이 작품은 국가 주요 연구 및 개발 프로그램의 중국 [2017YFD0500102];에서 교부 금에 의해 지원 되었다 [31572544]; 중국의 국가 자연과학 기초 수의 Etiological 생물학 [SKLVEB2016KFKT005]; 주 키 연구실 상하이 농업 기술 개발 프로그램, 중국 [G2016060201] 적용.

마우스 감염 실험 했다는 실험실 동물 모니터링 위원회의 장쑤 성, 중국에 의해 승인 및 실험 동물 센터의 난징 농업 대학교에서 수행 (허가 번호: SYXK (Su) 2017-0007).
1입니다. 박테리아의 준비
참고: S. 이렇게 뵙 serotype 2 악성 긴장 P1/7 수 막 염19병에 걸린 돼지 로부터 격리 했다. 스트레인 P1/7 토 드-휴이 트 국물에서 성장 했다 (THB, THB의 리터 당 수식: 심장 주입, 3.1 g, neopeptone, 20.0 g, 포도 당, 2.0 g, 염화 나트륨, 2.0 g; disodium 인산 염, 0.4 g, 나트륨 탄산염, 2.5 g)와 한 천 토 드-휴이 트 (THA, 리터 당 수식에 도금 그쪽으로: 심장 주입, 3.1 g; neopeptone, 20.0 g; 포도 당, 2.0 g; 염화 나트륨 2.0 g; disodium 인산 염, 0.4 g; 탄산 나트륨 2.5 g; 한 천, 15.0 g) 37 ° C, 5% CO2.
<ol><li>컬렉션의 스트레인 P1/7 planktonic 셀<ol>
<li>중간 로그 단계 문화에서 planktonic 셀의 5 mL을 수집 (OD600= 0.6), 8000 × g에서 3 분 동안 원심 및 다음 PBS로 3 회 세척.</li>
		<li>셀 5 튜브, aliquot THB에서 25% 글리세롤의 5 mL을 resuspend 하 고-80 ° c.에 저장</li>
	</ol>
</li>
	<li>컬렉션의 스트레인 P1/7 biofilm 상태 셀<ol>
<li>20 mL의 숙박 문화를가지고 고 신선한 THB;의 180 mL에 추가 10 라운드 배양 배지로 희석된 문화를 동등 하 게, 분한 다음 24 h에 대 한 5% CO2 에서 37 ° C에서 인큐베이터에 접시를 넣어.</li>
		<li>부 화, 후 접시 resuspend은 접시를 준수 하지 박테리아를 부드럽게 흔들어 고 다음는 상쾌한 포부에 의해 무시. 참고: 접시를 부드럽게 흔들어 하 고 resuspending는 앙금을 피하십시오.</li>
		<li>Biofilm 상태 셀을 수확, 퇴적 물을 완전히, resuspend 다음 새로운 튜브에 샘플을 전송 하는 PBS의 5 mL를 추가 합니다.</li>
		<li>다음 매개 변수는 마지막 단계에서 biofilm 상태 셀 sonicate: 60 W, 4 사이클 5 s 오프 및 10 s.</li>
		<li>8000 × g에서 3 분 centrifuge 고-80 ° c.에 상쾌한 저장 참고:는 상쾌한 biofilm 구성 요소를 포함할 수 있습니다 그리고 동물 실험 (3 단계)에 설명 된 대로 감염 전에 biofilm 박테리아 resuspend를 사용할 수 있습니다.</li>
		<li>THB에 10 mL 25% 글리세롤과 앙금을 resuspend 하 고-80 ° c.에 biofilm 상태 셀을 저장</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 스캐닝 전자 현미경 (SEM) 분석
<ol><li>수집 된 biofilm 상태 셀과 planktonic 셀 4 ° c.에 12-24 h에 대 한 4 %paraformaldehyde 사용 하 여 수정</li>
	<li>증류수와 신속 하 게 샘플을 헹 구 고 탈수 순차적으로 30 분 각 솔루션에 대 한 에탄올 (25%, 50%, 70%, 90%, 및 100%)의 증가 농도와 샘플.</li>
	<li>더블 양면 테이프와 홀더를 금속 금과 팔라듐으로 증발 기에서 마지막으로 코트 그들 말린된 샘플을 준수 합니다.</li>
	<li>다음 매개 변수를 사용 하 여 스캐닝 전자 현미경에 의해 샘플을 관찰: EHT (여분 고전압) = 10 kV; WD (작동 거리) = 7.0 또는 8.0 m m; 확대 = 5000 ×; A 신호 SE1 =.</li>
</ol>3. 동물 실험
<ol><li>SPF 6 주 오래 된을 사용 하 여이 연구에서 여성 BALB/c 마우스. 그 주사 부는 있는 3.5 m m는 bregma에서 rostral 감염의 intracranial subarachnoidal 경로 통해 모든 쥐를 감염. 사출 사이트의 stereotaxic 좌표 Chiavolini 외17에 의해 명확 하 게 설명 했다.<ol>
<li>Histopathological 분석, 대 한 감염 쥐 (그룹 당 5 쥐)의 2 개 그룹 planktonic 셀 또는 biofilm를 사용 하 여 상태 세포 3 × 107 콜로 니 형성 단위 (CFU)의 복용량에 그리고 또 다른 5 마우스 컨트롤 PBS를 주입 했다.</li>
		<li>TLR2 및 두뇌에서 cytokines의 mRNA 표현의 검색 감염 쥐 (그룹 당 6 쥐)의 두 개의 추가 그룹에 대 한 3 × 107 CFU의 복용량에 상태 세포 planktonic 셀 또는 biofilm를 사용 하 여.</li>
		<li>그쪽으로에 직렬 희석을 도금 하 여 실행 가능한 박테리아의 수를 결정 합니다.</li>
		<li>추가 연구에 대 한 감염 된 후 12 h에서 모든 마우스 안락사 참고: 재고 매체에 글리세롤 감염 하기 전에 제거 되어야 합니다. Planktonic 전지와 biofilm 상태 셀-80 ° C에서 복구 PBS로 3 회를 씻어 있습니다. Planktonic 세포는 PBS를 가진 resuspended 그리고 감염;에 대 한 적절 한 복용량을 희석 biofilm 상태 셀 (1.2.5 단계)에서 저장 된 상쾌한와 함께 resuspended 고 감염에 대 한 적절 한 복용량을 희석. 감염에 대 한 볼륨 50 µ L 해서는 안됩니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>뇌 조직에서 TLR2 및 cytokines의 mRNA 표현 검색<ol>
<li>뇌 조직의 RNA 추출 키트를 사용 하 여에서 총 RNA를 추출 합니다.<ol>
<li>각 마우스에 대 한 전체 뇌 조직의 RNA를 추출 하기 위한 사용 합니다. 전체 뇌 조직을 5 튜브 나눕니다. 100mg 뇌 조직에 차지 하 고 키트에 의해 제공 lysing 매트릭스를 포함 하는 각 관에 세포 솔루션의 1 mL를 추가 합니다.</li>
			<li>40 대 한 균질 화기에 튜브를 처리 6.0, 그리고 원심 분리기 튜브 12000 × g와 4 ° C에서 5 분에 대 한 설정에서 s.</li>
			<li>원심, 후 위 단계는 새로운 microcentrifuge 튜브 전송.</li>
			<li>실내 온도;에 5 분에 대 한 전송된 샘플을 품 어 클로 프롬, 10에 대 한 소용돌이의 300 µ L 추가 s, 다음 실 온에서 5 분 동안 품 어 고.</li>
			<li>12000 ×에서 튜브 원심 g 및 4 ° C 5 분에 대 한 새로운 튜브에 위 단계를 전송.</li>
			<li>5 시간 동안 그것을 반전 하기 전에 튜브를 감기 절대 에탄올의 500 µ L을 추가 하 고 적어도 1 시간 동안-20 ° C에서 샘플을 저장.</li>
			<li>12000 ×에서 튜브 원심 g와 15 분 및 제거는 상쾌한 4 ° C. RNase 무료 H2o. 찬 75% 에탄올 500 µ L와 펠 릿을 세척</li>
			<li>제거는 에탄올, 공기 건조 실 온, RNase 무료 H2o.의 100 µ L에서 resuspend RNA에서 5 분 동안 펠 릿</li>
			<li>실 온에서 5 분 동안 RNA를 품 어 고 RNA bioanalyzer를 사용 하 여 RNA 농도 결정 합니다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>CDNA 합성을 한 thermocycler 반전 녹음 방송 (RT) 시 약 키트와 함께 사용 하 여 게놈 DNA (gDNA)의 제거를 포함 하 여 수행 합니다.<ol>
<li>RNA의 1 µ g는 튜브 포함 2 µ L 5 x gDNA 제거 버퍼의, 1 µ L gDNA 제거 효소, RNase 무료 H2O의 때까지 추가 볼륨 도달 10 µ L. Incubate 42 ° c.에서 2 분</li>
			<li>믹스 마스터의 10 µ L을 추가 (RT 효소의 1 µ L 믹스 나, RT 뇌관 믹스의 1 µ L, 버퍼 2, x 5의 4 µ L 및 RNase 무료 H2O 4 µ L) 마지막에서 반응 솔루션 단계 및 다음 부드럽게 섞는다. RT 반응으로 즉시 진행: 37 ° C 15 분 그리고 85 ° C 5에 대 한 s.</li>
			<li>SYBR 실시간 정량 Pcr 키트와 함께 실시간 PCR 기계를 사용 하 여 실시간 정량 PCR (RT-정량) 분석을 수행. 20 µ L의 총 볼륨까지 효소 x 2의 10 µ L, 앞으로 뇌관, 역방향 뇌관의 0.8 µ L, 0.4 µ L를 이용한 참조 염료 II x 50의,의 cDNA 템플릿과 RNase 무료 H2O 2 µ L의 0.8 µ L를 추가 합니다.</li>
			<li>다음 열 매개 변수를 사용 하 여 3 중에서 각 샘플을 실행: 30 94 ° c s 5의 40 주기 다음 95 ° c, s 및 34 s 15의 마지막 단계와 60 ° C에서 95 ° C, 60 ° C에서 1 분에 그리고 15 s 95 ° c.에 실시간 정량 Pcr를 위한 뇌관은 표 1에 나열 됩니다. 하우스키핑 유전자 B2m 및 18s rRNA 내부 제어로 사용 되었다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>2-ΔΔCt 방법에 따라 상대 겹 변경을 계산 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
