이 작품은 캐나다 자연 과학 및 공학 연구위원회 (NSERC)과 크론과 캐나다의 대장염 재단 (CCFC)에서 KJ로 운영 교부금에 의해 지원되었다. VM은 CFRI 친목 및 GB 건강 연구의 캐나다 연구소 (CIHR)에서 대학원 재학에 의해 지원됩니다. BAV는 창자와 간 장애 소아 소화기 및 KJ의 소아 IBD 연구 및 캐나다 연구 의자 재단 (CHILD) 의자는 어린이와 어린이 및 가족 연구소 (CFRI) 임상 과학자 상 프로그램에서 지원하는 수석 임상 과학자와 어린이입니다 브리티시 컬럼비아 대학.

동물을 대상으로 한 절차 브리티시 컬럼비아 대학의 기관 동물 케어 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 설명 동물 관리 지침을 따르십시오. 대표적인 결과는 흰쥐에서 제출 될 것입니다 동안이 프로토콜에 언급 된 절차는 쥐와 생쥐 모두에 대해 설명한다. 1. DNBS 및 직장 내 관리의 준비 <ol><li> 쥐 DNBS의 직장 점안를 들어, 갓 50 % 에탄올 DNBS/250 μL의 15 ~ 30 밀리그램을 준비합니다. 마우스의 경우, 50 % 에탄올 DNBS/100 μL의 2-6 밀리그램을 준비합니다. 참고 : 각 시설에서 관리 할 수​​있는 정확한 DNBS 농도를 최적화합니다. 수컷 스프 라그 - 돌리 래트 및 C57BL / 6 마​​우스, 그러나 다른 마우스 및 래트 균주 사용될 수는 DNBS 대장염의 유도를 위해 바람직하다. 대조군은 단 하나, OMI 수를 에탄올의 효과를 관련 경증 또는 결석으로 50 % 에탄올로 처리 한 마우스 및 래트가 사용될 수있다연구 12이 그룹의 포함을 t. </li><li> 끝으로 고정 (마우스 - - 쥐 또는 PE-50 PE-90) 폴리에틸렌 카테 테르가 19 G 바늘로 1 ML의 주사기를 연결합니다. </li><li> 가볍게 가열 패드에 쥐 또는 마우스 휴식 마취 (코 콘을 통해 1.5 %의 이소 플루 란을 투여하여 예를 들면, 동물들은 여전히 깜짝 연하 반사 신경을 가지고 정기적으로 호흡을 표시해야합니다.) 건조 눈을 피하기 위해 눈에 눈물 젤을 적용합니다. </li><li> 부드럽게 원위부 대장에 존재할 수있는 모든 의자를 제거하기 위해 동물의 후방 끝에 손가락 끝의 압력을 적용합니다. </li><li> 부드럽게 마우스의 경우 쥐, 또는 3~4센티미터의 항문에 약 8cm의 근위부에 도달하는 카테터, 직장 내 카테터를 삽입합니다. 쉽게 삽입을 허용 윤활 카테터를 삽입하는 동안 용액을 소량 주입. 주 : 카테터를 삽입하는 동안 어떤 저항이 느껴지는 경우,이 천공으로 이어질 수 있으므로 삽입하기 위하여 계속하지 않는다장벽. 카테터를 제거하고 다시 진행하기로 대장을 윤활, 부드럽게 삽입을 시도. </li><li> 천천히 250 (쥐) 또는 100 (쥐) DNBS ㎕의, 또는 컨트롤 같은 부피의 50 % 에탄올을 주입. DNBS을 주입 한 후, DNBS의 손실을 방지하기 위해 90 초 동안 동물 머리 아래로 놓습니다. </li><li> DNBS 관리 후 첫 주 동안 탈수를 방지하기 위해 0.2 %의 식염수에 동물에게 8 % 자당의 물을 공급. </li><li> 조심스럽게 체중 감소와 실험 기간 동안 탈수의 증세 매일 모니터링과 함께 동물을 관찰합니다. 주 : 체중 감소가 급속히 최대 허용 체중 감소 CCAC 권장 접근있다. 이것은 주로 탈수 유래하기 때문에, 체중 감소는 탈수를 제한하는 락 테이트 화 링거액을 관리하기위한 지표로 사용한다. 적절한 건강 문제에 대한 시설의 수의사와 상담하시기 바랍니다. </li></ol> 2. 공동조직을 llecting 및 DNBS 장애인 마우스의 조직 학적 손상을 평가 <ol><li> DNBS와 공격 후 원하는 시점에 충분한 산소를 보충 마취 챔버에서 이소 플루 란과 했나봐 동물을 안락사. 더 상승 또는 가슴의 하락을 볼되지 않을 때까지 동물을 관찰하고 더 만져서 알 수있는 심장 박동이 없습니다. 확인 동물은 제대로 자궁 경부 전위 다음에 발가락 끼거나 각막의 접촉에 대한 응답의 부재로 안락사되었습니다. </li><li> 복강을 열고 전체 대장을 제거합니다. 길이 방향으로 장을 열고, 거시적 점막 궤양은 쥐의 대장 (마우스 2 ~ 3 CM)의 선단에서 약 5-6센티미터 근위를 관찰해야한다. 주의 : 원하는 경우 대장을 제거한 후에 거시적 손상 점수를 평가. 대조군에서의 해부학 적 위치를 대응에서 결장의 세그먼트를 수집합니다. 참고 : 매크로 손상 점수에 대한 조직을 처치 개인해야처리 군의 신원을 멀게 할. 심각도 및 궤양의 범위 (0-10), 결석 또는 설사의 존재 (0 또는 1), 유착 (0, 1, 또는 2)와 최대 결장 벽 두께에 대한 점수와 합산 : 다음과 유사한 조건을 사용하여 조직 섹션을 점수 밀리미터 11. </li><li> 0.5 cm 섹션이 최대 거시적 인 손상의 사이트에 인접 수집합니다. 스냅 후 폐장 내 myeloperoxidase (MPO) 활동 (호중구 침투의 측정)를 평가하고, 조직 학적 분석을 위해 10 % 중성 포르말린의 다른 섹션을 배치하는 액체 질소 한 0.5 cm 섹션을 동결. 참고 : 폐장 내 myeloperoxidase 분석은 최대 1 개월 -80 ° C에 저장할 수 있습니다 냉동 조직을 스냅. </li><li> 2.3 단계에서 조직 학적 분석을 위해 수집 된 조직이 하룻밤 포르말린에 고정하고 70 % 에탄올로 세척 할 수 있습니다. 파라핀 조직을 포함하고 원하는 두께 (3 ~ 5 μm의), 조직 학적 채점 hemotoxylin과 에오신 (HE)와 얼룩을 잘라. </li&gt; <li> 이 관찰자가 각 그룹에 대한 조직 학적 손상 점수를 결정하기 위해 광학 현미경으로 각 동물로부터 적어도 세 조직 섹션을 점수를 가지고. 참고 : 조직 학적 손상의 점수에 대한 조직을 처치 개인이 치료 그룹의 정체성에 눈을 멀게한다. 염증 세포 침윤의 정도 (0 = 결석, 3 = 전층), 점막 구조의 손실 (0 = 결석, 3 = 중증), 존재 토굴 농양의 부재 (0-1) : 다음 또는 이와 유사한 기준을 사용하여 조직 섹션 점수 , 술잔 세포 고갈 (0-3). 이러한 점수 (11)의 합으로 조직 학적 손상의 점수를 결정합니다. </li></ol> 3. DNBS에 폐장 내 myeloperoxidase (MPO) 분석을 수행하는 장애인 창자 조직 <ol><li> 2.3 단계에서 얻어진 0.5 cm 결장 세그먼트 분석 MPO 활동. MPO 균질화 완충액에서 조직 50 밀리그램 결장 segme을 얻었다 (50 mM의 인산 칼륨 완충액에서 0.5 %의 헥사 데실 - 암모늄 브로마이드 (산도 6.0)) 균질화균질화 버퍼 정지 NT는 / ㎖. </li><li> X g 만에 2 분 동안 4 ° C에서 1 ㎖ 부분과 원심 분리기에 균질화 된 솔루션을 나누어지는. </li><li> O-dianisidinedihydrochloride의 0.167 ㎎ / ㎖와 큐벳에 0.0005 %의 과산화수소를 함유하는 2.9 ml의 50 mM의 인산염 완충액 (pH 6.0)으로 각각 나누어지는을 100 μl를 섞는다. </li><li> 460 nm에서 분광 광도계를 사용하여 흡광도의 비율을 측정한다. 참고 : MPO 활동은 실온에서 H 2 O에 H 2 O 2의 1 μmol / 분 분해 효소의 양으로 정의하고, 조직의 MG 당 단위로 표현된다. </li></ol>

