우리는 우리의 요구에 대한 추적 소프트웨어를 사용자 정의하는 Electricidade 엠 포 (electricidadeempo.net)에서 기술 지원을 다니엘 베이트와 페드로 Gouveia의 감사합니다. 우리는 또한 촬영 과정에서 지원 톰 Retzke 감사합니다. 본 연구는 막스 플랑크 협회에 의해 지원되었다.

Flywalk의 구성 및 기술 정보 (26)가 다른 장소 (MK로부터 획득 될 수 있으며,이 설정 정보를 설정하는 임의의 문제가있는 경우에) 기술되어있다. 여기에서 우리는 신뢰할 수있는 결과를 얻는 데 도움이 될 것입니다 패러다임의 취급에 대한 자세한 지침에 초점을 맞 춥니 다. 1. 플라이 처리 <ol><li> 12 시간 빛 : 23 ~ 25 ° C와 70 %의 상대 습도에서 어두운 정권 후면 12 시간에서 음식 매체 (27)에 중간 밀도 문화에 저에 날아간 다. 이를 위해, 20 ~ 30, 새롭게 등장 성인 후, 1 주에 대한 큰 식품 유리 병에 재생 성인 파리를 버리고 등장하는 자식을 기다리는 날아 수 있습니다. </li><li> 30-40 새롭게 등장 (나이 &lt;24 시간) 성인 파리를 수집 3-5 일 동안 음식 매체 (27)를 포함하는 새로운 유리 병에서 그들을에 나이. </li><li> 스물 네 시간 행동 실험을 시작하기 전에 : 이동 모든 30 ~ 40 이전에 수집 된 3-5 D 이전 (2.2 참조) 새 VI (으)로 운항하는 항공사Al을 촉촉한 고무 발포체 플러그 또는 흡입기를 사용하여 습윤 티슈를 포함. 참고 : CO 2를 사용하여 파리를 마취시키다하지 마십시오. </li></ol> Flywalk 설치 2. 준비 <ol><li> 가습기 250 ml의 병을 사용합니다. 100 ml의 증류수와 가습기를 입력합니다. </li><li> 냄새 유리 병을 준비합니다. <ol><li> 순수한 냄새 에틸 아세테이트, 에틸 부티레이트, 이소 펜틸 아세테이트 및 용매 광유 2,3- 부탄의 500 μL 10-3 희석액을 준비한다. </li><li> 냄새 유리 병 당 두 개의 볼 체크 밸브를 연결합니다. 밸브는 단방향 공기 흐름 만 허용하는지 확인합니다. 따라서, 공기가 한쪽 바이알을 입력하고, 다른 측에 둘 수있는 방식으로 체크 밸브를 연결한다. </li><li> 200 ㎕의 PCR 반응 튜브의 뚜껑을 제거한다. 별도의 반응 관에 모든 악취 희석 100 μl를 피펫과 별도의 냄새 튜브에 튜브를 배치합니다. 또한 단지 용매 미네랄 오이를 포함하는 하나의 냄새 유리 병을 준비엘. </li><li> 단단히 스테인리스 플러그와 고무 개스킷을 사용하여 폐쇄함으로써 악취 바이알을 밀봉. </li><li> 악취 전달 시스템 (광유를 함유하는 4 함유 냄새 1) 5 냄새 튜브를 연결한다. 오른쪽 흐름 방향을 연결해야합니다. 잘못된 연결은 계획된 실험을 손상하지 않을뿐만 아니라 전달 시스템을 오염시킬 수있다. </li></ol></li><li> 자극 장치의 혼합 챔버의 출구를 밀봉하여 누출을 점검한다. 자극 장치 전에 모든 공기 흐름이 지금 점진적으로 제로로 떨어질 것을 확인합니다. 그렇지 않은 경우, 지금 시스템을 떠나 공기의 치찰음의 사운드로 식별 할 수 있습니다 누출을 확인합니다. </li><li> 조심스럽게 대응하는 어댑터를 사용하여 양면에 흡입기와 가까운 유리 튜브를 사용하여 15 개별 유리 튜브에 15 개인 파리를 전송합니다. 참고 : 시스템이 밀폐 성공적인 실험을 위해 봉인해야하기 때문에, 어댑터가 단단히 유리 튜브에 맞게 보장유리 튜브는이 단계에서 중단 될 수 있습니다. 보호 장갑과 고글을 착용하여 부상을 방지하기 위해주의하십시오. </li><li> Flywalk 설정에 유리 튜브를 연결하고, 여기부터, 파리는 새로운 환경에 길들 수 있도록 실험을 시작하기 전에 적어도 15 분 동안 기다립니다. </li><li> 유리 튜브를 부착 후 : 유리 튜브 후 16 기류가 시스템에 유입되는 공기를 추가 할 경우 컴퓨터 1 하류 디지털 유량계의 판독 값을 확인. 습도가 60 %와 80 % 사이 인 경우 또한, 컴퓨터 1에 확인합니다. </li><li> 파리에 제출 냄새 자극의 순서와 타이밍을 제어 설계 자극 프로토콜. 40 회 동시에 기술 데이터, 현재 4 악취 및 단독 제어 (미네랄 오일)과 가능한 모든 원과 냄새의 4 급 혼합물 예를 들어 구하십시오. 90 초 interstimulus 간격으로 500 밀리 초에 펄스 지속 시간을 설정하고 자극 순서를 무작위로. </li><li> 리튬에 스위치GHT 소스 (LED 클러스터, λ = 630). 유리관 내부의 온도를 증가시키지 않고 효율적으로 추적을위한 충분한 빛을 제공해야합니다. </li><li> 모든 15 유리관가 포함되어있는 방법으로 모니터 할 및 튜브의 가장자리의 대략 5mm 제외 영역을 가로 질러 드래그하여 프레임 트래킹 시스템의 관심 영역을 설정한다. </li><li> 개별 유지 해당 스크립트 자신-Y 위치를 변경하여 추적 시스템에서 개별 관 (14) 사이에 병렬로 분리 라인을 설정하여 실험을하는 동안 식별 날아간다. 하나의 플라이는 두 라인 사이의 임의의 집합 추적되기 때문에, 이러한 두 분리 라인 사이 하나 유리관이 항상 존재하는 방식으로 그것들의 위치를​​ 확인. </li><li> 확실하게 유리 튜브를 통해 추적 날아 방식으로 카메라 매개 변수를 설정해야합니다. 초파리는 관심 영역의 가장자리에서 손실되는 경우, 추적 (S)의 휘도를 증가 또는 이득oftware. 추적 시스템의 기계적 진동을 피하십시오. 제조 업체의 프로토콜에 따라 상용 소프트웨어를 사용하여 추적 할 수 있습니다. </li><li> 자극 프로토콜을 시작하여 실험을 시작합니다. 기록은 20 FPS (초당 프레임)에서 XY 좌표를 flies&#39; 및 텍스트 파일의 냄새 밸브 상태와 함께 로그인합니다. </li></ol> 3. 데이터 분석 참고 :이 단계는 분석이 그럼에도 불구하고 단계별 방식으로 표시됩니다 의미있는 결과를 얻을하는 것이 중요하기 때문에 데이터 분석의 다음 단계는 알에서 프로그램 사용자가 작성한 루틴을 사용하여 자동화되어 있습니다. 분석을위한 미가공 데이터는 하나의 냄새 자극주기위한 공통 시간축상의 cm에서 냄새 밸브 상태, 펄스 수 실험 15 플라이 X-위치에 동기 정보를 포함 .CSV-파일이다. 데이터 분석을위한 사용자 정의 코드는 요청에 따라 제공 할 수있다. <ol><li> 열기 .CSV 파일, 차에 의해 표시 밸브 개방 시간 점을 찾을 수밸브 상태를 나타내는 열에 NGE. </li><li> 폼의 냄새 위치의 선형 함수를 계산할 F (t)는 S의 * (T)를 = I + t는 자극 사이클 시간이고, S는 풍속 (여기서 20cm / 초) 내가 냄새가 위치 0 (밸브 개방 플러스 지연)에서 튜브 진입 시간 포인트를 사용하여 계산 될 수있는 절편이다. </li><li> 어떤 냄새 시점을 찾아 모든 비행과 0 주이 시간에 지점을 설정하기위한 X-위치가 교차 비행 : 비행 위치가 각 individual&#39;s에 정렬이 방법은 냄새 발생합니다. </li><li> 관심 영역의 맨 가장자리에 앉아 파리를 제외합니다. </li><li> 모든 자극을주기위한 시간 간격 (100 밀리 초) 반복 과정에 의해 상기 X 축 방향의 변위를 분할하여 X-위치로부터 속력을 계산한다. </li><li> 그림 2E와 같이 모든 비행과 냄새과 특정 냄새에 대한 사람들의 평균 시간 코스에서 평균 속도 시간 코스를 계산 속도 시간 과정을 구하십시오. </li><li> 그림 3C와 같이 순 변위를 얻기 위해 모든 추적 이벤트에 대한 냄새 펄스, 그 후 파리와 냄새 당 평균 순 변위 후 4 초 이내에 순 변위를 계산합니다. </li></ol> 4. 청소 절차 <ol><li> 깨끗한 유리 튜브 <ol><li> 유리 튜브에서 파리와 어댑터를 제거하고 세제를 유리 튜브를 흡수. </li><li> 실행 증류수에서 유리 튜브를 씻어 압축 공기를 사용하여 건조. </li><li> 8 시간 동안 200 ℃에서 가열 유리관. </li></ol></li><li> 청소 냄새 전달 시스템 <ol><li> 중앙 혼합 실에서 모든 냄새 튜브 및 튜브를 제거합니다. </li><li> 혼합 챔버에서 튜브 어댑터를 제거합니다. </li><li> 실험실 세정 용액과 용매 (예 : 에탄올, 아세톤)로 세정하여 클린 혼합 챔버. 실험실 후드에서 다음 단계를 수행합니다. </li><li> 건식 혼합 챔버 8 시간 동안 200 ° C에 그것을 가압 공기를 이용하여 가열한다. </li></ol></li><li> 청소 냄새 유리 병과 체크 밸브 <ol><li> 스틸 플러그 (폐기 고무 가스켓)를 제거하고 냄새 유리 병에서 밸브를 확인하고 실험실 청소 솔루션의 모든 구성 요소를 흡수. </li><li> 초음파 목욕 초음파 처리 구성 요소와 증류수를 씻어. </li><li> 에탄올, 아세톤 체크 밸브를 제외한 모든 구성 요소를 청소합니다. 실험실 후드에서 다음 단계를 수행합니다. </li><li> 및 압축 된 공기를 이용하여 건조 성분은 8 시간 동안 200 ℃에서 이들을 가열한다. </li><li> 에탄올과 주사기를 사용하여 아세톤으로 세척하여이를 내부 청결 체크 밸브 (흐름 방향을 고려). 실험실 고글을 착용 실험실 후드 아래 다음 단계를 수행합니다. 아세톤은 압축 공기를 세척 즉시 고무 부품, 건조 체크 밸브를 공격하기 때문에. </li><li> 며칠 동안 체크 밸브를 통해 공기를 펄스에 의해 잔여 냄새를 제거합니다. 이 세척 단계에 정권 온 / 오프 1 초 공기에 60 ° C에서 인큐베이터와 1 초 공기를 사용합니다. </li></ol&gt; </li></ol>

<ol>
	<li>Murlis, J., Elkinton, J. S., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+plumes+and+how+insects+use+them.">Odor plumes and how insects use them.</a> Annu. Rev. Entomol. 37, 505-532 (1992).</li><li>Kennedy, J. S., Marsh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pheromone-regulated+anemotaxis+in+flying+moths.">Pheromone-regulated anemotaxis in flying moths.</a> Science. 184 (4140), 999-1001 (1974).</li><li>Budick, S. A., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free-flight+responses+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors.">Free-flight responses of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> J. Exp. Biol. 209 (15), 3001-3017 (2006).</li><li>Buehlmann, C., Graham, P., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desert+ants+locate+food+by+combining+high+sensitivity+to+food+odors+with+extensive+crosswind+runs.">Desert ants locate food by combining high sensitivity to food odors with extensive crosswind runs.</a> Curr. Biol. 24 (9), 960-964 (2014).</li><li>Van Breugel, F., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plume-tracking+behavior+of+flying+Drosophila+emerges+from+a+set+of+distinct+sensory-motor+reflexes.">Plume-tracking behavior of flying Drosophila emerges from a set of distinct sensory-motor reflexes.</a> Curr. Biol. 24 (3), 274-286 (2014).</li><li>Schuckel, J., Meisner, S., Torkkeli, P. H., French, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+properties+of+Drosophila+olfactory+electroantennograms.">Dynamic properties of Drosophila olfactory electroantennograms.</a> J. Comp. Physiol. A. 194 (5), 483-489 (2008).</li><li>Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+encoding+of+rapidly+fluctuating+odors.">Neural encoding of rapidly fluctuating odors.</a> Neuron. 61 (4), 570-586 (2009).</li><li>Nagel, K. I., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biophysical+mechanisms+underlying+olfactory+receptor+neuron+dynamics.">Biophysical mechanisms underlying olfactory receptor neuron dynamics.</a> Nat. Neurosci. 14 (2), 208-216 (2011).</li><li>Martelli, C., Carlson, J. R., Emonet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensity+invariant+dynamics+and+odor-specific+latencies+in+olfactory+receptor+neuron+response.">Intensity invariant dynamics and odor-specific latencies in olfactory receptor neuron response.</a> J. Neurosci. 33 (15), 6285-6297 (2013).</li><li>Szyszka, P., Gerkin, R. C., Galizia, C. G., Smith, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+odor+transduction+and+pulse+tracking+by+insect+olfactory+receptor+neurons.">High-speed odor transduction and pulse tracking by insect olfactory receptor neurons.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 111 (47), 16925-16930 (2014).</li><li>Nagel, K. I., Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+and+circuit+mechanisms+promoting+broadband+transmission+of+olfactory+stimulus+dynamics.">Synaptic and circuit mechanisms promoting broadband transmission of olfactory stimulus dynamics.</a> Nat. Neurosci. 18 (1), 56-65 (2014).</li><li>Larsson, M. C., Domingos, A. I., Jones, W. D., Chiappe, M. E., Amrein, H., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Or83b+encodes+a+broadly+expressed+odorant+receptor+essential+for+Drosophila+olfaction.">Or83b encodes a broadly expressed odorant receptor essential for Drosophila olfaction.</a> Neuron. 43 (5), 703-714 (2004).</li><li>Knaden, M., Strutz, A., Ahsan, J., Sachse, S., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+representation+of+odorant+valence+in+an+insect+brain.">Spatial representation of odorant valence in an insect brain.</a> Cell Rep. 1 (4), 392-399 (2012).</li><li>Zaninovich, O. A., Kim, S. M., Root, C. R., Green, D. S., Ko, K. I., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single-fly+assay+for+foraging+behavior+in+Drosophila.">A single-fly assay for foraging behavior in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. (81), e50801 (2013).</li><li>Farhan, A., Gulati, J., Gro&#946;e-Wilde, E., Vogel, H., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CCHamide+1+receptor+modulates+sensory+perception+and+olfactory+behavior+in+starved+Drosophila.">The CCHamide 1 receptor modulates sensory perception and olfactory behavior in starved Drosophila.</a> Sci. Rep. 3 (2765), 1-6 (2013).</li><li>Fl&#252;gge, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geruchliche+Raumorientierung+von+Drosophila+melanogaster.">Geruchliche Raumorientierung von Drosophila melanogaster.</a> Z. Vgl. Physiol. 20 (4), 462-500 (1934).</li><li>Borst, A., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotropotaxis+in+Drosophila+melanogaster.">Osmotropotaxis in Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Physiol. A. 147 (4), 479-484 (1982).</li><li>Louis, M., Huber, T., Benton, R., Sakmar, T. P., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+olfactory+sensory+input+enhances+chemotaxis+behavior.">Bilateral olfactory sensory input enhances chemotaxis behavior.</a> Nat. Neurosci. 11 (2), 187-199 (2008).</li><li>Gomez-Marin, A., Stephens, G. J., Louis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+sampling+and+decision+making+in+Drosophila+chemotaxis.">Active sampling and decision making in Drosophila chemotaxis.</a> Nat. Commun. 2 (441), 1-10 (2011).</li><li>Gaudry, Q., Hong, E. J., Kain, J., de Bivort, B. L., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+neurotransmitter+release+enables+rapid+odour+lateralization+in+Drosophila.">Asymmetric neurotransmitter release enables rapid odour lateralization in Drosophila.</a> Nature. 493 (7432), 42442-42448 (2013).</li><li>Quinn, W. G., Harris, W. A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+behavior+in+Drosophila+melanogaster.">Conditioned behavior in Drosophila melanogaster.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 71 (3), 708-712 (1974).</li><li>Ramdya, P., Lichocki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosensory+interactions+drive+collective+behaviour+in+Drosophila.">Mechanosensory interactions drive collective behaviour in Drosophila.</a> Nature. 519 (7542), 233-236 (2014).</li><li>Bhandawat, V., Maimon, G., Dickinson, M. H., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+modulation+of+flight+in+Drosophila+is+sensitive,+selective+and+rapid.">Olfactory modulation of flight in Drosophila is sensitive, selective and rapid.</a> J. Exp. Biol. 213 (21), 3625-3635 (2010).</li><li>Duistermars, B. J., Chow, D. M., Frye, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flies+require+bilateral+sensory+input+to+track+odor+gradients+in+flight.">Flies require bilateral sensory input to track odor gradients in flight.</a> Curr. Biol. 19 (15), 1301-1307 (2009).</li><li>Claridge-Chang, A., Roorda, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Writing+memories+with+light-addressable+reinforcement+circuitry.">Writing memories with light-addressable reinforcement circuitry.</a> Cell. 139 (2), 405-415 (2009).</li><li>Steck, K., Veit, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+behavioral+paradigm+for+Drosophila+olfaction+-+The+Flywalk.">A high-throughput behavioral paradigm for Drosophila olfaction - The Flywalk.</a> Sci. Rep. 2 (361), 1-9 (2012).</li><li>Lewis, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+standard+food+medium.">A new standard food medium.</a> Drosoph. Inf. Serv. 34, 117-118 (1960).</li><li>Lebestky, T., Chang, J. S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+different+forms+of+arousal+in+Drosophila+are+oppositely+regulated+by+the+dopamine+D1+receptor+ortholog+DopR+via+distinct+neural+circuits.">Two different forms of arousal in Drosophila are oppositely regulated by the dopamine D1 receptor ortholog DopR via distinct neural circuits.</a> Neuron. 64, 522-536 (2009).</li><li>Thoma, M., Hansson, B. S., Knaden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compound+valence+is+conserved+in+binary+odor+mixtures+in+Drosophila+melanogaster.">Compound valence is conserved in binary odor mixtures in Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 217 (20), 3645-3655 (2014).</li><li>Olsson, S. B., Kuebler, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+multicomponent+stimulus+device+for+use+in+olfactory+experiments.">A novel multicomponent stimulus device for use in olfactory experiments.</a> J. Neurosci. Meth. 195 (1), 1-9 (2011).</li></ol>

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

Flywalk 시스템이 언뜻보기에 다소 복잡한 것처럼 보이지만, 한 번 설정하고 그것을 실행하는 사용하기 쉽고 매우 강력한 결과를 얻을 수 있습니다. 생물 분석으로 산출 된 결과의 일관성을 강조하는 것이 여기에 도시 된 대표적인 결과는 약 2 년 새 추적 소프트웨어와 광원을 사용하여 변형 된 설치와 이전 연구 29에 도시 된 결과의 일부 후의 있다고 말할 수있다. 그럼에도 불구하고, 유인 ?...

어떤 neuroethological 연구의 목표는 하나의 지배적 인 신경 또는 신경 회로의 활동 상태 및 유기체의 거동과 인과 관계를 확립하는 것이다. 이 목표의 연결 작업을 달성하기 위해 행동 동일한 자극 조건에서 모니터링해야하고 이러한 자극 조건이 이상적으로 사람들의 이해 진화 조사에서 신경계 비슷해야합니다. 이 행동 생물 검정에 관해서 특히 때, 이러한 요구 사항이 역사적으로 초파리에 매우 까다로운 입증은 후각 neuroethology을 melanogaster의. 소스에서 해제되면, 냄새 깃털이 빠르게 공기 이동이 냄새 분배 (1)의 주요 결정 요인 인에 의한 난류 확산으로 얇은 필라멘트로 헤어. 그 결과, 악취 소스를 향해 이동 곤충은 청정 공기의 가변 간격으로 산재 냄새 패키지 간헐적 자극을 경험한다. 양자 모두산책과 곤충 비행 - 초파리를 포함하는 - 5 - 냄새 2의 부재에서 크로스 바람 이동 주로 깃털 만남에 맞바람 급증에 의해 탐색이 간헐적 인 자극 정권을 악용 입증되었다. 이러한 트랩 분석 등의 초파리 neuroethology에 사용되는 11, 많은 행동 생물 검정 - 생리 학적 실험에서 자극 절차 반면 주로 곤충 깨끗한 공기 또는 동적 자극 서열 6의 장시간 산재 냄새 중 하나를 제공하는 단일 퍼프하여 자연 환경에서 발생할 수있는 그 모방 15 - 오픈 필드 경기장 또는 T-미로는 냄새 그라데이션 (12)에 의존하고있다. 정의에 의해 악취 구배가 냄새 공급원으로부터의 거리에 따라 농도 가변되기 때문에, 특별한 문제는 이러한 패러다임을 사용하여 정확한 악취 농도에 기인 할 수 없다. 또한, 기울기냄새 그라데이션 비판적 취제의 물리 화학적 특성에 따라 달라집니다. 잘못된 해석을 초래할 수있다 (20) - 높은 휘발성 화합물의 구배는 휘발성이 낮은 화합물에 의해 생성되므로 역시 어려워 항해 (16)의 유일한 수단으로서 공간에서 농도 차이의 측정에 의존 유기체에 대해 추적하는 것보다 얕은 것 특히 선택의 분석에 후각 환경 설정. 이 공간의 모든 단계에서 서로 다른 혼합 성분의 비율에 이르게하기 때문에 다시 생리학과 행동 사이에 명확한 상관 관계를 배제하기 때문에 냄새 혼합물을 향한 행동을 조사 할 때이 효과 또한 매우 해롭다. 식초 파리는 과일을 발효에 집계하는 경향이 있지만, 그들은 음식 소스와 산란 사이트에 대한 그들의 탐색에 독방 있습니다. 그럼에도 불구하고, 각각의 동물을 테스트하는 것이 아니라 많은 행동 패러다임은 초파리 neuroetholo에 사용GY는 파리의 코호트 냄새 유도 동작을 살펴 매력 제어 위에 자극 냄새를 선택하는 파리의 분획으로서 획득된다. 이 코호트 실험 비행 neuroethology의 이해에 크게 기여하고이를 사용하여 만든 관측의 대부분은 단일 비행 실험에서 확인할 수있다. 그러나, 각 other&#39;s 결정에 영향을 미칠 수있다 (21) 및 극단적 인 경우 악취 평가 인구 밀도 22에 따라 회피하기 위하여 무관심 전환 할 수 날아 관찰되었다. 또한, 실험의 이러한 종류의 결과는 종종 연결 활동과 동작을 상관 할 때 바람직 할 것이다 오히려 그 일 동안 플라이가 무엇을하고 있는지 관찰보다 행동 결정의 시퀀스의 엔드 포인트를 제공한다. 이 다소 낮은 해상도의 코호트 실험은 같은 수 닿는 비행 경기장과 디딜 방아와 같은 고해상도 단일 플라이 방법으로 대조된다당시 행동 반응의 직접적인 관찰 자극 20,23,24를 표시됩니다. 그들은 매우 효율적이고-간 개인 간 시험 변동성이 부분적으로 오랜 기간 동안 인구의 관찰에 평균화되기 때문에 강력한 심지어 상대적으로 결과 낮은 샘플 크기를 제공하기 때문에 그럼에도 불구하고, 코호트 실험은 여전히​​ 인기 있습니다. 곁에 비행과 디딜 방아는 아마 자극 프레 젠 테이션 및 시간 해상도에 관한 황금 표준을 제공하지만, 사용되는 경기장은 하나의 동물을 위해 설계되었으며 따라서 시간이 많이 소요되는 샘플 통계 분석에 필요한 크기를 얻을 수 있도록하고 있습니다. 몇 개의 다른 접근이 최근에 잘 정의 자극 정권과 조합 고해상도 행동 데이터의 효율적인 획득을 허용 개발되었다. 이러한 냄새의 깃털 5의 정확한 3D 모델과 함께 풍동에서 여러 식초 파리의 자율 3D 추적을 포함 </SUP&gt;, 양쪽 (25)와 Flywalk 패러다임 (26)로부터 공기 류와 함께 제공되는 선택 실에서 여러 개별 파리의 추적. Flywalk에서, 15 개인 파리는 작은 유리 튜브에 위치하고 있습니다 지속적으로 붉은 빛이 상황에서 오버 헤드 카메라에 의해 감시. 냄새가 20cm / sec의 연속적인 기류에 첨가하고, 일정 속도로 유리관을 통해 이동된다. 기류는 악취 전달 시스템에 들어가기 전에 증류수 (가습기)를 함유하는 250ml의 병에 통과시켜 가습된다. flies&#39; 위치는 파리 상기 상향 이동할 수 없거나 관심 (ROI)의 사각 영역 냄새 튜브의 길이의 대부분을 감싸는 (그러나 튜브 (각면에 약 5mm의 바깥 쪽 가장자리를 제외) 내에 기록된다 바람이 불어) 냄새 프리젠 테이션 (그림 1A, B)의시기에. 플라이 아이덴티티 추적 시스템 t 의해 일정하게 유지된다그들의-Y 위치 (즉, 그들의 유리관 제한)에 기초하여 실험 hroughout. 악취 자극은 최대 8 번의 악취 및 26,29 (도 1b) 그의 모든 가능한 혼합물의 프리젠 테이션을 가능하게하는 다 성분 자극 장치를 사용하여 달성된다. 실험 과정은 컴퓨터 냄새 전달 시스템을 조절하고 온도 및 습도 정보를 수집하는 (컴퓨터 (1),도 1C)에 의해 제어된다. 이 컴퓨터는 또한 지속적으로 초당 20 프레임 (컴퓨터 2)에서 비행 위치를 추적하는 두 번째 컴퓨터에 데이터 로거를 (촬영을 시작 / 정지) 제어합니다. 냄새 자극을주기 주위에 냄새 밸브 상태 (밸브 개방의 즉, 시간 점), 악취 ID, 온도와 습도를 위치를 비행 냄새에 컴퓨터 2.이 방법으로 정보를 기록하고, 위치는 .CSV-파일로 동기화 및 수출 비행하는 추가 처리 및 사용자가 작성한 분석 루틴을 사용하여 분석 될 수있다. 때문에전체 시스템은 컴퓨터 제어, 아니 인간의 개입은 실험 세션 동안 필요하지 않습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="866">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Flywalk setup</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:207px;">details available upon request</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">stimulus device</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>details available upon request</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LED cluster</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>details available upon request</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HD Pro Webcam C920</td>
			<td style="width:325px;">Logitech, Lausanne, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">2 Computers</td>
			<td style="width:325px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:216px;">Flywalk Reloaded v1.0 software</td>
			<td style="width:325px;">Electricidade Em P&#243; (electricidadeempo.net)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Labview 11.0 software</td>
			<td style="width:325px;">National Instruments, Austin, TX</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard fly food</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:216px;">Standard fly vials</td>
			<td style="width:325px;">Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Standard fly vials</td>
			<td style="width:325px;">Greiner bio-one GmbH, Frickenhausen, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">aspirator</td>
			<td style="width:325px;">Custom</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">mineral oil</td>
			<td style="width:325px;">Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">odors</td>
			<td style="width:325px;">Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:216px;">200 &#181;l PCR reaction tubes</td>
			<td style="width:325px;">Biozym Scientific GmbH, Oldendorf, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-resolution quantification of odor-guided behavior in drosophila melanogaster using the flywalk paradigm

그들의 자연 환경에서, 이러한 식초와 같은 곤충은 화학적으로 서로 다른 냄새 물질의 거대한 양의 포격 초파리 melanogaster의 비행. 더욱 문제를 복잡하게하기 위해, 곤충 신경계에 의해 검출 된 냄새는 일반적 조성과 농도 비율 변화 단일 화합물 그러나 혼합물은 없습니다. 이는 신경계에 의해 평가되어야 할 다른 후각 자극의 거의 무한한 양 리드. 냄새 자극의 측면 플라이하여 평가를 결정하는 이해하기 위해서는 많은 효율적 취기 및 악취 냄새 혼합물 향해 유도 거동을 조사하는 것이 바람직하다. 직접 연결 활동에 행동의 상관 관계, 동작은 비교 기간과 신경 생리 학적 실험에서와 같이 동일한 자극 조건에서 정량화되어야​​한다. 그러나, 초파리 neuroethology 많은 현재 사용 후각 생물 검정은 특수 목적 오히려있다효율성으로 또는 해결을 향해하게 안정적. Flywalk, 자동화 냄새 전달 및 추적 시스템은, 효율 및 분해능을 절충. 이는 악취 패킷이 자유롭게 걸어 플라이를 자극하고 animal&#39;s에게 동적 행동 반응을 정확하게 결정할 때의 판정을 허용한다.

초파리는 일정 속도로 유리관을 통해 악취 펄스 및 냄새 펄스 이동간에 그들의 유리관 내에 자유롭게 분배 할 수 있기 때문에 파리 자극 시점의 x 방향의 위치에 따라 서로 다른 시간에 악취가 발생. 그 결과, 에틸 아세테이트 매력적인 10-3 희석액 500 밀리 초 펄스에 의해 유발 된 맞바람 궤적의 온셋은 가까이 앉아 파리에 비해 그들의 유리관의 풍하 끝에 파리 약 1 초 지연 20cm / sec로 20cm ?...

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High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

자동화 추적 시스템 Flywalk는 초파리에서 냄새 유도 행동 고해상도 정량화를 위해 사용된다.

에서 냄새 유도 행동의 고해상도 정량화<em&gt; 초파리</em사용&gt;<em&gt; Flywalk</em&gt; 패러다임

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

high-resolution-quantification-odor-guided-behavior-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

9.2K 조회수.  Max Planck Institute for Chemical Ecology.  자동화 추적 시스템 Flywalk는 초파리에서 냄새 유도 행동 고해상도 정량화를 위해 사용된다. 

비디오: High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed in sensory hairs called sensilla, which cover the surface of olfactory organs. The surface of each sensillum is covered with tiny pores, through which odorants pass and dissolve in a fluid called sensillum lymph, which bathes the sensory dendrites of the OSNs housed in a given sensillum. The OSN dendrites express odorant receptor (OR) proteins, which in insects function as odor-gated ion channels4, 5. The interaction of odorants with ORs either increases or decreases the basal firing rate of the OSN. This neuronal activity in the form of action potentials embodies the first representation of the quality, intensity, and temporal characteristics of the odorant6, 7.
Given the easy access to these sensory hairs, it is possible to perform extracellular recordings from single OSNs by introducing a recording electrode into the sensillum lymph, while the reference electrode is placed in the lymph of the eye or body of the insect. In Drosophila, sensilla house between one and four OSNs, but each OSN typically displays a characteristic spike amplitude. Spike sorting techniques make it possible to assign spiking responses to individual OSNs. This single sensillum recording (SSR) technique monitors the difference in potential between the sensillum lymph and the reference electrode as electrical spikes that are generated by the receptor activity on OSNs1, 2, 8. Changes in the number of spikes in response to the odorant represent the cellular basis of odor coding in insects. Here, we describe the preparation method currently used in our lab to perform SSR on Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae, and show representative traces induced by the odorants in a sensillum-specific manner.

Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae

Electrophysiological responses of olfactory sensory neurons to odorants can be measured in insects using single sensillum recordings. In this video article we will demonstrate how to perform single sensillum recordings in the antennae of the vinegar fly (Drosophila melanogaster) and the maxillary palps of the malaria mosquito (Anopheles gambiae).

곤충의 단일 Sensillum 레코딩 Drosophila melanogaster과 아노 펠 레스 gambiae</em

The sense of smell is essential for insects to find foods, mates, predators, and oviposition sites3. Insect olfactory sensory neurons (OSNs) are enclosed ...

연구

신경과학

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated. Thus, simultaneous recordings of neuronal activity and behavior are essential to correlate brain activity to behavior. For such behavioral analyses, the fruit fly, Drosophila melanogaster, allows us to incorporate genetically encoded calcium indicators such as GCaMP1, to monitor neuronal activity, and to use sophisticated genetic manipulations for optogenetic or thermogenetic techniques to specifically activate identified neurons2-5. Use of a thermogenetic technique has led us to find critical neurons for feeding behavior (Flood et al., under revision). As a main part of feeding behavior, a Drosophila adult extends its proboscis for feeding6 (proboscis extension response; PER), responding to a sweet stimulus from sensory cells on its proboscis or tarsi. Combining the protocol for PER7 with a calcium imaging technique8 using GCaMP3.01, 9, I have established an experimental system, where we can monitor activity of neurons in the feeding center &#x2013; the suboesophageal ganglion (SOG), simultaneously with behavioral observation of the proboscis. I have designed an apparatus ("Fly brain Live Imaging and Electrophysiology Stage": "FLIES") to accommodate a Drosophila adult, allowing its proboscis to freely move while its brain is exposed to the bath for Ca2+ imaging through a water immersion lens. The FLIES is also appropriate for many types of live experiments on fly brains such as electrophysiological recording or time lapse imaging of synaptic morphology. Because the results from live imaging can be directly correlated with the simultaneous PER behavior, this methodology can provide an excellent experimental system to study information processing of neuronal networks, and how this cellular activity is coupled to plastic processes and memory.

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

The fruit fly, Drosophila melanogaster, extends its proboscis for feeding, responding to a sugar stimulus from its proboscis or tarsus. I have combined observations of the proboscis extension response (PER) with a calcium imaging technique, allowing us to monitor the activity of neurons in the brain, simultaneously with behavioral observation.

확인된 뉴런과 먹이 행동에서 칼슘 신호의 동시 녹화 Drosophila melanogaster</em

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated.  Thus, ...

High-resolution Live Imaging of Cell Behavior in the Developing Neuroepithelium

The embryonic spinal cord consists of cycling neural progenitor cells that give rise to a large percentage of the neuronal and glial cells of the central nervous system (CNS). Although much is known about the molecular mechanisms that pattern the spinal cord and elicit neuronal differentiation1, 2, we lack a deep understanding of these early events at the level of cell behavior. It is thus critical to study the behavior of neural progenitors in real time as they undergo neurogenesis.
In the past, real-time imaging of early embryonic tissue has been limited by cell/tissue viability in culture as well as the phototoxic effects of fluorescent imaging. Here we present a novel assay for imaging such tissue for long periods of time, utilizing a novel ex vivo slice culture protocol and wide-field fluorescence microscopy (Fig. 1). This approach achieves long-term time-lapse monitoring of chick embryonic spinal cord progenitor cells with high spatial and temporal resolution.
This assay may be modified to image a range of embryonic tissues3, 4 In addition to the observation of cellular and sub-cellular behaviors, the development of novel and highly sensitive reporters for gene activity (for example, Notch signaling5) makes this assay a powerful tool with which to understand how signaling regulates cell behavior during embryonic development.

Imaging embryonic tissue in real-time is challenging over long periods of time. Here we present an assay for monitoring cellular and sub-cellular changes in chick spinal cord for long periods with high spatial and temporal resolution. This technique can be adapted for other regions of the nervous system and developing embryo.

개발 Neuroepithelium의 세포 문제의 고해상도 라이브 영상

The embryonic spinal cord consists of cycling neural progenitor cells that give rise to a large percentage of the neuronal and glial cells of the central ...

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

A growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive manipulation of the neural activity of specific neurons in Drosophila melanogaster1. Chief among these are optogenetic tools, which enable the activation or silencing of specific neurons in the intact and freely moving animal using bright light. Channelrhodopsin (ChR2) is a light-activated cation channel that, when activated by blue light, causes depolarization of neurons that express it. ChR2 has been effective for identifying neurons critical for specific behaviors, such as CO2 avoidance, proboscis extension and giant-fiber mediated startle response2-4. However, as the intense light sources used to stimulate ChR2 also stimulate photoreceptors, these optogenetic techniques have not previously been used in the visual system. Here, we combine an optogenetic approach with a mutation that impairs phototransduction to demonstrate that activation of a cluster of loom-sensitive neurons in the fly's optic lobe, Foma-1 neurons, can drive an escape behavior used to avoid collision. We used a null allele of a critical component of the phototransduction cascade, phospholipase C-&beta;, encoded by the norpA gene, to render the flies blind and also use the Gal4-UAS transcriptional activator system to drive expression of ChR2 in the Foma-1 neurons. Individual flies are placed on a small platform surrounded by blue LEDs. When the LEDs are illuminated, the flies quickly take-off into flight, in a manner similar to visually driven loom-escape behavior. We believe that this technique can be easily adapted to examine other behaviors in freely moving flies.

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Genetically encoded optogenetic tools enable noninvasive manipulation of specific neurons in the Drosophila brain. Such tools can identify neurons whose activation is sufficient to elicit or suppress particular behaviors. Here we present a method for activating Channelrhodopsin2 that is expressed in targeted neurons in freely walking flies.

의 이스케이프 문제의 Optogenetic의 자극<em&gt; Drosophila melanogaster</em

A  growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive  manipulation of the neural activity of specific neurons in ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

의 자발적인 운동 활성의 결정<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

사회 회피의 정량화에 대한 간단한 분석<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

사용 보상 추구 행동의 변화를 측정하는 간단한 방법<em&gt; 노랑 초파리</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

모세관 공급 분석은 식품 섭취를 측정<em&gt; 노랑 초파리</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

Quantification of Drosophila Grooming Behavior

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a grooming assay protocol and novel chamber design that is cost-efficient and scalable for either small or large-scale studies of Drosophila grooming. Flies are dusted all over their body with Brilliant Yellow dye and given time to remove the dye from their bodies within the chamber. Flies are then deposited in a set volume of ethanol to solubilize the dye. The relative spectral absorbance of dye-ethanol samples for groomed versus ungroomed animals are measured and recorded. The protocol yields quantitative data of dye accumulation for individual flies, which can be easily averaged and compared across samples. This allows experimental designs to easily evaluate grooming ability for mutant animal studies or circuit manipulations. This efficient procedure is both versatile and scalable. We show work-flow of the protocol and comparative data between WT animals and mutant animals for the Drosophila type I Dopamine Receptor (DopR).

This protocol describes a scalable individual grooming assay technique in Drosophila that yields robust, quantitative data to measure grooming behavior. The method is based on comparing the difference in dye accumulation on the bodies of un-groomed versus groomed animals over a set period of time.

Drosophila 그루밍 행동의 부량

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a ...

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Protein aggregation is a central feature of most neurodegenerative diseases, including Alzheimer&#39;s disease (AD), Parkinson&#39;s disease (PD), Huntington&#39;s disease (HD), and amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Protein aggregates are closely associated with neuropathology in these diseases, although the exact mechanism by which aberrant protein aggregation disrupts normal cellular homeostasis is not known. Emerging data provide strong support for the hypothesis that pathogenic aggregates in AD, PD, HD, and ALS have many similarities to prions, which are protein-only infectious agents responsible for the transmissible spongiform encephalopathies. Prions self-replicate by templating the conversion of natively-folded versions of the same protein, causing spread of the aggregation phenotype. How prions and prion-like proteins in AD, PD, HD, and ALS move from one cell to another is currently an area of intense investigation. Here, a Drosophila melanogaster model that permits monitoring of prion-like, cell-to-cell transmission of mutant huntingtin (Htt) aggregates associated with HD is described. This model takes advantage of powerful tools for manipulating transgene expression in many different Drosophila tissues and utilizes a fluorescently-tagged cytoplasmic protein to directly report prion-like transfer of mutant Htt aggregates. Importantly, the approach we describe here can be used to identify novel genes and pathways that mediate spreading of protein aggregates between diverse cell types in vivo. Information gained from these studies will expand the limited understanding of the pathogenic mechanisms that underlie neurodegenerative diseases and reveal new opportunities for therapeutic intervention.

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Accumulating evidence supports the idea that pathogenic protein aggregates associated with neurodegenerative diseases spread between cells with prion-like properties. Here, we describe a method that enables visualization of cell-to-cell spreading of prion-like aggregates in the model organism, Drosophila melanogaster.