조직학 단면도의 관찰
	<ol>
<li>24 시간 10% 포 르 말린으로 고정, 후 조직 조각 2-3 m m에서의 적절 한 크기로 고정된 뇌 조직을 재구성 합니다.</li>
		<li>조직 조각을 포함 카세트에 넣고 자동 진공 탈수로 탈수에 대 한 새로운 통 솔루션에 몰두.</li>
		<li>고정된 조직에 밖으로가 고 각 솔루션에서 30 분 (70%, 80%, 95%, 95%, 및 100%) 에탄올의 농도 증가에 순차적으로 탈수.</li>
		<li>15 분 동안 크 실 렌과 샘플을 transparentize 하 고 90 분 동안 60 ° C에 액체 파라핀에 찍어 후 포함 기계를 사용 하 여 포함.</li>
		<li>파라핀 블록 포함 조직 3 µ m 조각으로 잘라, 45 ° C에서 물에 조각 타일 그리고 공기에서 건조.</li>
		<li>60 ° C에서 3 h에 대 한 섹션을 품 어, haematoxylin 및 오신 (그)를 사용 하 여 메서드, 얼룩 그리고 중립 껌 함께 인감.</li>
		<li>광학 현미경으로는 뇌의 histopathological 변화를 관찰 합니다. 4-포인트 그레이 딩 시스템 조직학 변화를 평가 하기 위해 사용 되었다. 짝이 없는 t 테스트를 사용 하 여 통계 분석을 위해. 혼잡/출혈: 결 석, 점수 0; 초점 혼잡/출혈의 작은 영역 점수 1; 초점 혼잡/출혈의 넓은 지역 또는 초점 혼잡/출혈의 작은 지역의 여러 사이트 점수 2; 3 개 큰 초점 혼잡/출혈 사이트까지 점수 3; 혼잡/출혈 확산, 4 점수. 괴 사: 결 석, 점수 0; 초점 괴 사 점수 1; 1-10 회 저 성 세포의 발생을 확산, 점수 2; confluent 괴 사의 foci 점수 3; 광범위 한 confluent 괴 사, 4 점수. 선 동적인 세포 침투: 결 석, 점수 0; 몇 고 초점 침입, 점수 1; 다 초점 침투 또는 집계의 형성으로 침입 점수 2; 3 집계까지 점수 3; 그리고 더 이상의 집계 점수 4.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Gottschalk, M., Xu, J., Calzas, C., Segura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+suis:+a+new+emerging+or+an+old+neglected+zoonotic+pathogen?.">Streptococcus suis: a new emerging or an old neglected zoonotic pathogen?.</a> Future Microbiology. 5, 371-391 (2010).</li><li>Goyette-Desjardins, G., Auger, J. P., Xu, J., Segura, M., Gottschalk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+suis,+an+important+pig+pathogen+and+emerging+zoonotic+agent-an+update+on+the+worldwide+distribution+based+on+serotyping+and+sequence+typing.">Streptococcus suis, an important pig pathogen and emerging zoonotic agent-an update on the worldwide distribution based on serotyping and sequence typing.</a> Emerging Microbes &amp; Infections. 3 (6), e45 (2014).</li><li>Kerdsin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+Streptococcus+suis+serotype+9+infection+in+humans.">Emergence of Streptococcus suis serotype 9 infection in humans.</a> Journal of Microbiology, Immunology and Infection. 50 (4), 545-546 (2017).</li><li>Hatrongjit, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+human+case+report+of+sepsis+due+to+infection+with+Streptococcus+suis+serotype+31+in+Thailand.">First human case report of sepsis due to infection with Streptococcus suis serotype 31 in Thailand.</a> BMC Infect Diseases. 15, 392 (2015).</li><li>Fittipaldi, N., Segura, M., Grenier, D., Gottschalk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+factors+involved+in+the+pathogenesis+of+the+infection+caused+by+the+swine+pathogen+and+zoonotic+agent+Streptococcus+suis.">Virulence factors involved in the pathogenesis of the infection caused by the swine pathogen and zoonotic agent Streptococcus suis.</a> Future Microbiology. 7 (2), 259-279 (2012).</li><li>Hall-Stoodley, L., Costerton, J. W., Stoodley, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+biofilms:+from+the+natural+environment+to+infectious+diseases.">Bacterial biofilms: from the natural environment to infectious diseases.</a> Nature Reviews Microbiology. 2 (2), 95-108 (2004).</li><li>Fuxman Bass, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+DNA:+a+major+proinflammatory+component+of+Pseudomonas+aeruginosa+biofilms.">Extracellular DNA: a major proinflammatory component of Pseudomonas aeruginosa biofilms.</a> Journal of Immunology. 184 (11), 6386-6395 (2010).</li><li>Isiaku, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilm+is+associated+with+chronic+streptococcal+meningoencephalitis+in+fish.">Biofilm is associated with chronic streptococcal meningoencephalitis in fish.</a> Microbial Pathogenesis. 102, 59-68 (2017).</li><li>Oggioni, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Switch+from+planktonic+to+sessile+life:+a+major+event+in+pneumococcal+pathogenesis.">Switch from planktonic to sessile life: a major event in pneumococcal pathogenesis.</a> Molecular Microbiology. 61 (5), 1196-1210 (2006).</li><li>Xiao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+suis+small+RNA+rss04+contributes+to+the+induction+of+meningitis+by+regulating+capsule+synthesis+and+by+inducing+biofilm+formation+in+a+mouse+infection+model.">Streptococcus suis small RNA rss04 contributes to the induction of meningitis by regulating capsule synthesis and by inducing biofilm formation in a mouse infection model.</a> Veterinary Microbiology. 199, 111-119 (2017).</li><li>Dominguez-Punaro, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+suis+serotype+2,+an+important+swine+and+human+pathogen,+induces+strong+systemic+and+cerebral+inflammatory+responses+in+a+mouse+model+of+infection.">Streptococcus suis serotype 2, an important swine and human pathogen, induces strong systemic and cerebral inflammatory responses in a mouse model of infection.</a> Journal of Immunology. 179 (3), 1842-1854 (2007).</li><li>Seitz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+intranasal+mouse+model+for+mucosal+colonization+by+Streptococcus+suis+serotype+2.">A novel intranasal mouse model for mucosal colonization by Streptococcus suis serotype 2.</a> Journal of Medical Microbiology. 61 (Pt 9), 1311-1318 (2012).</li><li>Busque, P., Higgins, R., Caya, F., Quessy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+of+pigs+against+Streptococcus+suis+serotype+2+infection+using+a+live+avirulent+strain.">Immunization of pigs against Streptococcus suis serotype 2 infection using a live avirulent strain.</a> Canadian Journal of Veterinary Research. 61 (4), 275-279 (1997).</li><li>Williams, A. E., Blakemore, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+Streptococcal+meningitis+following+intravenous+intracisternal+and+natural+routes+of+infection.">Pathology of Streptococcal meningitis following intravenous intracisternal and natural routes of infection.</a> Neuropathology and Applied Neurobiology. 4 (4), 345-356 (1990).</li><li>Dominguez-Punaro, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+cochlear+inflammation+and+vestibular+syndrome+in+an+experimental+model+of+Streptococcus+suis+infection+in+mice.">Severe cochlear inflammation and vestibular syndrome in an experimental model of Streptococcus suis infection in mice.</a> European Journal of Clinical Microbiology &amp; Infectious Diseases. 31 (9), 2391-2400 (2012).</li><li>Auger, J. P., Fittipaldi, N., Benoit-Biancamano, M. O., Segura, M., Gottschalk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+Studies+of+Different+Sequence+Types+and+Geographical+Origins+of+Streptococcus+suis+Serotype+2+in+a+Mouse+Model+of+Infection.">Virulence Studies of Different Sequence Types and Geographical Origins of Streptococcus suis Serotype 2 in a Mouse Model of Infection.</a> Pathogens. 5 (3), (2016).</li><li>Chiavolini, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+inducing+experimental+pneumococcal+meningitis+in+outbred+mice.">Method for inducing experimental pneumococcal meningitis in outbred mice.</a> BMC Microbiology. 4, 36 (2004).</li><li>Madsen, L. W., Svensmark, B., Elvestad, K., Jensen, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Otitis+interna+is+a+frequent+sequela+to+Streptococcus+suis+meningitis+in+pigs.">Otitis interna is a frequent sequela to Streptococcus suis meningitis in pigs.</a> Veterinary Pathology. 38 (2), 190-195 (2001).</li><li>Holden, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+evolution+of+virulence+and+drug+resistance+in+the+emerging+zoonotic+pathogen+Streptococcus+suis.">Rapid evolution of virulence and drug resistance in the emerging zoonotic pathogen Streptococcus suis.</a> PLoS One. 4 (7), e6072 (2009).</li><li>Dominguez-Punaro Mde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+characterization+of+the+microglial+inflammatory+response+to+Streptococcus+suis,+an+important+emerging+zoonotic+agent+of+meningitis.">In vitro characterization of the microglial inflammatory response to Streptococcus suis, an important emerging zoonotic agent of meningitis.</a> Infection and Immunity. 78 (12), 5074-5085 (2010).</li><li>Hassan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+different+detection+methods+of+biofilm+formation+in+the+clinical+isolates.">Evaluation of different detection methods of biofilm formation in the clinical isolates.</a> Brazilian Journal of Infectious Diseases. 15 (4), 305-311 (2011).</li><li>Vanier, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+putative+virulence+factors+of+Streptococcus+suis+involved+in+invasion+of+porcine+brain+microvascular+endothelial+cells.">New putative virulence factors of Streptococcus suis involved in invasion of porcine brain microvascular endothelial cells.</a> Microbial Pathogenesis. 46 (1), 13-20 (2009).</li><li>Takeuchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+suilysin+to+the+pathogenesis+of+Streptococcus+suis+meningitis.">The contribution of suilysin to the pathogenesis of Streptococcus suis meningitis.</a> Journal of Infectious Diseases. 209 (10), 1509-1519 (2014).</li><li>Tenenbaum, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polar+bacterial+invasion+and+translocation+of+Streptococcus+suis+across+the+blood-cerebrospinal+fluid+barrier+in+vitro.">Polar bacterial invasion and translocation of Streptococcus suis across the blood-cerebrospinal fluid barrier in vitro.</a> Cellular Microbiology. 11 (2), 323-336 (2009).</li></ol>

저자는 공개 없다.

여기서 설명 하는 감염 intracranial subarachnoidal 경로 감염의 다른 경로 통한 확실 한 장점이 있습니다. 호스트-박테리아 상호 작용 및 중앙 신경 조직에 세균 입구를 모방 하는 뇌에 직접 호스트 면역 응답에 세균성 구성의 효과 연구 조사 수 있습니다. 따라서,이 감염 경로 조사 다른 박테리아에 의해 발생 하는 뇌 막 염의 메커니즘에 대 한 확장할 수 있습니다. 또한, 그것은 또한 세균성 수 막 염에 ?...

이렇게 뵙 구 (S. 이렇게 뵙)은 수 막 염, 폐 렴, septicaemia, 심장 내 막 염, 관절염1등 심각한 질병을 일으키는 돼지, 전세계의 주요 세균성 병원 체 이다. 그것은 또한 새로운 동물 매개 대리인입니다. 지금까지, 그것은 9 serotypes 인간, 2, 4, 5, 9, 14, 16, 21, 24, 그리고 31 serotypes2,,34를 포함 하 여 감염을 일으킬 수 보고 되었습니다. 인간과 돼지, 뇌 막 염에서는 S. 이렇게 뵙 감염의 주요 임상 증상 중 하나입니다. 베트남, 태국, S. 이렇게 뵙 는 어른5에 수 막 염의 주요 원인입니다. 미생물 biofilms는 미생물을 서로 게 고착 하 고 집중 인터페이스; 그들은 세균 독성, 다양 한 환경에 항생제 저항5생존에 필수적입니다. Biofilms는 일반적으로 일반적으로 포함 하는 다 당 류, 단백질과 DNA6세포 외 매트릭스 둘러싸여 있습니다. 후자는 호스트 염증 성 반응과 cytokine 생산7유도 수 있습니다. Biofilm 형성은 이전 연구에서 연쇄 구 균 수 막 염에서 포함 되기 위하여 알려졌다. Biofilms는 연쇄 상 구 균 agalactiae 염 tilapia 물고기 모델에 기여할 biofilm 형성 뇌 조직 내에서 공개 되었습니다 하 고 meningeal 주위 vivo에서 내부 복 부 접종8표면. 수 막 염, 중 연쇄 상 구 균 균 biofilm 같은 상태 이며 이러한 biofilm 상태에 박테리아 했다 마우스 감염 모델9에 수 막 염 유도에 더 효과적. 또한 우리의 이전 연구, 생존 분석10여 세균 독성에 기여 하는 S. 이렇게 뵙 마우스 뇌에서와 관련 된 biofilm 상태. 그러나, S. 이렇게 뵙 수 막 염에서 biofilm 참여에 대 한 직접 증거 조사 더 필요합니다.
S. 이렇게 뵙 감염의 동물 모델에서 마우스 복 (i.p.)11, intranasal (i.n.)12, 정 맥 (i.v.)13및 감염14, intracisternal (i.c.) 경로 사용 하 여 개발 되어 15 , 그러나 16., 감염의 i.p., i.n., 및 i.v. 노선 표면 구성 요소 S. 이렇게 뵙 는 뇌에 직접 뇌 막 염의 역할을 공부 하 고 적합 하지 않습니다. Biofilms에서 세포 외 기질 포함 됩니다. I.c. 접종 S. 이렇게 뵙 감염을 위해 사용 되었다, 비록 정확한 주사 부 하지 그 논문에서 설명 하고있다. 반면, stereotaxic 좌표 intracranial subarachnoidal 접종에 대 한 사출 사이트의 명확 하 게 이전 연구17에서 설명 하고있다. 이 접종 점과 더 단순한 실험 프로토콜의 쉽게 인식 허용. 또한, 감염 intracranial subarachnoidal 경로 sinuses 또는 중간 귀17, 그리고 중간 귀 및 S. 이렇게 뵙 로 인 한 수 막 염의 관계에서 중앙 신경 조직에 세균 입구를 모방 매드 슨 외18에 의해 증명 되었습니다. 또한, 마우스에서 감염 intracranial subarachnoidal 경로 적용 하 여 우리 시연 S. 이렇게 뵙 작은 RNA rss04 우리의 이전 연구10에 수 막 염에 기여 한다.
현재에서 연구, 감염 intracranial subarachnoidal 경로 S. 이렇게 뵙 수 막 염에 biofilms의 역할을 조사 하기 위해 쥐에 사용 되었다. 마우스 감염의이 경로 의해 planktonic 셀 또는 biofilm 상태 셀 S. 이렇게 뵙 의 감염 되었다. Histopathological 분석 및 TLR2 biofilm 상태 세포를 주입 하는 쥐의 뇌 조직에서 cytokines의 증가 mRNA 표현 명확 하 게 표시 S. 이렇게 뵙 biofilm 수 막 염에 기여.

<table><tbody><tr><td>Todd Hewitt Broth(THB)</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>DF0492078</td><td>Dissolve 30 g of the powder in 1 L of purified water. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min.</td></tr><tr><td>Agar</td><td>DSBIO</td><td>16C0050</td><td>Dissolve 15 g of the powder in 1 L of THB. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min.</td></tr><tr><td>Milli-Q Reference Water Purification System</td><td>Merck KGaA</td><td>Z00QSVCUS</td><td>Without Dnase/ Rnase</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Tianjin Kemiou Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>10019318</td><td>Dissolve 8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.42 g Na2HPO3 , 0.27 g KH2PO4 in 1 L of purified water. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min. Use KOH to adjust pH to 7.4.</td></tr><tr><td>Na2HPO3</td><td>Xilong Scientific Co., Ltd</td><td>9009012-01-09</td><td>Dissolve 8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.42 g Na2HPO3 , 0.27 g KH2PO4 in 1 L of purified water. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min. Use KOH to adjust pH to 7.4.</td></tr><tr><td>KCl</td><td>Xilong Scientific Co., Ltd</td><td>9009017-01-09</td><td>Dissolve 8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.42 g Na2HPO3 , 0.27 g KH2PO4 in 1 L of purified water. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min. Use KOH to adjust pH to 7.4.</td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Xilong Scientific Co., Ltd</td><td>9009019-01-09</td><td>Dissolve 8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.42 g Na2HPO3 , 0.27 g KH2PO4 in 1 L of purified water. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min. Use KOH to adjust pH to 7.4.</td></tr><tr><td>KOH</td><td>Xilong Scientific Co., Ltd</td><td>9009014-01-09</td><td>Dissolve 8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.42 g Na2HPO3 , 0.27 g KH2PO4 in 1 L of purified water. Autoclave at 121&amp;deg; for 15 min. Use KOH to adjust pH to 7.4.</td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>Sionpharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>10010618</td><td>Diluted with equal volumu of purified water, autoclave at 121&amp;deg; for 15 min</td></tr><tr><td>4% paraformaldehyde</td><td>Sionpharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>80096675</td><td></td></tr><tr><td>25% Glutaraldehyde</td><td>Sionpharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>30092436</td><td>10-fold diluted with purified water for fixation.</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sionpharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>10009218</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Sionpharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td>10006818</td><td></td></tr><tr><td>Spctrophotometre</td><td>DeNovix Inc.</td><td>DS-11+</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound cell crusher</td><td>NingBo Scientz Biotechnology Co.,Ltd</td><td>JY96-IIN</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Hitachi Koki Co., Ltd</td><td>CT15RE</td><td></td></tr><tr><td>Refrigerator</td><td>Aucma Co., Ltd</td><td>DW-86L500</td><td></td></tr><tr><td>Scanning electron microscope</td><td>Zeiss</td><td>EVO-LS10</td><td></td></tr><tr><td>FastRNA Pro Green Kit</td><td>MP Biomedicals</td><td>#6045-050</td><td></td></tr><tr><td>FastPrep-24 Instrument</td><td>MP Biomedicals</td><td>116005500</td><td></td></tr><tr><td>Instrument for PCR</td><td>SensoQuest GmbH</td><td>1124310110</td><td></td></tr><tr><td>QuantStudio 6 Flex</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4485689</td><td></td></tr><tr><td>SYBR Premix Ex Taq II</td><td>Takara Biomedical Technology (Beijing) Co., Ltd</td><td>RR820A</td><td></td></tr><tr><td>PrimeScript RT reagent kit with gDNA Eraser</td><td>Takara Biomedical Technology (Beijing) Co., Ltd</td><td>RR047A</td><td></td></tr><tr><td>Fully Enclosed Tissue Processor</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>ASP200S</td><td></td></tr><tr><td>Heated Paraffin Embedding Module</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>EG1150H</td><td></td></tr><tr><td>Semi-Automated Rotary Microtome</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>RM2245</td><td></td></tr><tr><td>Water bath for paraffin sections</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>HI1210</td><td></td></tr><tr><td>Autostainer XL</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>ST5010</td><td></td></tr><tr><td>Agilent 2100</td><td>Agilent Technologies</td><td>G2939A</td><td></td></tr><tr><td>Optical microscope</td><td>Olympus</td><td>BX51</td><td></td></tr></tbody></table>

intracranial subarachnoidal route of infection for investigating roles of streptococcus suis biofilms in meningitis in a mouse infection model

구 이렇게 뵙 는 전세계 돼지의 주요 세균성 병원 체 뿐만 아니라 신흥 동물 매개 대리인입니다. 인간과 돼지, 뇌 막 염에서는 S. 이렇게 뵙 감염의 주요 징후입니다. 적당 한 감염 모델 병원 균으로 인 한 질병의 메커니즘을 이해 하는 필수적인 도구입니다. 마우스 감염의 여러 노선 S. 이렇게 뵙 감염의 병 인 연구 개발 되었습니다. 그러나, 감염의 복, intranasal, 그리고 정 맥 노선 공부 biofilms에서 기질 등 뇌에 직접 뇌 막 염에 S. 이렇게 뵙 표면 구성 요소의 역할에 대 한 적합 하지 않습니다. Intracisternal 접종 S. 이렇게 뵙 감염에 대 한 사용 되었습니다, 하지만 정밀 사출 사이트 설명 하지 하고있다. 여기, 감염 intracranial subarachnoidal 경로 S. 이렇게 뵙 수 막 염에 biofilms의 역할을 조사 하기 위해 마우스 모델에서 설명 했다. S. 이렇게 뵙 planktonic 셀 또는 biofilm 상태 셀 직접 3.5 m m는 bregma에서 rostral 위치한 사출 사이트를 통해 쥐의 거미 막 밑 공간에 주입 했다. Histopathological 분석 및 증가 mRNA TLR2의 표현과 biofilm 상태 셀을 주사 하는 생쥐에서 뇌 조직의 cytokines 명확 하 게 표시 S. 이렇게 뵙 biofilm S. 이렇게 뵙 수 막 염에 확실 한 역할을 합니다. 이 감염 경로 감염, 호스트-박테리아 상호 작용의 연구를 수의 다른 경로 통한 확실 한 장점이 있습니다. 그것은 평가, 뇌에 직접 호스트 면역 반응에 세균성 구성의 효과 허용 하는 또한, 그리고 중앙 신경 조직에 세균 입구를 모방. 감염의이 경로 다른 박테리아에 의해 발생 하는 뇌 막 염의 메커니즘을 조사에 대 한 확장할 수 있습니다. 또한, 그것은 또한 세균성 수 막 염에 대 한 약물의 효능을 테스트를 사용할 수 있습니다.

SEM 분석 실험 조건에서 biofilm 형성 검사를 수행 했습니다. 그림 1에서 보듯이 planktonic 세포 (그림 1A)와 biofilm 주 세포 (그림 1B) 사이의 biofilm 형성에 상당한 차이가 있다. SEM 분석 biofilm 박테리아 덩어리에 있던 여러 레이어와 그들은 쌌 다 했다 기질, 동안 planktonic 박테리아 훨씬 조?...

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Intracranial Subarachnoidal Route of Infection for Investigating Roles of Streptococcus suis Biofilms in Meningitis in a Mouse Infection Model

여기, 우리 구 이렇게 뵙 수 막 염에 biofilms의 역할을 공부 하는 쥐에 감염 intracranial subarachnoidal 경로 설명 합니다. 이 감염 모델은 또한 다른 세균성 수 막 염의 병 인 세균성 수 막 염에 대 한 새로운 약물의 효능을 연구 하 고 적합 합니다.

마우스 감염 모델에서 뇌 막 염에 구 이렇게 뵙 Biofilms의 조사 역할에 대 한 감염 intracranial Subarachnoidal 경로

Streptococcus suis is not only a major bacterial pathogen of pigs worldwide but also an emerging zoonotic agent. In humans and pigs, meningitis is a major ...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intracranial Subarachnoidal Route of Infection for Investigating Roles of Streptococcus suis Biofilms in Meningitis in a Mouse Infection Model

7.2K 조회수.  Nanjing Agricultural University. 여기, 우리 구 이렇게 뵙 수 막 염에 biofilms의 역할을 공부 하는 쥐에 감염 intracranial subarachnoidal 경로 설명 합니다. 이 감염 모델은 또한 다른 세균성 수 막 염의 병 인 세균성 수 막 염에 대 한 새로운 약물의 효능을 연구 하 고 적합 합니다.

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Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood vessels resulting in vascular leak, the development of purpuric rashes and eventual tissue necrosis. Studying the pathogenesis of this infection was previously limited by the human specificity of the bacteria, which makes in vivo models difficult. In this protocol, we describe a humanized model for this infection in which human skin, containing dermal microvessels, is grafted onto immunocompromised mice. These vessels anastomose with the mouse circulation while maintaining their human characteristics. Once introduced into this model, N. meningitidis adhere exclusively to the human vessels, resulting in extensive vascular damage, inflammation and in some cases the development of purpuric rash. This protocol describes the grafting, infection and evaluation steps of this model in the context of N. meningitidis infection. The technique may be applied to numerous human specific pathogens that infect the blood stream.

Neisseria meningitidis is a human specific pathogen that infects blood vessels. In this protocol human microvessels are introduced into a mouse by grafting human skin onto immunocompromised mice. Bacteria adhere extensively to the human vessels, leading to vascular damage and development of the purpuric rash typically observed in human cases.

인간 답게 된 마우스 모델은 미세 혈관을 대상으로 세균 감염을 연구하는

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

연구

면역학 및 감염병학

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of Willis perforation (CWp) and proven by intracranial pressure (ICP) monitoring. Thereby a homogenous blood distribution in subarachnoid spaces surrounding the arterial circulation and cerebellar fissures is achieved. Animal physiology is maintained by intubation, mechanical ventilation, and continuous on-line monitoring of various physiological and cardiovascular parameters: body temperature, systemic blood pressure, heart rate, and hemoglobin saturation. Thereby the cerebral perfusion pressure can be tightly monitored resulting in a less variable volume of extravasated blood. This allows a better standardization of endovascular filament perforation in mice and makes the whole model highly reproducible. Thus it is readily available for pharmacological and pathophysiological studies in wild type and genetically altered mice.

A standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage by intraluminal Circle of Willis perforation is described. Vessel perforation and subarachnoid bleeding are monitored by intracranial pressure monitoring. In addition various vital parameters are recorded and controlled to maintain physiologic conditions.

지주막 하 출혈의 생쥐 모델

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

의학

A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including neoplastic, autoimmune, and chronic inflammatory diseases. Emerging evidence implicates pathogen-induced chronic inflammation in the development and progression of chronic diseases with a wide variety of clinical manifestations. Due to the complex and multifactorial etiology of chronic disease, designing experiments for proof of causality and the establishment of mechanistic links is nearly impossible in humans. An advantage of using animal models is that both genetic and environmental factors that may influence the course of a particular disease can be controlled. Thus, designing relevant animal models of infection represents a key step in identifying host and pathogen specific mechanisms that contribute to chronic inflammation.
Here we describe a mouse model of pathogen-induced chronic inflammation at local and systemic sites following infection with the oral pathogen Porphyromonas gingivalis, a bacterium closely associated with human periodontal disease. Oral infection of specific-pathogen free mice induces a local inflammatory response resulting in destruction of tooth supporting alveolar bone, a hallmark of periodontal disease. In an established mouse model of atherosclerosis, infection with P. gingivalis accelerates inflammatory plaque deposition within the aortic sinus and innominate artery, accompanied by activation of the vascular endothelium, an increased immune cell infiltrate, and elevated expression of inflammatory mediators within lesions. We detail methodologies for the assessment of inflammation at local and systemic sites. The use of transgenic mice and defined bacterial mutants makes this model particularly suitable for identifying both host and microbial factors involved in the initiation, progression, and outcome of disease. Additionally, the model can be used to screen for novel therapeutic strategies, including vaccination and pharmacological intervention.

Animal models have proven to be invaluable tools in defining host and pathogen specific mechanisms that contribute to the development of chronic inflammation. Here we describe a mouse model of oral infection with the human pathogen Porphyromonas gingivalis and detail methodologies to assess the progression of inflammation at local and systemic sites.

로컬 및 전신 사이트에서 병원체에 의한 만성 염증을위한 마우스 모델

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

A Mouse Model to Assess Innate Immune Response to Staphylococcus aureus Infection

Staphylococcus aureus (S. aureus)&#160;infections, including methicillin resistant stains, are an enormous burden on the healthcare system. With incidence rates of S. aureus infection climbing annually, there is a demand for additional research in its&#160;pathogenicity. Animal models of infectious disease advance our understanding of the host-pathogen response and lead to the development of effective therapeutics. Neutrophils play a primary role in the innate immune response that controls S. aureus infections by forming an abscess to wall off the infection and facilitate bacterial clearance; the number of neutrophils that infiltrate an S. aureus skin infection often correlates with disease outcome. LysM-EGFP mice, which possess the enhanced green fluorescent protein (EGFP) inserted in the Lysozyme M (LysM) promoter region (expressed primarily by neutrophils), when used in conjunction with in vivo whole animal fluorescence imaging (FLI) provide&#160;a means of quantifying neutrophil emigration noninvasively and longitudinally into wounded skin. When combined with a bioluminescent S. aureus strain and sequential in vivo whole animal bioluminescent imaging (BLI), it is possible to longitudinally monitor both the neutrophil recruitment dynamics and in vivo bacterial burden at the site of infection in anesthetized mice from onset of infection to resolution or death. Mice are more resistant to a number of virulence factors produced by S. aureus that facilitate effective colonization and infection in humans. Immunodeficient mice provide a more sensitive animal model to examine persistent S. aureus infections and the ability of therapeutics to boost innate immune responses. Herein, we characterize responses in LysM-EGFP mice that have been bred to MyD88-deficient mice (LysM-EGFP&#215;MyD88-/- mice) along with wild-type LysM-EGFP mice to investigate S. aureus skin wound infection. Multispectral simultaneous detection enabled study of neutrophil recruitment dynamics by using in vivo FLI, bacterial burden by using in vivo BLI, and wound healing longitudinally and noninvasively over time.

A Mouse Model to Assess Innate Immune Response to Staphylococcus aureus Infection

An approach is described for real-time detection of the innate immune response to cutaneous wounding and Staphylococcus aureus infection of mice. By comparing LysM-EGFP mice (which possess fluorescent neutrophils) with a LysM-EGFP crossbred immunodeficient mouse strain, we advance our understanding of infection and the development of approaches to combat infection.

마우스 모델을 평가 타고 난 면역 반응 포도 상 구 균 감염

Staphylococcus aureus (S. aureus)&#160;infections, including methicillin resistant stains, are an enormous burden on the healthcare system. With incidence ...

Inducing Meningococcal Meningitis Serogroup C in Mice via Intracisternal Delivery

Neisseria meningitidis (meningococcus) is a narrow-host-range microorganism, globally recognized as the leading cause of bacterial meningitis. Meningococcus is a transient colonizer of human nasopharynx of approximately 10% of healthy subject. In particular circumstances, it acquires an invasive ability to penetrate the mucosal barrier and invades the bloodstream causing septicaemia. In the latest case, fulminating sepsis could arise even without the consequent development of meningitis. Conversely, bacteria could poorly multiply in the bloodstream, cross the blood brain barrier, reach the central nervous system, leading to fulminant meningitis. The murine models of bacterial meningitis represent a useful tool to investigate the host-pathogen interactions and to analyze the pathogenetic mechanisms responsible for this lethal disease. Although, several experimental model systems have been evaluated over the last decades, none of these were able to reproduce the characteristic pathological events of meningococcal disease. In this experimental protocol, we describe a detailed procedure for the induction of meningococcal meningitis in a mouse model based on the intracisternal inoculation of bacteria. The peculiar signs of human meningitis were recorded in the murine host through the assessment of clinical parameters (e.g., temperature, body weight), evaluation of survival rate, microbiological analysis and histological examination of brain injury. When using intracisternal (i.cist.) inoculum, meningococci complete delivery directly into cisterna magna, leading to a very efficient meningococcal replication in the brain tissue. A 1,000-fold increase of viable count of bacteria is observed in about 18 h. Moreover, meningococci are also found in the spleen, and liver of infected mice, suggesting that the liver may represent a target organ for meningococcal replication.

Here, we describe a method to induce meningococcal meningitis through an intracisternal route of infection in adult mice. We present a step by step protocol of meningococcal infection from the preparation of inoculum to the intracisternal infection; then record the animal survival and evaluate the bacterial loads in murine tissues.

인트스타스타스테어링 전달을 통해 마우스에서 수막구균 수막염 혈청계S C유도

Neisseria meningitidis (meningococcus) is a narrow-host-range microorganism, globally recognized as the leading cause of bacterial meningitis. ...

A Mouse Model for the Transition of Streptococcus pneumoniae from Colonizer to Pathogen upon Viral Co-Infection Recapitulates Age-Exacerbated Illness

Streptococcus pneumoniae (pneumococcus) is an asymptomatic colonizer of the nasopharynx in most individuals but can progress to a pulmonary and systemic pathogen upon influenza A virus (IAV) infection. Advanced age enhances host susceptibility to secondary pneumococcal pneumonia and is associated with worsened disease outcomes. The host factors driving those processes are not well defined, in part due to a lack of animal models that reproduce the transition from asymptomatic colonization to severe clinical disease. 
This paper describes a novel mouse model that recreates the transition of pneumococci from asymptomatic carriage to disease upon viral infection. In this model, mice are first intranasally inoculated with biofilm-grown pneumococci to establish asymptomatic carriage, followed by IAV infection of both the nasopharynx and lungs. This results in bacterial dissemination to the lungs, pulmonary inflammation, and obvious signs of illness that can progress to lethality. The degree of disease is dependent on the bacterial strain and host factors. 
Importantly, this model reproduces the susceptibility of aging, because compared to young mice, old mice display more severe clinical illness and succumb to disease more frequently. By separating carriage and disease into distinct steps and providing the opportunity to analyze the genetic variants of both the pathogen and the host, this S. pneumoniae/IAV co-infection model permits the detailed examination of the interactions of an important pathobiont with the host at different phases of disease progression. This model can also serve as an important tool for identifying potential therapeutic targets against secondary pneumococcal pneumonia in susceptible hosts.

A Mouse Model for the Transition of Streptococcus pneumoniae from Colonizer to Pathogen upon Viral Co-Infection Recapitulates Age-Exacerbated Illness

This paper describes a novel mouse model for the transition of pneumococcus from an asymptomatic colonizer to a disease-causing pathogen during viral infection. This model can be readily adapted to study polymicrobial and host-pathogen interactions during the different phases of disease progression and across various hosts.

바이러스 동시 감염 시 콜로니자에서 병원체로 Streptococcus pneumoniae 의 전환을 위한 마우스 모델은 연령 악화 질병을 요약합니다.

Streptococcus pneumoniae (pneumococcus) is an asymptomatic colonizer of the nasopharynx in most individuals but can progress to a pulmonary and systemic ...

In Vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection

Spine implant infections portend poor outcomes as diagnosis is challenging and surgical eradication is at odds with mechanical spinal stability. The purpose of this method is to describe a novel mouse model of spinal implant infection (SII) that was created to provide an inexpensive, rapid, and accurate in vivo tool to test potential therapeutics and treatment strategies for spinal implant infections.
In this method, we present a model of posterior-approach spinal surgery in which a stainless-steel k-wire is transfixed into the L4 spinous process of 12-week old C57BL/6J wild-type mice and inoculated with 1 x 103 CFU of a bioluminescent strain of Staphylococcus aureus Xen36 bacteria. Mice are then longitudinally imaged for bioluminescence in vivo on post-operative days 0, 1, 3, 5, 7, 10, 14, 18, 21, 25, 28, and 35. Bioluminescence imaging (BLI) signals from a standardized field of view are quantified to measure in vivo bacterial burden.
To quantify bacteria adhering to implants and peri-implant tissue, mice are euthanized and the implant and surrounding soft tissue are harvested. Bacteria are detached from the implant by sonication, cultured overnight and then colony forming units (CFUs) are counted. The results acquired from this method include longitudinal bacterial counts as measured by in vivo S. aureus bioluminescence (mean maximum flux) and CFU counts following euthanasia.
While prior animal models of instrumented spine infection have involved invasive, ex vivo tissue analysis, the mouse model of SII presented in this paper leverages noninvasive, real time in vivo optical imaging of bioluminescent bacteria to replace static tissue study. Applications of the model are broad and may include utilizing alternative bioluminescent bacterial strains, incorporating other types of genetically engineered mice to contemporaneously study host immune response, and evaluating current or investigating new diagnostic and therapeutic modalities such as antibiotics or implant coatings.

The protocol describes a novel in vivo mouse model of spinal implant infection where a stainless-steel k-wire implant is infected with bioluminescent Staphylococcus aureus Xen36. Bacterial burden is monitored longitudinally with bioluminescent imaging and confirmed with colony forming unit counts after euthanasia.

척추 임플란트 감염의 In Vivo 마우스 모델

Spine implant infections portend poor outcomes as diagnosis is challenging and surgical eradication is at odds with mechanical spinal stability. The ...

칸디다 알비칸스(Candida albicans) 생물막 관련 PJI에 대한 마우스 모델 확립

A Periprosthetic Joint Candida albicans Infection Model in Mouse

Periprosthetic joint infection (PJI) is one of the common infections caused by Candida albicans (C. albicans), which increasingly concerns surgeons and scientists. Generally, biofilms that can shield C. albicans from antibiotics and immune clearance are formed at the infection site. Surgery involving the removal of the infected implant, debridement, antimicrobial treatment, and reimplantation is the gold standard for the treatment of PJI. Thus, establishing animal PJI models is of great significance for the research and development of new drugs or therapeutics for PJI. In this study, a smooth nickel-titanium alloy wire, a widely used implant in orthopedic clinics, was inserted into the femoral joint of a C57BL/6 mouse before the C. albicans were inoculated into the articular cavity along the wire. After 14 days, mature and thick biofilms were observed on the surface of implants under a scanning electronic microscope (SEM). A significantly reduced bone trabecula was found in the H&amp;E staining of the infected joint specimens. To sum up, a mouse PJI model with the advantages of easy operation, high successful rate, high repeatability, and high clinical correlation was established. This is expected to be an important model for clinical studies of C. albicans biofilm-related PJI prevention.

저자 스포트라이트: Candida albicans Biofilm-Associated Prosthetic Joint Infections에 대한 연구 발전 

Periprosthetic joint infection (PJI) caused by dangerous pathogens is common in clinical orthopedics. Existing animal models cannot accurately simulate the actual situation of PJI. Here, we established a Candida albicans biofilm-associated PJI mouse model to research and develop new therapeutics for PJI.

마우스의 보철 관절 Candida albicans 감염 모델

Periprosthetic joint infection (PJI) is one of the common infections caused by Candida albicans (C. albicans), which increasingly concerns surgeons and ...

마우스 감염 모델에서 뇌 막 염에 구 이렇게 뵙 Biofilms의 조사 역할에 대 한 감염 intracranial Subarachnoidal 경로

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인간 답게 된 마우스 모델은 미세 혈관을 대상으로 세균 감염을 연구하는

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바이러스 동시 감염 시 콜로니자에서 병원체로 Streptococcus pneumoniae 의 전환을 위한 마우스 모델은 연령 악화 질병을 요약합니다.

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마우스의 보철 관절 Candida albicans 감염 모델

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마우스의 보철 관절 Candida albicans 감염 모델