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	<li>Per&#353;e, M., Cerar, A., Biotechnol, J. .. . B. i. o. m. e. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. , (2012).</li><li>Ghia, J. E., Blennerhassett, P., Deng, Y., Verdu, E., Khan, W., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+inflammatory+bowel+disease+in+a+mouse+model+of+depression.">Reactivation of inflammatory bowel disease in a mouse model of depression.</a> Gastroenterology. 136 (7), 2280-2288 (2009).</li><li>Reber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+animal+models+of+inflammatory+bowel+disease-an+update+on+the+role+of+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis.">Stress and animal models of inflammatory bowel disease-an update on the role of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Psychoneuroendocrinology. 37 (1), 1-19 (2012).</li><li>Qiu, B., Vallance, B., Blennerhassett, P., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CD4++lymphocytes+in+the+susceptibility+of+mice+to+stress-induced+reactivation+of+experimental+colitis.">The role of CD4+ lymphocytes in the susceptibility of mice to stress-induced reactivation of experimental colitis.</a> Nat. Med. 5 (10), 1178-1182 (1999).</li><li>Boyer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myenteric+plexus+injury+and+apoptosis+in+experimental+colitis.">Myenteric plexus injury and apoptosis in experimental colitis.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 117 (1), 41-53 (2005).</li><li>Saunders, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenergic+and+cholinergic+neural+pathways+mediate+stress-induced+reactivation+of+colitis+in+the+rat.">Noradrenergic and cholinergic neural pathways mediate stress-induced reactivation of colitis in the rat.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 124 (1-2), 56-68 (2006).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+inhibitor+I+reduces+colon+injury+caused+by+dinitrobenzene+sulphonic+acid+in+the+rat.">Calpain inhibitor I reduces colon injury caused by dinitrobenzene sulphonic acid in the rat.</a> Gut. 48 (4), 478-488 (2001).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+reduces+dinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+colitis.">Melatonin reduces dinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis.</a> J. Pineal Res. 30 (1), 1-12 (2001).</li><li>Innis, S., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+lipids+in+early+development+and+intestinal+inflammatory+disease.">Dietary lipids in early development and intestinal inflammatory disease.</a> Nutr. Rev. 65, S188-S193 (2007).</li><li>Innis, S. M., de La Presa Owens, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fatty+acid+composition+in+pregnancy+alters+neurite+membrane+fatty+acids+and+dopamine+in+newborn+rat+brain.">Dietary fatty acid composition in pregnancy alters neurite membrane fatty acids and dopamine in newborn rat brain.</a> J. Nutr. 131 (1), 118-122 (2001).</li><li>Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mundra+H.,Innis+S.M.+Intestinal+responsiveness+to+experimental+colitis+in+young+rats+is+altered+by+maternal+diet.">Mundra H.,Innis S.M. Intestinal responsiveness to experimental colitis in young rats is altered by maternal diet.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 289, 13-20 (2005).</li><li>Sanovic, S., Lamb, D. P., Blennerhassett, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Damage+to+the+enteric+nervous+system+in+experimentalcolitis.">Damage to the enteric nervous system in experimentalcolitis.</a> Am. J. Pathol. 155 (4), 1051-107 (1999).</li><li>Vilaseca, J., Salas, A., Guarner, F., Rodriguez, R., Martinez, M., Malagelada, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fish+oil+reduces+progression+of+chronic+inflammatory+lesions+in+a+rat+model+of+granulomatous+colitis.">Dietary fish oil reduces progression of chronic inflammatory lesions in a rat model of granulomatous colitis.</a> Gut. 31, 539-544 (1990).</li><li>Andoh, A., Tsujikawa, T., Ishizuka, I., Araki, Y., Sasaki, M., Koyama, S., Fujiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-3+fatty+acid-rich+diet+prevents+early+response+of+interleukin-6+elevation+in+trinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+enteritis.">N-3 fatty acid-rich diet prevents early response of interleukin-6 elevation in trinitrobenzene sulfonic acid-induced enteritis.</a> Int. J. Mol. Med. 12, 721-725 (2003).</li><li>Barros, K. V., Xavier, R. A., Abreu, G. G., Martinez, C. A., Ribeiro, M. L., Gambero, A., Carvalho, P. O., Nascimento, C. M., Silveira, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soybean+and+fish+oil+mixture+increases+IL-10,+protects+against+DNA+damage+and+decreases+colonic+inflammation+in+rats+with+dextran+sulfate+sodium+(DSS)+colitis.">Soybean and fish oil mixture increases IL-10, protects against DNA damage and decreases colonic inflammation in rats with dextran sulfate sodium (DSS) colitis.</a> Lipids Health Dis. 9, 68 (2010).</li><li>Hekmatdoost, A., Wu, X., Morampudi, V., Innis, S. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+oils+modify+the+host+immune+response+and+colonic+tissue+damage+following+Citrobacter+rodentium+infection+in+mice.">Dietary oils modify the host immune response and colonic tissue damage following Citrobacter rodentium infection in mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 304 (10), 917-928 (2013).</li><li>Innis, S. M., Dai, C., Wu, X., Buchan, A. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perinatal+lipid+nutrition+alters+early+intestinal+development+and+programs+the+response+to+experimental+colitis+in+young+adult+rats.">Perinatal lipid nutrition alters early intestinal development and programs the response to experimental colitis in young adult rats.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 299 (6), 1376-1385 (1152).</li></ol>

저자는 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

이 프로토콜에서 설명 DNBS 모델은 IBD의 다양한 양상을 연구하기 위해 이용 될 수있는 귀중한 저렴하고 재현성 대장염 모델이다. 쥐나 생쥐로 직장 내 투여시, DNBS는 다형 핵 세포의 전층 침투하고 지배적 인 NF-κB 의존 TH1 활성화 등의 다양한 조직 학적 기능의 측면에서 인간의 크론 병을 닮은, 대장에 염증과 조직 손상의 상당한 정도를 유도한다. 이 모델은 스트레스, 우울증, ...

염증성 장 질환 (IBD)은 설사, 체중 감량 및 복부 통증의 증상의 결과, 위장 (GI) 관에 만성 재발 성 염증에 의해 특징된다. 궤양 성 대장염 (UC) 및 크론 병 (CD)은 IBD의 두 가지 주요 형태이며, 위장관 내에 염증의 위치에 의해 구별 될 수있다. UC 환자에서 염증은 일반적으로 항문을 포함하고 단지 표면 점막에 영향을 미치는 변수 범위에 대한 결장까지 연속적으로 연장된다. 그것은 주로 회장 및 맹장 영향을 미치지 만 대조적으로, CD는, GI 트랙트의 어떤 부분에 영향을 미칠 수있다. 전층 염증이 자주 육아종과 연관 (fistulizing) 질병을 협착 (fibrostenotic) 및 / 또는 관통 선도로 CD가 자주 나타난다. IBD의 원인이 애매 남아 있지만, 잘 IBD는 호스트 사이의 면역 체계, 유전 적 감수성과 respon을 상호 작용을 포함, 인성 것을 허용한다환경과 미생물 요인 SES. 현재까지, IBD의 다른 모델은 UC와 CD의 특성 다양한 임상 조직 학적 및 면역 반응을 표시하는 제안되었다. 가장 일반적으로 사용되는 모델은 유전자 변형 마우스 (IL-2, IL-10, SAMP / YIT), 감염에 의한 모델 (시트로 박터의 rodentium, 살모넬라 티피 뮤 리움), 입양 전송 모델 (CD45 + RB 고, SCID 마우스에 CD62L + 셀 전송)를 포함하고 화학적으로 유도 된 대장염 모델 (덱스 트란 황산 나트륨 (DSS), 트리니트로 벤젠 술폰산 (TNBS), 및 니트로 벤젠 설 폰산 (DNBS)). 그들의 낮은 비용과 질병의 급속한 발병으로 인해, 화학 모델은 IBD의 다양한 측면의 연구에 매우 중요한 것으로 간주됩니다. 열거 된 화학 대장염 모델의 각 IBD에 자신의 임상 면역 학적 및 조직 병리학 적 관련의 몇 가지 측면에서 이점뿐만 아니라 제한 사항이 있습니다. DSS는 대장균을 유도하기 위해 사용하는 가장 일반적인 화학적 방법 중 하나이다설치류 1 TIS. 3~10%의 DSS (MW : 42 kDa의)의 관리 생쥐의 마시는 물에 7 ~ 10 일 증상 및 체중 감소, 피로, 설사, 대장 단축, 점막 궤양 및 호중구의 침윤을 포함하여 대장염의 증상을 유도 할 수있다. 이 모델은 약물 검사 연구뿐만 아니라 상피 재생, 점막 항상성에 대한 선천성 면역의 영향과 장 발육과 선암의 개발을 촉진하는 염증의 역할의 메커니즘을 탐구에 특히 유용합니다. 약간의 정도, 범위의 변화의 결과로 다른 동물 시설 대장염을 유도하기 위해 필요한 DSS의 농도뿐만 아니라, 마우스로 일관성이 물을 흡수의 변화 및 ​​DSS에 따라서 일관성 노출을 포함하여 DSS 모델과 단점, 그리고 그러나이있다 대장의 점막 손상과 궤양의 유통. 이러한 모든 기능은 결과의 이질성으로 이어질 연구 FR을 통해 결과를 비교 할 수있는 능력을 제한톰 다른 연구 그룹. DSS 모델에 대한 대안은 대장염의 합텐 유도 DNBS 또는 TNBS 모델입니다. 이 모델은 점막이 에이전트 DNBS 또는 에탄올의 농도 변화에 희석 TNBS를, 민감의 직장 점안을 사용합니다. 에탄올의 투여는 고유 층에 DNBS 또는 TNBS의 침투를 허용하는 대장 점막 장벽을 깰 수있는 필수 조건이다. DNBS / TNBS는 이에 타고난 호스트 및 적응 면역 반응을 유발, 면역 원성이 될 지역화 대장과 장내 미생물의 단백질을 haptenize됩니다. 일반적으로,이 모델은 심각하고 때때로 혈변, 체중 감소 및 장 벽 비후 그러나 증상 사용 설치류의 종류뿐만 아니라, 타이밍, 도즈 및 DNBS 노출 또는 사용될 TNBS의 정도에 따라 변화와 관련된 연구. 쥐와 생쥐 사이에는 중요한 차이는 낮은 구매 및 보드에 대한 비용뿐만 아니라 로우의 장점과 함께 주목해야한다생체 내에서 치료의 당 동물의 비용을 절감하기위한 R 체질량. 이것은 더 연약하고 반응하는 동물은 신속하게 인도적인 엔드 포인트에 도달 할 수 있습니다 생쥐 대장염의보다 신속하고 심한 코스에 대해 설정해야합니다. 장 염증은 초기에 증가 된 상피 투과성, 점막에 미생물 침투, 호스트 단백질의 haptenization, 손상된 점막에 호중구, 대 식세포 및 TH1 T 림프구의 침윤의 결과로이 모든 선도, 장 상피 세포에 에탄올에 의한 손상을 초래한다. DNBS 비교하여, TNBS은 나트륨 및 수산화 칼륨 등의 염기와 접촉시 폭발의 위험을 초래할 수있는 고도의 산화 특성에 의한 유해 화학 물질로 간주된다. 따라서 DNBS 현재 대장염을 유도하는 TNBS를 통해 화학 물질의 선호하는 선택으로 간주된다. 설치류에서 DNBS 대장염은 FOLLO을 연구하는 가장 편리한 방법 중 하나로서 간주됩니다날개 IBD는 질병의 수정을 관련 : <ol><li> 우울증과 대장염의 재 활성화 : 그것은 IBD 환자의 스트레스, 불안과 우울증이 자주 질병의 재발과 연관된 것으로 나타났습니다. DNBS 대장염은 생쥐에서 대장염의 재 활성화에 우울증과 그 결과의 역할을 연구하기에 적합한 모델입니다. 이 방법은 일반적으로 6-8주에 마우스를 떠남 대장염의 해상도에 따라 DNBS하여 대장염의 초기 유도를 포함한다. 마우스는 다음 DNBS 2 subcolitic 용량과 도전을 통해 대장염의 활성화를 위해 그들을 테스트하여 다음에 우울증을 유발하는 등 레 세르 핀 우울증의 원인이 에이전트 또는 후각 bulbectomy에 의해 관리됩니다. </li><li> 스트레스와 대장염의 재 활성화 : 스트레스는 IBD의 발병에 연결되어 있습니다 또 다른 일반적인 환경 요인이다. 만성 스트레스와 설치류의 UC 및 CD의 증상의 발병 사이에 강한 연관 관계를 제안 증거의 성장 몸이있다인간과 인간이 아닌 영장류 3뿐만 아니라의. DNBS 대장염은 마우스 및 쥐 모두에서 대장염의 스트레스 관련 재활을 연구하는 좋은 모델입니다. 방법은 일반적으로 우울증 대신 제외 우울증에 대한 전술 한 바와 같이 유사한 방식으로 사용되며, 동물 등 음파와 구속 스트레스 4와 같은 스트레스에 노출된다. </li><li> 신경성 염증 : 다수의 연구는 동물 모델에서와 IBD 환자에서 조직 샘플에서 볼 수있는 것처럼 장용 신경계 (ENS)의 구조와 기능에 일시적 또는 영구적 인 변화 중 하나를 설명했다. DNBS는 ENS 5에 염증의 효과를 탐구 및 노르 아드레날린 및 콜린성 신경 경로 6을 모두 연구하는 좋은 모델입니다. </li><li> 부상 복구 메커니즘 : IBD 병인 동안, 반응성 산소 종 (ROS), 산화 질소 (NO), 간 부착 분자 3 (ICAM-3), 및 P-셀렉틴과 같은 숙주 유래 부상 매개체는 모두 P 보여왔다장 상피 중단하는 역할을 놓는다. DNBS은 이러한 매개체의 최대 규제뿐만 아니라 선택적인 약물이나 억제제 7,8를 사용하여 규제 수리 메커니즘에 의한 부상을 연구 할 수있는 좋은 모델입니다. </li><li> 전층 염증 : DNBS의 상술 한 애플리케이션 외에, 모델은 창자의 전층 염증, CD 환자에서 발견 고전 기능을 연구하기 위해 적용될 수있다. DNBS 및 TNBS 유도 대장염은 모두 T 세포 의존성 면역 메커니즘을 연구하는이 모델은 특히 유용하고 대장 점막에, 림프구의 중요한 침투와 연관되어 있습니다. </li></ol> DSS 모델과 비교, DNBS 및 TNBS 유도 대장염의 장점은 저렴한 비용으로, 대장염의 급속한 발전 (일반적으로 재현 궤양과 염증을 보여 1-3 일이 필요) 원위 결장 일관성 지역화 손상이 (가) 있습니다. 그러나 단점에 대한 요구 사항입니다전문 기술, DNBS / TNBS 투여 량의 최적화 및 직장 투여에 대한 마취의 필요성을 높은 수준. 이 방법론 논문에서는 (SO) 식물성 오일 잇꽃 오일을 사용한 쥐 DNBS 유도 대장염 결장 점막 반응을 변화에 N-10 및 N-3 고도 불포화 지방산의 다양한 농도의 효과를 연구 및 카놀라유 (CO) , 생선 오일 (FO). 그것은 N-10 및 N-3 지방산은 세포막의 인지질 9의 아실 잔기로서의 역할을 통해 장 염증성 질환의 중요한 매개체임을 보여왔다. N-6 지방산의 염증성 전위 달리, 충분히 높은 흡기에서 N-3 지방산은 잠재적으로 강력한 항 - 염증제이다. N-3 지방산의 항염증제 동작은 proinfl의 변조를 통해 간접적으로 아라키돈 산 대사 억제, 코사 노이드 기질로서 아라키돈 산의 보충을 통해 직접 매개 아르ammatory 유전자 발현 및 세포 신호. N-3 지방산은 또한, resolvins에 항 염증 매개체의 가족을 일으키다. N-3 지방산의 섭취는 염증성 에이코 사 노이드, 사이토 카인, 케모카인, 반응성 산소 종 및 부착 분자의 발현의 생산량의 감소와 연관된다. 이 연구에서, 쥐와, 지방산을 제외한 모든 영양소에서 동일 임의로 사료를 먹였다 지방 20 %, SO, 20 % CO, 또는 18 %의 생선 기름 플러스 2 % 홍화 오일 (FO) 10-11에서 %의 에너지로 . 매일 에너지의 비율로, SO 식단 &lt;0.06 %의 α-리놀렌산 (ALA)없이 에이코 사 펜타 엔 산 (EPA) 또는 도코 사 헥사 엔 산 (DHA)으로, 15 % 리놀레산 (LA)를 제공, CO 다이어트 4.2했다 % LA 1.9 % ALA없는 EPA 또는 DHA와, 그리고 FO 다이어트 1.4 % EPA, DHA 4.9 %, 0.32 % LA, 0.12 % ALA를 제공했다. 3 주 지질 다이어트의 개시 후, 마우스는 직장 내 DNBS 또는 50 % 에탄올을 투여 5 일 후 희생되었다. inflammatory 응답은 체중 감소, 조직 학적 손상 점수 및 티슈 마이 엘 로퍼 옥시 다제 활성의 평가에 의해 평가 하였다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="627">
	<colgroup>
		<col />
		<col /> 
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">1 mL syringe</td>
			<td style="width:121px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"> </td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">19 gauge needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>305187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-50</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427517</td>
			<td>for intra-rectal administration in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-90</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427519</td>
			<td>for intra-rectal administration in rat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNBS</td>
			<td>MP Bio</td>
			<td>150959</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">tear gel</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>63601662596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Formalin</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>5F93-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>TPZ-0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A-962.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">hexadecyltrimethyl-ammonium bromide</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>H5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium phosphate buffer solution</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>79628-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">O-dianisidine dihydrochloride</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>D3252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">30% H2O2</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>31642</td>
			<td>hydrogen peroxide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spectrophotometer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>Benchmarker Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Image.Z1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Data analysis software program </td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td style="width:119px;"> GraphPad Prism Software Version 4.00 </td>
			<td><a href="http://www.graphpad.com/">San Diego California USA, www.graphpad.com</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat

크론 병 및 궤양 성 대장염 등의 염증성 장 질환 (IBD)는, 긴 유전 적 기초와 연결되었습니다, 그리고 더 최근의 미생물 및 환경 에이전트에 면역 반응을 개최했다. 디 니트로 벤젠 술폰산 (DNBS) 유도 성 대장염 하나는 스트레스와 다이어트, 잠재적 인 치료의 효과 및 기전 장내 염증과 점막 손상으로 IBD 관련 환경 트리거의 발병 기전을 연구 할 수 있습니다. 이 논문에서, 우리는 쥐의 DNBS 유도 대장염 대장 점막의 염증 반응에 대한식이 N-3, N-6 지방산의 효과를 조사 하였다. 모든 래트 [홍화유 (SO), 카놀라유 (CO), 또는 어유 (FO)], 셋째 주 전에 노광 DNBS을 직장 내하는 지방산의 다른 유형의 예외와 동일한 규정 식을 공급 하였다. 직장 내 에탄올 주어진 대조군은 DNBS 처리 쥐, 반면 공급 지질 다이어트 모든 로스, 5 일간의 공부에 무게를 얻고 계속FO 및 CO 쥐에 투여 한 48 시간과 72 시간으로 SO 쥐에 투여에 의해 유의 한 체중 감소를 보여 가진 t 무게. 체중 증가는 72 시간 포스트 DNBS 후 재개, 5 일 포스트 DNBS에 의해, FO 그룹은 SO 또는 CO 그룹보다 높은 체중을 가지고 있었다. 대장 섹션은 5 일 포스트 DNBS 처리가 초점 궤양, 토굴 파괴, 술잔 세포 고갈, 다이어트 그룹 사이 정도에 차이 급성 및 만성 염증 세포의 점막 침윤을 보였다 수집. SO 공급 그룹 CO 뒤에 가장 심각한 손상을 보였고, FO는 조직 손상의 온화한 정도를 보여 개 먹이. 마찬가지로, 대장 폐장 내 myeloperoxidase (MPO) 활동, 호중구 활동의 마커 FO 공급 쥐가 상당히 낮은 MPO 활성을 갖는, SO CO 먹인 쥐 다음에 유의하게 높았다. IBD의 병인에서 다이어트의 영향을 결정하기 위해,이 프로토콜에 기술 된 이러한 결과는, DNBS 유도 된 대장염의 사용을 보여준다.

DNBS 쥐 (스프 라그 - 돌리) 또는 마우스 (C57BL / 6)의 도전은 일반적으로 때로는 대변에 혈액의 존재와, 일시적인 체중 감소와 설사가 발생합니다. 그러나, 유전,식이 요법과 장내 미생물 등의 요인이 DNBS 유도 성 대장염에 대한 감수성을 수정할 수 있습니다. 따라서 동물 실험에 포함 된 로컬 파생 또는 동물의 공급 업체로부터의 주문도, 같은 기관에서해야한다. 모든 동물은 신중하게 체중 감량 및 ?...

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DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat

DNBS / TNBS 유도 대장염은 다른 염증성 장 질환의 한테 진찰 Pathobiology을 연구하는 저렴한 방법을 제공합니다. 이 문서에서 설명하는 프로토콜은 생쥐와 쥐 대장염을 유도하는 DNBS의 성공적인 응용 프로그램을 설명 하나는 철저하게 호스트 매개 장 반응을 연구 할 수 있습니다.

DNBS / TNBS 대장염 모델 : 염증성 장 질환에 대한 통찰력과식이 지방의 효과를 제공

Inflammatory Bowel Diseases (IBD), including Crohn&#39;s Disease and Ulcerative Colitis, have long been associated with a genetic basis, and more recently ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

46.8K 조회수.  BC Children's Hospital.  DNBS / TNBS 유도 대장염은 다른 염증성 장 질환의 한테 진찰 Pathobiology을 연구하는 저렴한 방법을 제공합니다. 이 문서에서 설명하는 프로토콜은 생쥐와 쥐 대장염을 유도하는 DNBS의 성공적인 응용 프로그램을 설명 하나는 철저하게 호스트 매개 장 반응을 연구 할 수 있습니다. 

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Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues as well as altered cytokine homeostasis. The innate immune system plays a crucial role in recognizing pathogens and other endogenous danger stimuli. One of the major cytokines released by innate immune cells is Interleukin (IL)-1. Therefore, we utilize a whole blood stimulation assay in order to measure the secretion of inflammatory cytokines and specifically of the pro-inflammatory cytokine IL-1&beta; 1, 2, 3.
Patients with genetic dysfunctions of the innate immune system causing autoinflammatory syndromes show an exaggerated release of mature IL-1&beta; upon stimulation with LPS alone. In order to evaluate the innate immune component of patients who present with inflammatory-associated pathologies, we use a specific immunoassay to detect cellular immune responses to pathogen-associated molecular patterns (PAMPs), such as the gram-negative bacterial endotoxin, lipopolysaccharide (LPS). These PAMPs are recognized by pathogen recognition receptors (PRRs), which are found on the cells of the innate immune system 4, 5, 6, 7. A primary signal, LPS, in conjunction with a secondary signal, ATP, is necessary for the activation of the inflammasome, a multiprotein complex that processes pro-IL-1&beta; to its mature, bioactive form 4, 5, 6, 8, 9, 10.
The whole blood assay requires minimal sample manipulation to assess cytokine production when compared to other methods that require labor intensive isolation and culturing of specific cell populations. This method differs from other whole blood stimulation assays; rather than diluting samples with a ratio of RPMI media, we perform a white blood cell count directly from diluted whole blood and therefore, stimulate a known number of white blood cells in culture 2. The results of this particular whole blood assay demonstrate a novel technique useful in elucidating patient cohorts presenting with autoinflammatory pathophysiologies.

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&amp;#946; using a Whole Blood Stimulation Assay

We describe a simple immunoassay to measure the production of pro-inflammatory cytokines, such as IL-1 beta production, in patients presenting with autoinflammatory phenotypes. By activating cells in whole blood cultures with pathogen-associated molecular patterns, specifically with lipopolysaccharide, cytokine secretion can be conveniently evaluated in whole blood supernatants.

전체 혈액 자극 분석을 사용하여 프로 염증성 시토킨 IL - 1β의 정확하고 간단한 측정

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

연구

의학

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are associated with obesity, though the precise underlying mechanisms that contribute to the disease are currently being delineated.2,3 Several small animal models of obesity have been developed and are employed in a variety of studies.4 A critical component to these experiments involves the collection of regional and/or total animal fat content data under varied conditions.
Traditional experimental methods available for measuring fat content in small animal models of obesity include invasive (e.g. ex vivo measurement of fat deposits) and non-invasive (e.g. Dual Energy X-ray Absorptiometry (DEXA), or Magnetic Resonance (MR)) protocols, each of which presents relative trade-offs. Current invasive methods for measuring fat content may provide details for organ and region specific fat distribution, but sacrificing the subjects will preclude longitudinal assessments. Conversely, current non-invasive strategies provide limited details for organ and region specific fat distribution, but enable valuable longitudinal assessment. With the advent of dedicated small animal X-ray computed tomography (CT) systems and customized analytical procedures, both organ and region specific analysis of fat distribution and longitudinal profiling may be possible. Recent reports have validated the use of CT for in vivo longitudinal imaging of adiposity in living mice.5,6 Here we provide a modified method that allows for fat/total volume measurement, analysis and visualization utilizing the Carestream Molecular Imaging Albira CT system in conjunction with PMOD and Volview software packages.

Fat content analysis is routinely conducted in studies utilizing murine obesity models. Emerging methods in small animal CT imaging and analysis are providing for longitudinal detail rich fat content analysis. Here we detail step by step procedures for performing small animal CT imaging, analysis, and visualization.

세분화 및 Murine 비만 모델에서 지방 볼륨 측정 X 선 계산된 Tomography를 사용하여

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson's Disease

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease (PD) pathogenesis are less understood. Gene-environment interaction models have utility in unmasking the impact of specific cellular pathways in toxicity that may not be observed using a solely genetic or toxicant disease model alone.&#160;To evaluate if distinct LOX isozymes selectively contribute to PD-related neurodegeneration, transgenic (i.e. 5-LOX and 12/15-LOX deficient) mice can be challenged with a toxin that mimics cell injury and death in the disorder.&#160;Here we describe the use of a neurotoxin, 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP), which produces a nigrostriatal lesion to elucidate the distinct contributions of LOX isozymes to neurodegeneration related to PD. The use of MPTP in mouse, and nonhuman primate, is well-established to recapitulate the nigrostriatal damage in PD.&#160;The extent of MPTP-induced lesioning is measured by HPLC analysis of dopamine and its metabolites and semi-quantitative Western blot analysis of striatum for tyrosine hydroxylase (TH), the rate-limiting enzyme for the synthesis of dopamine. To assess inflammatory markers, which may demonstrate LOX isozyme-selective sensitivity, glial fibrillary acidic protein (GFAP) and Iba-1 immunohistochemistry are performed on brain sections containing substantia nigra, and GFAP Western blot analysis is performed on striatal homogenates.&#160;This experimental approach can provide novel insights into gene-environment interactions underlying nigrostriatal degeneration and PD.

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson&#039;s Disease

Lipoxygenase (LOX) isozymes can generate products that may increase or decrease neuroinflammation and neurodegeneration.&#160;A gene-environment interaction study could identify LOX isozyme-specific effects. Using the 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) model of nigrostriatal damage in two LOX isozyme-deficient transgenic lines allows for comparison of the contribution of LOX isozymes on dopaminergic integrity and inflammation.

파킨슨 병에서 감수성 메커니즘을 마스크를 해제하는 유전자 환경 상호 작용 모델

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the functions of proteins involved in oncogenic progression or help to discover new tumor suppressors. In addition, injecting cancer cells into mice with different genotypes might provide a better understanding of the importance of the stromal compartment. Many models may be useful to investigate certain aspects of disease progression but do not recapitulate the entire cancerous process. In contrast, breast cancer cells engraftment to the mammary fat pad of mice better recapitulates the location of the disease and presence of the proper stromal compartment and therefore better mimics human cancerous disease. In this article, we describe how to implant breast cancer cells into mice orthotopically and explain how to collect tissues to analyse the tumor milieu and metastasis to distant organs. Using this model, many aspects (growth, angiogenesis, and metastasis) of cancer can be investigated simply by providing a proper environment for tumor cells to grow.

Cancer is a complex disease that is influenced by the tissue surrounding the tumor as well as local pro- and anti-inflammatory mediators. Therefore, orthotropic injection models, rather than subcutaneous models may be useful to study cancer progression in a manner that better mimics human pathology.

마우스의 유방 지방 패드에 유방암 세포의 소성 주입은 종양의 성장을 연구한다.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft tissue filler as it is readily available, easily obtained, inexpensive, and inherently biocompatible.1 However, despite its burgeoning popularity, fat grafting is hampered by unpredictable results and variable graft survival, with published retention rates ranging anywhere from 10-80%. 1-3
To facilitate investigations on fat grafting, we have therefore developed an animal model that allows for real-time analysis of injected fat volume retention. Briefly, a small cut is made in the scalp of a CD-1 nude mouse and 200-400 &#181;l&#160;of processed lipoaspirate is placed over the skull. The scalp is chosen as the recipient site because of its absence of native subcutaneous fat, and because of the excellent background contrast provided by the calvarium, which aids in the analysis process. Micro-computed tomography (micro-CT) is used to scan the graft at baseline and every two weeks thereafter. The CT images are reconstructed, and an imaging software is used to quantify graft volumes.
Traditionally, techniques to assess fat graft volume have necessitated euthanizing the study animal to provide just a single assessment of graft weight and volume by physical measurement ex vivo. Biochemical and histological comparisons have likewise required the study animal to be euthanized. This described imaging technique offers the advantage of visualizing and objectively quantifying volume at multiple time points after initial grafting without having to sacrifice the study animal. The technique is limited by the size of the graft able to be injected as larger grafts risk skin and fat necrosis. This method has utility for all studies evaluating fat graft viability and volume retention. It is particularly well-suited to providing a visual representation of fat grafts and following changes in volume over time.

Fat grafting is an essential technique for reconstructing soft tissue deficits. However, it remains an unpredictable procedure characterized by variable graft survival. Our goal was to devise a mouse model that utilizes a novel imaging method to compare volume retention between differing techniques of fat graft preparation and delivery.

마이크로 컴퓨터 단층 촬영과 누드 마우스에 인간의 지방 주입의 생존 능력의 평가

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Therapeutic Effectiveness of a Dietary Supplement for Management of Halitosis in Dogs

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized placebo-controlled crossover clinical evaluation, we assessed&#160;the effectiveness of a dedicated dietary supplement to improve chronic halitosis in 32 dogs of different breeds and ages. This protocol describes how to evalute the presence of oral volatile suphur compunds, e.g. methyl mercaptan, hydrogen sulfide and dimethyl sulfide, by means of a portable gas chromatograph device coupled with a syringe, which was used to collect the breath, and a dedicated software, which allows the operator to monitor each compound concentration during each measurement, in a relatively short time (8 min).
A significant modification of halitosis parameters was observed after 30 days since the beginning of treatment (p &#60;0.05), while a long-lasting effect was still observed even 20 days after the suspension of the treatment. Portable gas chromatograph, which is also widely used in clinical practice, can be therefore used to confirm&#160;and control halitosis in humans and animals. Even though human and animal species present some differences,&#160;this innovative and alternative therapy for halitosis management might be extended to human clinical practice as an adjuvant dietary approach.

We describe a simple approach for diagnosis of halitosis in dogs as well as a dietary approach for its management. This protocol may be extended to the management of halitosis in humans in the near future.

개에서 구취 관리를위한 건강 기능 식품의 치료 효과

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to induce reflux of gastric contents, duodenal contents or mixed contents. Surgical procedures and general principles have been described in detail. A researcher with surgical experience should be able to grasp the technique after a short period of practice. After surgery, most mice can survive and develop reflux esophagitis similar to that in humans. However, it should be noted that histological differences between mouse and human esophagus are the inherent limitations of these surgical models. If used for research on Barrett&#8217;s esophagus and adenocarcinoma, these procedures may need to be combined with genetic modifications.

This article demonstrates surgical procedures of gastroesophageal reflux with mice. These models are useful tools for research on mechanisms and treatment of gastroesophageal reflux disease and potentially Barrett&#8217;s esophagus and esophageal adenocarcinoma.

마우스와 위식도 역류의 외과 모델

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying tissue compartments, restricting the transport of smaller molecules across the epithelium and almost completely prohibiting epithelial macromolecular transport. This selectivity is determined by the mucous gel layer, which limits the transport of lipophilic molecules and both the apical receptors and tight junctional protein complexes of the epithelium. In vitro cell culture models of the epithelium are convenient, but as a model, they lack the complexity of interactions between the microbiota, mucous-gel, epithelium and immune system. On the other hand, in vivo assessment of intestinal absorption or permeability may be performed, but these assays measure overall gastrointestinal absorption, with no indication of site specificity. Ex vivo permeability assays using &#34;intestinal sacs&#34; are a rapid and sensitive method of measuring either overall intestinal integrity or comparative transport of a specific molecule, with the added advantage of intestinal site specificity. Here we describe the preparation of intestinal sacs for permeability studies and the calculation of the apparent permeability (Papp) of a molecule across the intestinal barrier. This technique may be used as a method of assessing drug absorption, or to examine regional epithelial barrier dysfunction in animal models of gastrointestinal disease.

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

This protocol describes the use of excised intestinal tissue preparations or "intestinal sacs" as an ex vivo model of intestinal barrier function. This model may be used to assess integrity of both the epithelial barrier and the mucous gel layer at specific intestinal sites in animal models of digestive disease.

예 생체 내 창자 주머 니나는 위장 질환 모델에서 점막 투과성을 평가하는

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic transplantation of ovarian surface and tubal epithelia include intraperitoneal and intrabursal administration of cells. The respective limitations of these methods include poorly defined location of injected cells and limited space volume. Furthermore, they are poorly suited for long-term structural preservation of transplanted organs. To address these challenges, we have developed an alternative approach, which is based on the introduction of cells and tissue fragments into the mouse fat pad. The mouse ovarian fat pad is located in the immediate vicinity of the ovary and uterine tube (aka oviduct, fallopian tube), and provides a familiar microenvironment for cells and tissues of these organs. In our approach fluorescence-labeled mouse and human cells, and fragments of the uterine tube are engrafted by using minimally traumatic dorsal incision surgery. Transplanted cells and their outgrowths are easily located in the ovarian fat pad for over 40 days. Long-term transplantation of the entire uterine tube allows correct preservation of all principle tissue components, and does not result in adverse side effects, such as fibrosis and inflammation. Our approach should be uniquely applicable for answering important biological questions such as differentiation, regenerative and neoplastic potential of specific cell populations. Furthermore, it should be suitable for studies of microenvironmental factors in normal development and cancer.

We describe an ovarian fad pad transplantation assay suitable for studies of normal and transformed epithelia of the female reproductive tract. The mouse fat pad allows transplantation of large tissue fragments, is easily accessible for surgery and imaging, and provides the most favorable native environment for tissues of M&#252;llerian origin.

마우스 난소 지방 패드 속으로 이식

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Analyzing Beneficial Effects of Nutritional Supplements on Intestinal Epithelial Barrier Functions During Experimental Colitis

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause severe problems, such as abdominal cramping, bloody diarrhea, and weight loss, in affected individuals. Unfortunately, there is no cure yet, and treatments only aim to alleviate symptoms. Current treatments include anti-inflammatory and immunosuppressive drugs that may cause severe side effects. This warrants the search for alternative treatment options, such as nutritional supplements, that do not cause side effects. Before their application in clinical studies, such compounds must be rigorously tested for effectiveness and security in animal models. A reliable experimental model is the dextran sulfate sodium (DSS) colitis model in mice, which reproduces many of the clinical signs of ulcerative colitis in humans. We recently applied this model to test the beneficial effects of a nutritional supplement containing vitamins C and E, L-arginine, and &#969;3-polyunsaturated fatty acids (PUFA). We analyzed various disease parameters and found that this supplement was able to ameliorate edema formation, tissue damage, leukocyte infiltration, oxidative stress, and the production of pro-inflammatory cytokines, leading to an overall improvement in the disease activity index. In this article, we explain in detail the correct application of nutritional supplements using the DSS colitis model in C57Bl/6 mice, as well as how disease parameters such as histology, oxidative stress, and inflammation are assessed. Analyzing the beneficial effects of different diet supplements may then eventually open new avenues for the development of alternative treatment strategies that alleviate IBD symptoms and/or that prolong the phases of remission without causing severe side effects.

Current treatments of inflammatory bowel diseases (IBD) aim at alleviating disease symptoms but may cause severe side effects. Thus, alternative strategies are being investigated in animal colitis models. Here, we explain how the beneficial effects of diet supplements on clinical IBD signs are analyzed in such a colitis model.

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause ...