Various</td>
			<td style="width:587px;">Cole-Parmer has a wide selection of suitable tubing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">Polypropylene connectors &#38; leur fittings</td>
			<td style="width:203px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">Various</td>
			<td style="width:587px;">Cole-Parmer has a wide selection of connectors and fittings for many tube sizes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">65-mm Correlated Flowmeter</td>
			<td style="width:203px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-03216-08</td>
			<td style="width:587px;">Aluminum with Glass float; For Liquids and Gases, With Valve</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">&#160;&#160;&#160;&#160; OR&#160;</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:371px;">Tetra Whisper 300 (Tetratek DW96-2) Aquarium Air Pump</td>
			<td style="width:203px;">Aquacave</td>
			<td style="width:119px;">AE-TETRA-300</td>
			<td style="width:587px;">www.aquacave.com</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:371px;">LIF series Solenoid Valves for .042 &#34; ID Tubing, Configuration &#34;E&#34;</td>
			<td style="width:203px;">The Lee Company</td>
			<td style="width:119px;">LFAA1200118H</td>
			<td style="width:587px;">Neoprene, 430 SS, 302 SS, 280mWatts&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; http://www.theleeco.com/LEEWEB2.NSF</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:371px;">PC-Board 12VDC 70dB Piezo Buzzer</td>
			<td style="width:203px;">RadioShack</td>
			<td style="width:119px;">273-074</td>
			<td style="width:587px;">www.radioshack.com</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a proboscis extension response protocol for investigating behavioral plasticity in insects: application to basic, biomedical, and agricultural research

곤충의 생존 (예를 들면, 음식, 동료, 위협)에 대한 중요한 사건으로 그 자극을 연관의 경험을 통해 자극에 자신의 응답을 수정합니다. 곤충 두드러진 연결을 배우고이 사건에 관련이되는 여러 가지 행동 메커니즘이 있습니다. 그것은 농업을위한 유용 곤충을 지원하기위한 프로그램으로이 행동 가소성을 이해하는 것이 중요합니다. 이러한 이해는 질병 벡터와 해충의 역할을 곤충에 의해 만들어진 생물 의학 및 농업 문제에 대한 해결책을 발견하기 위해 사용될 수있다. 코 확장 응답 (PER) 조절 프로토콜은 그들이 인식하는 방법을 연구하고 꿀과 꽃가루 자원에게 생존을위한 식민지 요구 신호 꽃 냄새에 대해 배우고 50 년 이상 꿀벌 (아피스 mellifera이)를 위해 개발되었다. PER 절차는 여러 가지 중요한 생태 학적 엄청 연구를위한 강력하고 편리한 프레임 워크를 제공 채용행동 가소성의 nisms. 그것은 여러 가지 다른 곤충 종과 다른 행동 반사와 함께 사용하기위한 쉽게 적응할 수있다. 이러한 프로토콜들은 용이하게하거나 타겟 neuromodulatory 경로를 조작하기위한 전기 생리학 또는 영상화 통해 CNS에서 신경 활동을 모니터링하기위한 다양한 방법과 함께 사용될 수있다. 이 급속히 환경 스트레스, 독소 또는 농약으로 인한 동작에 치사량 효과를 검출하기위한 강력한 분석이다. 우리는 PER 프로토콜이이 절차를 사용하여 구현하는 간단 방법을 보여줍니다. 하나는 학생들을위한 또는 실험적인 치료의 효과의 빠른 분석을위한 실험실 운동으로 적합하다. 다른 하나는 행동 조절의 연구에 중요한 변수의보다 철저한 제어를 제공합니다. 우리는 hypothese 테스트하는 데 사용할 수있는 바이너리 예에서 / 아니오 대기 시간과 코 연장 기간 등 자세한 연속 변수에 이르기까지 행동 응답하는 방법을 몇 가지 조치를 보여의. 그리고, 우리는 그들이 처음 절차를 사용할 때 일반적으로 발생하는 연구자 일부 함정을 논의한다.

우리는 상술 PER 프로토콜의 사용이 예를 제시한다. 방법 2의 첫 번째 예를 만들어 사용은 꿀벌이 CS 5,24,25으로 사용까지 냄새 분자 유사성의 기능으로 다른 냄새를 인식하는 방법을 공부합니다. 두 번째 방법은도 1 및 연구 실험실에서 실험 컨디셔닝 PER 사용하기 시작해야 할 때 취해주의 일부의 사용의 일례이다. 이와 같은 한 연구는 13 또는 전기 생리가 26를 분석하여 영상화와 함께 꿀벌과 나방의 후각 &#39;지각 공간&#39;을 설명하는 데 사용되어왔다. 꿀벌은 (N = 20) (12) 앞으로 페어링 조절 시험 (그림 3A)을 통해 자당 보강 취제 데카을 연결하는 조절되었다. 꿀벌의 약 10 %는 정상 1 심에 &#39;자발적으로&#39;반응했다. 후 그 responde 비율꿀벌의 100 % 다섯째 시행 이후의 모든 재판에 응답 할 때까지 다음 몇 가지 실험을 통해 증가 거라고. 몇몇 연구는 응답의 증가는 몇 가지 중요한 관리 절차 3에 앞으로 페어링 상태 (그림 1) 상대에 고유 한 것으로 나타났습니다. 취득 단계 후, 각 꿀벌은 냄새 CS에 체계적으로 분자 구조에 CS 달랐다 여러 가지 다른 냄새 물질에 대한 노출을 포함 비 강화 테스트 일련의 실험 (그림 3B)을 실시 하였다. 꿀벌은 CS에 가장 강하게 반응했다. 기타 방향제 그들의 응답은 CS와 같은 적어도 취기에 낮은 반응으로, 구조 체계적인 변화의 함수로 감소 하였다. 도 4에서, 학생들은 처음으로 알게되는 최근의 공방 결과로부터, 어떻게 예시되어 사용 방법 1 꿀벌을 컨디셔닝하도록. 학생 전나무<html> t 자당 보강 (그림 4A)와 앞으로 페어링 methycyclohexanone (MCH) 또는 옥탄 올 (10 월)에 의해 꿀벌을 조절. 퍼센트 응답은 1 심에서 낮았다과 꿀벌 냄새 크로스 연결을 배운 것을 나타내는, 이후 시험에 증가했다. 꿀벌 학생들의 서로 다른 그룹에서 컨디셔닝 연결을 배운 정도의 차이가 있었다. 우리의 경험에 의하면, 이러한 종류의 차이는 방법 (방법 1)에서 부정확 한 요소 또는 실험자의 교육 수준, CS로서 사용 하였다 냄새에 기인 할 수있다. 세번째 경우, 성능은 빠르게 실험자 &#39;증가 경험보다 일관된다. 에어컨 후 각 꿀벌은 각각의 냄새로 두 번 테스트되었습니다. 10월 또는 MCH의 앞으로 페어링을 조절했다 꿀벌의 그룹에서, 응답으로, 에어컨 냄새 (그림 4B)에 대한 강한 기대했다. <html> 천만에 &quot;&gt; 10월에 페어링을 앞으로 경험 꿀벌의 두 번째 그룹은 냄새 OCT를 이전 버전과의 크로스와 결합 된 다른 그룹에 병렬로 조절되었다. 이전 버전과의 페어링이 입증하는 관리 절차의 여러 종류 중 하나입니다 해당 응답의 증가 이전 버전과의 페어링, 자당 미국과 냄새 CS는 그림 1에 나타낸 것과 반대 순서로 제시 등의 과민 반응에서 비특이적 자극으로 페어링을 전달할 특정하고 다른 프로세스로 인해되지 않습니다.. 취득 데이터를 이전 버전과의 페어링에서 아르 CR은 수크로오스 테이션 후의 냄새 CS의 프리젠 테이션을 부여 획득 할 수 없기 때문에 도시되지. 연관 컨디셔닝 예측되는 바와 같이, 10월에 응답 수준은 후방 기 (도 4C)에 순방향 페어링 그룹 상대적으로 높았다. 7fig1highres.jpg &quot;폭 =&quot;500 &quot;/&gt; 그림 조절을위한 실험 설계의 1 다이어그램을 앞으로 페어링을 사용.보기이 그림에서 사용하는 용어의 정의는 표 1을 참조하십시오. (A) CS (냄새) 앞에 미국 (크로스 / 수용액)와 겹칩니다. 표시된 CS와 미국의 관계는 조화 꿀벌과 나방에 최적입니다. 그러나 최적의 ISI는 조절 프로토콜과 동물의 종 하나에 따라 달라질 수 있습니다. (B) 고장 및 CS, CR, 미국, UR의 상대 타이밍을. 미국의 발표 이전 또는 비 강화 &#39;시험&#39;시험 중 하나를 발생하는 CR 실험 프로토콜에 따라 측정 한 것입니다. <img alt="그림이" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51057/51057fig2highres.jpg" width="500" /> 도 2의 카트리지 재사용 냄새 고갈. 이들 데이터의 경우, 악취 카트리지이었다셋업 헥산으로 텍스트에 기술 된 바와 같이. 헥산 일반적 PER 연구에서 CS로 사용된다; 그러나, 고갈의 실제 속도는 냄새와 용매에 따라 달라집니다. 카트리지는 4 초 (40 용도와 동일 할 표준 실험에서 5 꿀벌 / 재판 가정) 8 시험을 통해 모든 분에 대해 한 번 사용되었다. PER 실험에 대한 상대적 표준이었다 표시된 용제에 희석, 2.0 M (A) 및 0.2 M (B)이었다. (A는, B) 악취 제 고상 위에 흡착 여덟째 시험 후에 채취 다음, 가스 크로마토 그래피에 탈착 된 마이크로 추출 (SPME) 섬유. 피크에서 상대 지역은 모두 용매에 대한 여덟째에 대한 첫 번째 시험 상대 후 모두 농도에 대한 더 높았다 (윌 콕슨이 일치하는 쌍으로 서명 순위 테스트 P &lt;0.05 [*] 이상), 적은 냄새를 카트리지에서 전달 된 것을 알 수있는 카트리지 횟수. (C, D) 단지 여덟째 TR 보여주는 동일한 데이터를 사용되었던 후에<html> 확장 y 축으로 IAL. 이는 공핍 광유 헥산 상대적인 약간 큰, 오직 낮은 농도의 것을 나타낸다. <img alt="그림 3" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51057/51057fig3highres.jpg" width="500" /> 그림 3 수집 및 테스트 CS 및 공기에 대한 방법이 아니라 데카 사용. (A) 시험 별 시험 12 앞으로 페어링 시험 (그림 1) 이상 반응 (CR). 데이터는 5 꿀벌 각각의 네 그룹으로 조절 N = 20 꿀벌에서 있습니다. ISI는 3 초이고 ITI은 6 분이었다. (B)의 탄소 사슬 길이 및 / 또는 카르 보닐 탄소의 위치에 의해 다르다 데카 악취를 이용한 비 강화 테스트. 냄새는 네 그룹에 걸쳐 무작위 직렬로 제시하고, CR의 소멸을 방지하기 위해 데카 날 (매 시험 2-3)로 보강 산재 시험 하였다. 항상 &quot;&gt; :&quot;유지 - together.within 페이지를 = FO &quot;e_content <img alt="그림 4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51057/51057fig4highres.jpg" width="500" /> 워크숍에서 그림 4 데이터는이 기간 동안 학생들은 (각각 23 명 및 15 GPS를 1과 2) 옥탄 올 단련 꿀벌의 세 그룹에서 방법 PER 1 (A) 취득 데이터를 사용하여 꿀벌을 컨디셔닝하는 훈련을받은 졸업 및 아세토 닐 (N = 10) (B) 모두 냄새와 비 강화 테스트 동안의 CR.; 네 그룹에서 무작위 시리즈에 제시된 시험. (C) 꿀벌 앞으로 쌍 한 두 그룹에서 모두 냄새와 비 강화 테스트 (GP 1, N = 23)와 한 뒤로 (N = 25) 짝. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> 용어 (약어) </td><td> 정의 </td><td> 관련 예 </td></tr><tr><td> 조건 자극 (CS) </td><td>처음에 거의 또는 전혀 반응을 이끌어 미국을 신호 자극 </td><td> 냄새 </td></tr><tr><td> 조건 반응 (CR) </td><td> 미국과의 관계 후 CS에 대한 응답 </td><td> 코 EXTENSION </td></tr><tr><td> 무조건 자극 (US) </td><td> 반응을 유도하는 중요한 생물학적 자극 </td><td> 자당 / 물 솔루션 </td></tr><tr><td> 무조건 반응 (UR) </td><td> 미국에 대한 응답 </td><td> 코 EXTENSION </td></tr><tr><td> 간 자극 간격 (ISI) </td><td> 미국의 CS의 발병과 발병 사이의 시간 </td><td> 자당 간격 냄새 </td></tr><tr><td> 간 시험 간격 (ITI) </td><td> 하나의 동물에 대한 연속 CS-US 상대 팀 사이의 시간 </td><td> 냄새에 냄새 (시험 N) (시험 N + 1) 간격 </td></tr></tbody></table> 표 1 임으로 중요 용어. 협회의 다른 유형 있지만, CR과 UR이 같은 에어컨 PER은. 이러한 용어의 그림 1을 참조하고, CR과 UR이 다를 수 있습니다 반사. <a href="/files/ftp_upload/51057/BEE_4.avi" target="_blank">영화 1.</a> 이 냄새에 반응하도록 조정했다 후 PER을 수행하는 꿀벌의 비디오. 약 1.5 초 악취 발생 다음 꿀벌의 PER 응답을합니다. 추적 소프트웨어는 악취의 프리젠 테이션에 응답하여 더듬이 움직임을 매핑. 영상의 상부 우측 코너에 플롯 라인 더듬이 실제 움직임을 묘사한다. X (왼쪽)와 Y의 화면 표시 더듬이 움직임 아래쪽의 두 그래프 (오른쪽)의 좌표. 비디오에 표시된 그래프의 수직 라인이, 오른쪽, 조명 ON, PER 왼쪽, 표시 소등 및 후퇴 코끼리 코.

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A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

코 확장 응답 곤충의 행동 소성을 조사하기위한 프로토콜 : 기본, 바이오 메디컬에 응용 프로그램, 및 농업 연구

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

a-proboscis-extension-response-protocol-for-investigating-behavioral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

34.1K 조회수.  Arizona State University. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species. 

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Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in rodents have shown a direct link between testosterone and aggressive behavior1 and folk wisdom adapts these findings to humans, suggesting that testosterone induces antisocial, egoistic or even aggressive behavior2. However, many researchers doubt a direct testosterone-aggression link in humans, arguing instead that testosterone is primarily involved in status-related behavior3,4. As a high status can also be achieved by aggressive and antisocial means it can be difficult to distinguish between anti-social and status seeking behavior.
We therefore set up an experimental environment, in which status can only be achieved by prosocial means. In a double-blind and placebo-controlled experiment, we administered a single sublingual dose of 0.5 mg of testosterone (with a hydroxypropyl-&beta;-cyclodextrin carrier) to 121 women and investigated their social interaction behavior in an economic bargaining paradigm. Real monetary incentives are at stake in this paradigm; every player A receives a certain amount of money and has to make an offer to another player B on how to share the money. If B accepts, she gets what was offered and player A keeps the rest. If B refuses the offer, nobody gets anything. A status seeking player A is expected to avoid being rejected by behaving in a prosocial way, i.e. by making higher offers.
The results show that if expectations about the hormone are controlled for, testosterone administration leads to a significant increase in fair bargaining offers compared to placebo. The role of expectations is reflected in the fact that subjects who report that they believe to have received testosterone make lower offers than those who say they believe that they were treated with a placebo. These findings suggest that the experimental economics approach is sensitive for detecting neurobiological effects as subtle as those achieved by administration of hormones. Moreover, the findings point towards the importance of both psychosocial as well as neuroendocrine factors in determining the influence of testosterone on human social behavior.

The procedure described in this protocol shows that testosterone administration and folk beliefs about testosterone may be associated with directly opposed social behaviors.

행동 내분비학 및 실험 경제학을 결합 : 테스토 스 테론과 사회 의사 결정

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

연구

신경과학

TMS: Using the Theta-Burst Protocol to Explore Mechanism of Plasticity in Individuals with Fragile X Syndrome and Autism

Fragile X Syndrome (FXS), also known as Martin-Bell Syndrome, is a genetic abnormality found on the X chromosome.1,2 Individuals suffering from FXS display abnormalities in the expression of FMR1 - a protein required for typical, healthy neural development.3 Recent data has suggested that the loss of this protein can cause the cortex to be hyperexcitable thereby affecting overall patterns of neural plasticity.4,5
In addition, Fragile X shows a strong comorbidity with autism: in fact, 30% of children with FXS are diagnosed with autism, and 2 - 5% of autistic children suffer from FXS.6
Transcranial Magnetic Stimulation (a non-invasive neurostimulatory and neuromodulatory technique that can transiently or lastingly modulate cortical excitability via the application of localized magnetic field pulses 7,8) represents a unique method of exploring plasticity and the manifestations of FXS within affected individuals. More specifically, Theta-Burst Stimulation (TBS), a specific stimulatory protocol shown to modulate cortical plasticity for a duration up to 30 minutes after stimulation cessation in healthy populations, has already proven an efficacious tool in the exploration of abnormal plasticity.9,10 
Recent studies have shown the effects of TBS last considerably longer in individuals on the autistic spectrum - up to 90 minutes.11 This extended effect-duration suggests an underlying abnormality in the brain's natural plasticity state in autistic individuals - similar to the hyperexcitability induced by Fragile X Syndrome.
In this experiment, utilizing single-pulse motor-evoked potentials (MEPs) as our benchmark, we will explore the effects of both intermittent and continuous TBS on cortical plasticity in individuals suffering from FXS and individuals on the Autistic Spectrum.

In this article, we examine the effects of Theta-Burst TMS stimulation on cortical plasticity in individuals suffering from Fragile X syndrome and individuals on the autistic spectrum.

TMS : 연약한 X 증후군 및 자폐증과 개인의 소성의 Mechasnism를 탐험하는 세타 - 버스트 프로토콜을 사용하여

Fragile X Syndrome (FXS), also known as Martin-Bell Syndrome, is a genetic abnormality found on the X chromosome.1,2 Individuals suffering from FXS ...

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees (Apis mellifera)

Honeybees (Apis mellifera) are well known for their communication and orientation skills and for their impressive learning capability1,2. Because the survival of a honeybee colony depends on the exploitation of food sources, forager bees learn and memorize variable flower sites as well as their profitability. Forager bees can be easily trained in natural settings where they forage at a feeding site and learn the related signals such as odor or color. Appetitive associative learning can also be studied under controlled conditions in the laboratory by conditioning the proboscis extension response (PER) of individually harnessed honeybees3,4. This learning paradigm enables the study of the neuronal and molecular mechanisms that underlie learning and memory formation in a simple and highly reliable way5-12. A behavioral pharmacology approach is used to study molecular mechanisms. Drugs are injected systemically to interfere with the function of specific molecules during or after learning and memory formation13-16.
Here we demonstrate how to train harnessed honeybees in PER conditioning and how to apply drugs systemically by injection into the bee flight muscle.

Behavioural Pharmacology in Classical Conditioning of the Proboscis Extension Response in Honeybees Apis mellifera

We demonstrate how to implement a behavioral pharmacology method in an appetitive olfactory conditioning paradigm in honeybees (Apis mellifera) by systemic application of drugs. This method allows investigation of the mechanisms underlying learning and memory formation in a simple and reliable way.

꿀벌의 코 확장 응답 클래식 컨디셔닝에 Behavioural 약리학 ( 아피스 mellifera)

Honeybees (Apis mellifera) are well known for their communication and orientation skills and for their impressive learning capability1,2. Because the ...

Enabling High Grayscale Resolution Displays and Accurate Response Time Measurements on Conventional Computers

Display systems based on conventional computer graphics cards are capable of generating images with 8-bit gray level resolution. However, most experiments in vision research require displays with more than 12 bits of luminance resolution. Several solutions are available. Bit++ 1 and DataPixx 2 use the Digital Visual Interface (DVI) output from graphics cards and high resolution (14 or 16-bit) digital-to-analog converters to drive analog display devices. The VideoSwitcher 3 described here combines analog video signals from the red and blue channels of graphics cards with different weights using a passive resister network 4 and an active circuit to deliver identical video signals to the three channels of color monitors. The method provides an inexpensive way to enable high-resolution monochromatic displays using conventional graphics cards and analog monitors. It can also provide trigger signals that can be used to mark stimulus onsets, making it easy to synchronize visual displays with physiological recordings or response time measurements.
Although computer keyboards and mice are frequently used in measuring response times (RT), the accuracy of these measurements is quite low. The RTbox is a specialized hardware and software solution for accurate RT measurements. Connected to the host computer through a USB connection, the driver of the RTbox is compatible with all conventional operating systems. It uses a microprocessor and high-resolution clock to record the identities and timing of button events, which are buffered until the host computer retrieves them. The recorded button events are not affected by potential timing uncertainties or biases associated with data transmission and processing in the host computer. The asynchronous storage greatly simplifies the design of user programs. Several methods are available to synchronize the clocks of the RTbox and the host computer. The RTbox can also receive external triggers and be used to measure RT with respect to external events. 
Both VideoSwitcher and RTbox are available for users to purchase. The relevant information and many demonstration programs can be found at <a href="http://lobes.usc.edu/">http://lobes.usc.edu/</a>.

Conventional computer hardware can not generate visual stimuli with sufficiently high grayscale resolution and measure response times with sufficient accuracy. We describe how to use the VideoSwitcher to produce high-resolution monochromatic displays, and the RTbox to measure response times with high accuracy on conventional computer hardware.

사용 높음 - 해상도 디스플레이와 종래의 컴퓨터에 정확한 응답 시간 측정 그레이 스케일

Display systems based on conventional computer graphics cards are capable of generating images with 8-bit gray level resolution. However, most experiments ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

쥐에서 자당의 갈망의 보육을 평가하기위한 일반적인 방법

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

A Lightweight, Headphones-based System for Manipulating Auditory Feedback in Songbirds

Experimental manipulations of sensory feedback during complex behavior have provided valuable insights into the computations underlying motor control and sensorimotor plasticity1. Consistent sensory perturbations result in compensatory changes in motor output, reflecting changes in feedforward motor control that reduce the experienced feedback error. By quantifying how different sensory feedback errors affect human behavior, prior studies have explored how visual signals are used to recalibrate arm movements2,3 and auditory feedback is used to modify speech production4-7. The strength of this approach rests on the ability to mimic naturalistic errors in behavior, allowing the experimenter to observe how experienced errors in production are used to recalibrate motor output.
Songbirds provide an excellent animal model for investigating the neural basis of sensorimotor control and plasticity8,9. The songbird brain provides a well-defined circuit in which the areas necessary for song learning are spatially separated from those required for song production, and neural recording and lesion studies have made significant advances in understanding how different brain areas contribute to vocal behavior9-12. However, the lack of a naturalistic error-correction paradigm - in which a known acoustic parameter is perturbed by the experimenter and then corrected by the songbird - has made it difficult to understand the computations underlying vocal learning or how different elements of the neural circuit contribute to the correction of vocal errors13.
The technique described here gives the experimenter precise control over auditory feedback errors in singing birds, allowing the introduction of arbitrary sensory errors that can be used to drive vocal learning. Online sound-processing equipment is used to introduce a known perturbation to the acoustics of song, and a miniaturized headphones apparatus is used to replace a songbird's natural auditory feedback with the perturbed signal in real time. We have used this paradigm to perturb the fundamental frequency (pitch) of auditory feedback in adult songbirds, providing the first demonstration that adult birds maintain vocal performance using error correction14. The present protocol can be used to implement a wide range of sensory feedback perturbations (including but not limited to pitch shifts) to investigate the computational and neurophysiological basis of vocal learning.

We describe the design and assembly of miniaturized headphones suitable for replacing a songbird&#x2019;s natural auditory feedback with a manipulated acoustic signal. Online sound processing hardware is used to manipulate song output, introduce real-time errors in auditory feedback via the headphones, and drive vocal motor learning.

노래하는 새는에 청각 피드백을 조작하기위한 경량, 헤드폰 기반의 시스템

Experimental manipulations of sensory feedback during complex behavior have provided valuable insights into the computations underlying motor control and ...

Inducing Plasticity of Astrocytic Receptors by Manipulation of Neuronal Firing Rates

Close to two decades of research has established that astrocytes in situ and in vivo express numerous G protein-coupled receptors (GPCRs) that can be stimulated by neuronally-released transmitter. However, the ability of astrocytic receptors to exhibit plasticity in response to changes in neuronal activity has received little attention. Here we describe a model system that can be used to globally scale up or down astrocytic group I metabotropic glutamate receptors (mGluRs) in acute brain slices. Included are methods on how to prepare parasagittal hippocampal slices, construct chambers suitable for long-term slice incubation, bidirectionally manipulate neuronal action potential frequency, load astrocytes and astrocyte processes with fluorescent Ca2+ indicator, and measure changes in astrocytic Gq GPCR activity by recording spontaneous and evoked astrocyte Ca2+ events using confocal microscopy. In essence, a &#8220;calcium roadmap&#8221; is provided for how to measure plasticity of astrocytic Gq GPCRs. Applications of the technique for study of astrocytes are discussed. Having an understanding of how astrocytic receptor signaling is affected by changes in neuronal activity has important implications for both normal synaptic function as well as processes underlying neurological disorders and neurodegenerative disease.

Here we describe an adaptation of protocols used to induce homeostatic plasticity in neurons for the study of plasticity of astrocytic G protein-coupled receptors. Recently used to examine changes in astrocytic group I mGluRs in juvenile mice, the method can be applied to measure scaling of various astrocytic GPCRs, in tissue from adult mice in situ and in vivo, and to gain a better appreciation of the sensitivity of astrocytic receptors to changes in neuronal activity.

신경 발사 환율의 조작에 의해 성상 세포 수용체의 가소성을 유도

Close to two decades of research has established that astrocytes in situ and in vivo express numerous G protein-coupled receptors (GPCRs) that can be ...

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy and cheap methods to distinguish between individuals in a trial. A standard technique for this is CO2 anaesthesia and then labelling or wing clipping each fly. However, this is invasive and has been shown to affect behavior. Other techniques have used coloration to identify flies. This article presents a simple and non-invasive method for labelling Drosophila that allows them to be individually identified within experiments, using food coloring. This method is used in trials where two males compete to mate with a female. Dyeing allowed quick and easy identification. There was, however, some difference in the strength of the coloration across the three species tested. Data is presented showing the dye has a lower impact on mating behavior than CO2 in Drosophila melanogaster. The impact of CO2 anaesthesia is shown to depend on the species of Drosophila, with D. pseudoobscura and D. subobscura showing no impact, whereas D. melanogaster males had reduced mating success. The dye method presented is applicable to a wide range of experimental designs.

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

This protocol describes a simple, cost effective way to individually identify Drosophila or other insects. Demonstration data investigating mating success across three species of Drosophila show that this method is comparable or better than the use of CO2 anaesthesia.

행동 분석 실험에 대한 염색 곤충 : 마취의 짝짓기 행동<em&gt; 초파리</em

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy ...

Online Transcranial Magnetic Stimulation Protocol for Measuring Cortical Physiology Associated with Response Inhibition

We describe the development of a reproducible, child-friendly motor response inhibition task suitable for online Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) characterization of primary motor cortex (M1) excitability and inhibition. Motor response inhibition prevents unwanted actions and is abnormal in several neuropsychiatric conditions. TMS is a non-invasive technology that can quantify M1 excitability and inhibition using single- and paired-pulse protocols and can be precisely timed to study cortical physiology with high temporal resolution. We modified the original Slater-Hammel (S-H) stop signal task to create a &#34;racecar&#34; version with TMS pulses time-locked to intra-trial events. This task is self-paced, with each trial initiating after a button push to move the racecar towards the 800 ms target. GO trials require a finger-lift to stop the racecar just before this target. Interspersed randomly are STOP trials (25%) during which the dynamically adjusted stop signal prompts subjects to prevent finger-lift. For GO trials, TMS pulses were delivered at 650 ms after trial onset; whereas, for STOP trials, the TMS pulses occurred 150 ms after the stop signal. The timings of the TMS pulses were decided based on electroencephalography (EEG) studies showing event-related changes in these time ranges during stop signal tasks. This task was studied in 3 blocks at two study sites (n=38) and we recorded behavioral performance and event-related motor-evoked potentials (MEP). Regression modelling was used to analyze MEP amplitudes using age as a covariate with multiple independent variables (sex, study site, block, TMS pulse condition [single- vs. paired-pulse], trial condition [GO, successful STOP, failed STOP]). The analysis showed that TMS pulse condition (p&#60;0.0001) and its interaction with trial condition (p=0.009) were significant. Future applications for this online S-H/TMS paradigm include the addition of simultaneous EEG acquisition to measure TMS-evoked EEG potentials. A potential limitation is that in children, the TMS pulse sound could&#160;affect behavioral task performance.

We describe an experimental procedure to quantify excitability and inhibition of primary motor cortex during a motor response inhibition task by using Transcranial Magnetic Stimulation throughout the course of a Stop Signal Task.

대뇌 생리학 응답 억제와 관련 된 측정을 위한 온라인 Transcranial 자석 자극 프로토콜

We describe the development of a reproducible, child-friendly motor response inhibition task suitable for online Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) ...

SwarmSight: Real-time Tracking of Insect Antenna Movements and Proboscis Extension Reflex Using a Common Preparation and Conventional Hardware

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis during feeding. The ability to rapidly obtain high-resolution measurements of natural antenna and proboscis movements and assess how they change in response to chemical, developmental, and genetic manipulations can aid the understanding of insect behavior. By extending our previous work on assessing aggregate insect swarm or animal group movements from natural and laboratory videos using the video analysis software SwarmSight, we developed a novel, free, and open-source software module, SwarmSight Appendage Tracking (SwarmSight.org) for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The software processes frames about 120 times faster than humans, performs at better than human accuracy, and, using 30 frames per second (fps) videos, can capture antennal dynamics up to 15 Hz. The software was used to track the antennal response of honey bees to two odors and found significant mean antennal retractions away from the odor source about 1 s after odor presentation. We observed antenna position density heat map cluster formation and cluster and mean angle dependence on odor concentration.

This protocol describes steps for using the novel software, SwarmSight, for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The free, open-source software processes frames about 120 times faster than humans and performs at better than human accuracy.

SwarmSight: 곤충 안테나와 일반적인 준비와 기존 하드웨어를 사용 하 여 코 확장 반사의 실시간 추적

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis ...