저자는 배경 음악을 제공하기 위해, 비디오 처리 및 에릭 토마스, 음악학과, 콜비 대학과 기술 지원을, Qiuli 왕, 언어 리소스 센터, 콜비 대학에게 감사의 말씀을 전합니다. 이 프로젝트는 연구 자료, INBRE을위한 국가 센터 (P20RR016463-12), 일반 의료 과학 국립 연구소 (P20의 GM103423-12)에서 보조금에 의해 지원되었다, 보건 및 과학 사업부 그랜트, 콜비 대학 (STA)의 국민 연구소. JL과 LWM 여름 학술 기금, 콜비 대학에서 보조금에 의해 지원되었다.

1 초파리 놀라게 유도 로코의 분석 <ol><li> 약물 치료 <ol><li> 원하는 번호를 고정화하는 차분한 (약 8 ~ 12) 1-3 일 된 남성 CO 2를 사용하여 약물이 첨가 된 음식을 포함하는 유리 병에 수송 파리. 참고 : 또 다른 마취 예를 들면, 에테르, 얼음 계산 및 처리를 가능하게하기 위해 파리를 마취하는 데 사용할 수 있습니다. </li><li> 25 ° C에서 파​​리 (파리를 방지하기 위해 식품에 갇히지) 수평으로 유리 병 20 분 (또는 복구까지)에 대한 진정을 복구 한 후 12 시간 어둠 속에서 똑바로 유리 병을 배치 할 수 있도록 허용, 12 시간 빛 인큐베이터 실험의 나머지. </li></ol></li><li> 실험 세트 최대 <ol><li> 영구 마커 튜브 주위에 원을 표시하여 6.33 cm의 세 동일한 섹션으로이 두 병 설정을 나눈다. </li><li> 약물 노출 3 일 후에, 전송은 바이알 바닥에 마취없이 빠르게 날아 가기 바이알을 놓고입구에. 분명 테이프와 함께 병을 두 개 테이프입니다. </li><li> 파리 15 분 동안 새로운 환경에 적응할 수 있도록해야합니다. </li><li> 장소 흰색 배경에 튜브 및보기에 타이머 이중 유리 병 장치로부터 적절한 거리에 디지털 카메라를 설정합니다. 장치 전체가 하나의 액자에 표시됩니다 확인하고 모든 파리는 초점이있다. 실험 사이의 일관성을 유지하기 위해 프레임들, 카메라 및 바이알의 위치를​​ 표시한다. </li></ol></li><li> 모바일 분석 <ol><li> 분명히 카메라 뷰에서 재판 번호, 약물 치료, 그리고 타이머를 표시합니다. </li><li> 단단히 카운터에 세 번 두 번 유리 병 장치를 누르고 모든 파리는 유리 병의 바닥에 떨어질 있는지 확인합니다. 동시에 타이머를 시작합니다. </li><li> 매 5 초마다 1 분 동안, 장치의 사진을 촬영. 참고 : 또는 비디오 캡처 및 측정을위한 적절한 간격으로 일시 중지 될 수있다. </li><li> 파리 1 분 동안 방해받지 않고 복구 할 수 있습니다. </li><li&gt; 각 시험 사이에 1 분 복구 시간을 2 번 이상 반복합니다. 주 : 각 장치는 데이터 수집을 완료 5 분 소요. 시험 사이에 도청 비슷한 힘을 유지한다. 다수의 (적어도 3) 장치는 동시에 쉽게 취급 할 수있다. </li></ol></li><li> 데이터 분석 <ol><li> 사진을 검토하고 시간이 지남에 따라 각 섹션에서 파리의 수를 기록한다. 시간이 지남에 따라 각 섹션에서 파리의 비율을 계산합니다. 주 : 예를 들어, 일 3, 5에 대한 관심이 또는 세 시점에서 같은 파리이 전체 절차를 반복하고, 너무 많은 파리를 보상하기 위해 원래 시험 수를 확장하는 것이 가능 실험을하는 동안 죽을 7 경우 사망률. 데이터를 비교하기 위해 적절한 통계 분석을 사용합니다. </li></ol></li></ol> 2 초파리 자발적 로코의 분석 <ol><li> 음식 준비 <ol><li> 탈 이온수 15 ml의 물과 함께 원하는 로테 논 인스턴트 초파리 배지 3g 재구성(또는 관심의 다른 약물) 복​​용. </li><li> 식품 혼합물 회사 (약 5 분)가되면, 조심스럽게 제조 업체에 높은 약 1cm 투명 튜브 (5mm X 65mm)를 공급하는 음식을로드합니다. 조심스럽게 음식을 수직으로 튜브를 삽입하고이 관 내부의 음식을 제거 할 수 있습니다 때까지를 왜곡하여 튜브로 음식을 주입 약물을 추가합니다. 참고 : 진공을 만들기 위해 튜브의 구멍에 손가락을 배치하는 것이 도움이된다. 음식은 공기 방울을 포함하거나 파리가 붙어 될 수 요철이 없어야합니다. </li></ol></li><li> 실험 설정 <ol><li> 음식 가까운 튜브의 끝 부분에 플라스틱 캡을 배치합니다. 강제로 푸시 경우가 바이알에 기포를 생성 할 수 있기 때문에, 가능한 한 작은 플라스틱 튜브에 캡을 밀어. </li><li> 침착 한 일일 세 남자는 CO 2를 사용하여 조심스럽게 한 남성이 페인트 브러시와 각 튜브에 비행 삽입 날아갑니다. 원하는 시험의 수에 따라 반복한다. </li><li> 연결손 큰 상점에서 롤백 할 수있는 작은 목화 공을 가진 음식에서 튜브 먼의 끝은 면봉을 샀다. </li><li> 파리 15 분간 수평으로 튜브 복구하고 모든 파리가 살아 있고 활성화되어 있는지 확인 할 수 있습니다. DAM에 튜브를 삽입하고 모든 튜브 댐 같은 상대적인 위치에 있는지 확인하십시오. 주 : 바이알의 중간에 모니터링 영역으로 이들을 배치, 또는 튜브의 단부가 모니터링되고, 그래서 측으로 모든 튜브를 밀어하는 것이 가능하다. 참고 :이 방법에 변화를 설명을 참조하십시오. </li></ol></li><li> 데이터 수집 <ol><li> 12 시간 어둠 속에서 DAM을 배치, 12 시간 빛 인큐베이터는 25 ° C로 설정합니다. 데이터 수집 시스템에 DAM을 연결합니다. DAM 소프트웨어를 열고 환경 설정을 선택 빈 길이에 따라 10 분에. 데이터 수집을 시작하고 프로그램이 칠일에 대한 데이터를 수집 할 수 있습니다. 주 : 필요한 경우 빈 길이를 조정할 수있다. </li><li> 데이터 분석 참고 : 프로세스데이터는 장기 자발 운동을위한 수단으로 분당 카운트를 얻었다. <ol><li> 선택 입력 데이터를 클릭하여 열기 DAM 파일 스캔 프로그램 및 액세스 모니터 데이터입니다. </li><li> 해당 모니터 범위를 선택하고 10 분 간격으로 빈 길이를 선택합니다. </li><li> 출력 파일 형식에서 채널 파일을 선택합니다. 기본적으로 다른 모든 옵션을 둡니다. </li><li> 스캔 데이터를 클릭하고 지정된 폴더에 저장합니다. </li><li> 생체 데이터 분석 소프트웨어의 데이터 가져 오기가 분당 카운트를 얻었다. 참고 : 데이터 분석 Clocklab 소프트웨어는 일반적으로 사용하십시오. 다른 옵션도 사용할 수 있습니다. </li></ol></li></ol></li></ol>

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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+video+tracking+of+locomotion+in+adult+Drosophila+melanogaster.">High-resolution video tracking of locomotion in adult Drosophila melanogaster.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. , (2009).</li></ol>

저자가 공개하는 게 없다.

본 연구에서는 파킨슨 병 로테 논 유도 초파리 모델에서 장기 자발 운동 단기 놀라게 유도 운동 모두를 측정하기위한 두 가지 방법을 설명한다. 하나는 또한 파킨슨 질환 등을 모델링하는 것으로 알려진 기타 약리학 적 제제, 파라콰트 14, 파킨슨 씨병 등의 유전 모델, 알파 - 시누 클레인 돌연변이 체 (15), 및 운동에 영향을주는 질환의 다른 플라이...

운동력 결핍은 파킨슨 병의 주요 증상이며 크게 흑색질 (1)의 도파민 뉴런의 열화에 의해 야기된다. 로테 논은 초파리 2-6 파킨슨 모터 적자를 모델로 광범위하게 연구 된 케톤 살충제입니다. 로테 논은 궁극적으로 세포의 죽음 (7)의 원인이되는 산화 적 인산화 경로를 차단하여 산화 적 손상이 발생합니다. 도파민 뉴런은 주로 모터 2,7 기반 화학 물질의 효과를 만들고, 로테 논 독성에 더 쉽다. 파리에서 파킨슨 병 증상을 유도함으로써, 우리는 더 나은 질병을 이해하고 6,8-11이. 초파리들이 유지 보수가 용이, 유전자 취급 용이하기 때문에 이러한 효과를 연구하기위한 좋은 모델을 제공 증상을 개선하고 급속한 수명을 가질 수있다. 몇몇 연구 로테 논 단기 놀라게 유도 일으키는 것으로 나타났다초파리 언제 파리에서 운동 결함 로테 논 - 보충 식품에서 유지, 그들은 놀람 2-6 후 느린 부정적인 geotactic 응답을 보여줍니다. 컨트롤 실험 빨리 바이알 장치에서 위쪽으로 오르는 그들의 실패 놀라게 유도 운동력 결함을 나타낸다. 장기간에 로테 논의 효과는, 자발 운동은 잘 초파리 활동 모니터 (댐)이 성공적 초파리 생체 리듬 운동을 모니터링하는데 사용되어왔다. 설명 12,13 연구되지 않는다. 파리는 DAM에로드 된 각각의 튜브에 배치됩니다. 이 장치는 비행 적외선 빔을 중단 횟수를 카운트 적외선 센서가 장착된다. 이 카운트는 교란 운동 및 활동 12,13의 척도로 사용될 수있다. DAM에 파리를 배치하여 자신의 장기 운동에 로테 논의 효과가 특징으로 할 수있다. 이 연구는 MEAS에 대한 방법을 설명합니다URE 단기 나은 로테 논 매개 모터 결함의 영향을 이해하기 위해 운동과 장기 자발 운동 놀라게는 유도. 그들이이 운동 결함을 반대 할 수있는 다른 화합물의 연구를 위해 수 있기 때문에 파킨슨 병을 흉내 낸 운동 부족의 특성이 중요하다.

<table><tbody><tr><td>Standard narrow vials</td><td>Genesee Scientific</td><td>32-120</td><td></td></tr><tr><td>Rotenone</td><td>Sigma</td><td>R8875</td><td>Store in freezer, make fresh for each experiment</td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide (DMSO)</td><td>Sigma</td><td>D8418</td><td>Solvent for rotenone</td></tr><tr><td>Instant Drosophila medium</td><td>Carolina Biological&amp;nbsp;</td><td>Formula 4-24</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila activity monitor (DAM)</td><td>Trikinetics</td><td>DAM2</td><td>trikinetics.com</td></tr><tr><td>DAM tubes</td><td>Trikinetics</td><td>Tubes 5 X 65 mm</td><td></td></tr><tr><td>Recipe for Rotenone + food (125 mM dose)</td><td></td><td></td><td>Make 62.5 mM rotenone stock solution in DMSO by dissolving 25 mg rotenone in 1 ml DMSO; For 125 mM dose, add 10 mM rotenone stock in DMSO to 5 ml water.</td></tr></tbody></table>

methods to characterize spontaneous and startle-induced locomotion in a rotenone-induced parkinson's disease model of drosophila

파킨슨 병은 주로 흑질에서, 중추 신경계에서 도파민 성 뉴런의 변성으로 인한 신경 퇴행성 장애이다. 질병은 인간의 강성, 떨림과 치매로 제시 모터 결함을 발생합니다. 로테 논은 미토콘드리아의 전자 전달계의 기능을 억제함으로써 산화 적 손상을 일으키는 살충제. 또한 초파리 파킨슨 병을 모델링하기 위해 사용된다. 파리 그들을 놀라게되는시 위쪽으로 올라 강요 고유의 부정적인 geotactic 응답을 가지고있다. 그것은 로테 논들이 아래쪽으로 도청 한 후 상승 할 수있는 파리의 능력을 방해 조기 사망률과 운동 결함을 유발한다는 설립되었습니다. 그러나, 자발적인 움직임에 로테 논의 효과는 잘 설명되지 않는다. 이 연구에서 로테 논에 의한 결함의 특성을이 민감한 재현성, 높은 처리량 분석을 설명단기 초파리 운동 및 장기 자발적인 운동을 놀라게은 유도. 이러한 분석법은 편리 운동력 결함 치료제의 효능을 다른 초파리 모델을 특성화하도록 구성 될 수있다.

초파리 놀라게 유도 로코의 분석 야생형, 캔톤-S는, 파리는 30 초 (도 1) 이후 두 번 바이알 장치의 각각 단지 약 88 % 및 상부 및 하부 부분에있는 파리의 5 %와 강력한 geotactic 부정적인 반응을 보였다. 125 μM 3 일간 250 μM의 로테 노출 파리 상부 섹션 및 하부 섹션 파리의 수가 약간 증가 파리의 수가 약간 감소 하였다. 500 μM의 로테 논에 노?...

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Methods to Characterize Spontaneous and Startle-induced Locomotion in a Rotenone-induced Parkinson's Disease Model of Drosophila

파킨슨 병은 운동력 결함을 일으키는 중추 신경계의 도파민 성 뉴런의 변성으로 인한 신경 퇴행성 장애이다. 로테 논 모델 초파리 파킨슨 병. 이 논문은 로테 논으로 인한 자연 및 놀라게 유도 모두 운동 부족의 특성이 분석을 간략하게 설명합니다.

방법은 자발적인 특성화 및 놀라게 유도 로코을의 로테 논에 의한 파킨슨 병 모델에서합니다<em&gt; 초파리</em

Parkinson&#8217;s disease is a neurodegenerative disorder that results from the degeneration of dopaminergic neurons in the central nervous system, ...

methods-to-characterize-spontaneous-startle-induced-locomotion

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Methods to Characterize Spontaneous and Startle-induced Locomotion in a Rotenone-induced Parkinson's Disease Model of Drosophila

10.0K 조회수.  Colby College.  파킨슨 병은 운동력 결함을 일으키는 중추 신경계의 도파민 성 뉴런의 변성으로 인한 신경 퇴행성 장애이다. 로테 논 모델 초파리 파킨슨 병. 이 논문은 로테 논으로 인한 자연 및 놀라게 유도 모두 운동 부족의 특성이 분석을 간략하게 설명합니다. 

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Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of these diseases, including Alzheimer's, Parkinson's and Huntington's disease are characterized by age-dependent deterioration in learning and memory functions and movement coordination2. Here we use behavioral assays, including the negative geotaxis assay3 and the aversive phototaxic suppression assay (APS assay)4,5, to show that some of the behavior characteristics associated with human neurodegeneration can be recapitulated in flies. In the negative geotaxis assay, the natural tendency of flies to move against gravity when agitated is utilized to study genes or conditions that may hinder locomotor capacities. In the APS assay, the learning and memory functions are tested in positively-phototactic flies trained to associate light with aversive bitter taste and hence avoid this otherwise natural tendency to move toward light. Testing these trained flies 6 hours post-training is used to assess memory functions. Using these assays, the contribution of any genetic or environmental factors toward developing neurodegeneration can be easily studied in flies.

Assaying Locomotor, Learning, and Memory Deficits in Drosophila Models of Neurodegeneration

Behavior assays for measuring locomotor functions, learning, and memory abilities in Drosophila.

에 시금 운동력이있는 사람, 학습, 및 메모리 적자 Drosophila</emNeurodegeneration의> 모델

Advances in genetic methods have enabled the study of genes involved in human neurodegenerative diseases using Drosophila as a model system1. Most of ...

연구

신경과학

An Automated Rapid Iterative Negative Geotaxis Assay for Analyzing Adult Climbing Behavior in a Drosophila Model of Neurodegeneration

Neurodegenerative diseases are frequently associated with a progressive loss of movement ability, reduced life span, and age-dependent neurodegeneration. To understand the mechanism of these cellular events, and their causal relationships with each other, Drosophila melanogaster, with its sophisticated genetic tools and diverse behavioral features, are used as disease models for assessing neurodegenerative phenotypes. Here we describe a high-throughput method to analyze Drosophila adult negative geotaxis behavior, as an indication for possible motor defects associated with neurodegeneration. An automated machine is designed and developed to drive fly synchronization using an initial electric impulse, later allowing the recording of negative geotaxis behavior over a course of secs to mins. Images from the digitally recorded video are then processed with the self-designed RflyDetection software for statistical data manipulation. Different from the manually controlled negative geotaxis assay based on single fly, this precise, fast, and high-throughput protocol allows data acquisition from more than hundreds of flies simultaneously, providing an efficient approach to advance our understanding in the underlying mechanism of locomotor deficits associated with neurodegeneration.

An Automated Rapid Iterative Negative Geotaxis Assay for Analyzing Adult Climbing Behavior in a Drosophila Model of Neurodegeneration

This step-by-step protocol analyzes Drosophila negative geotaxis behavior using an automated multi-cylinder system that hosts hundreds of flies and synchronizes their action by an electric motor. Upon synchronization, fly negative geotaxis behavior is assayed, digitally recorded, and analyzed using the self-designed RflyDetection software.

Neurodegeneration의 초파리 모델에서 성인 등반 동작을 분석 하기 위한 자동화 된 신속한 반복 부정적인 Geotaxis 분석 결과

Neurodegenerative diseases are frequently associated with a progressive loss of movement ability, reduced life span, and age-dependent neurodegeneration. ...

행동분석학

Assessing Neurodegenerative Phenotypes in Drosophila Dopaminergic Neurons by Climbing Assays and Whole Brain Immunostaining

Drosophila melanogaster is a valuable model organism to study aging and pathological degenerative processes in the nervous system. The advantages of the fly as an experimental system include its genetic tractability, short life span and the possibility to observe and quantitatively analyze complex behaviors. The expression of disease-linked genes in specific neuronal populations of the Drosophila brain, can be used to model human neurodegenerative diseases such as Parkinson's and Alzheimer's 5.
Dopaminergic (DA) neurons are among the most vulnerable neuronal populations in the aging human brain. In Parkinson's disease (PD), the most common neurodegenerative movement disorder, the accelerated loss of DA neurons leads to a progressive and irreversible decline in locomotor function. In addition to age and exposure to environmental toxins, loss of DA neurons is exacerbated by specific mutations in the coding or promoter regions of several genes. The identification of such PD-associated alleles provides the experimental basis for the use of Drosophila as a model to study neurodegeneration of DA neurons in vivo. For example, the expression of the PD-linked human &alpha;-synuclein gene in Drosophila DA neurons recapitulates some features of the human disease, e.g. progressive loss of DA neurons and declining locomotor function 2. Accordingly, this model has been successfully used to identify potential therapeutic targets in PD 8.
Here we describe two assays that have commonly been used to study age-dependent neurodegeneration of DA neurons in Drosophila: a climbing assay based on the startle-induced negative geotaxis response and tyrosine hydroxylase immunostaining of whole adult brain mounts to monitor the number of DA neurons at different ages. In both cases, in vivo expression of UAS transgenes specifically in DA neurons can be achieved by using a tyrosine hydroxylase (TH) promoter-Gal4 driver line 3, 10.

Assessing Neurodegenerative Phenotypes in Drosophila Dopaminergic Neurons by Climbing Assays and Whole Brain Immunostaining

Here we describe two assays that have been established to study age-dependent neurodegeneration of dopaminergic (DA) neurons in Drosophila: the climbing/startle-induced negative geotaxis assay which allows to study the functional effects of DA neurons degeneration and the tyrosine hydroxylase immunostaining which is used to identify and count DA neurons in whole brain mounts.

에 신약 표현형을 평가<em&gt; 초파리</em&gt; 등산 분석 실험에 의한 도파민 뉴런과 뇌 전체의 면역 염색

Drosophila melanogaster is a valuable model organism to study aging and pathological degenerative processes in the nervous system. The advantages of the ...

Fully Automated Leg Tracking in Freely Moving Insects using Feature Learning Leg Segmentation and Tracking (FLLIT)

The Drosophila model has been invaluable for the study of neurological function and for understanding the molecular and cellular mechanisms that underlie neurodegeneration. While fly techniques for the manipulation and study of neuronal subsets have grown increasingly sophisticated, the richness of the resultant behavioral phenotypes has not been captured at a similar detail. To be able to study subtle fly leg movements for comparison amongst mutants requires the ability to automatically measure and quantify high-speed and rapid leg movements. Hence, we developed a machine-learning algorithm for automated leg claw tracking in freely walking flies, Feature Learning-based Limb segmentation and Tracking (FLLIT). Unlike most deep learning methods, FLLIT is fully automated and generates its own training sets without a need for user annotation, using morphological parameters built into the learning algorithm. This article describes an in depth protocol for carrying out gait analysis using FLLIT. It details the procedures for camera setup, arena construction, video recording, leg segmentation and leg claw tracking. It also gives an overview of the data produced by FLLIT, which includes raw tracked body and leg positions in every video frame, 20 gait parameters, 5 plots and a tracked video. To demonstrate the use of FLLIT, we quantify relevant diseased gait parameters in a fly model of Spinocerebellar ataxia 3.

Fully Automated Leg Tracking in Freely Moving Insects using Feature Learning Leg Segmentation and Tracking FLLIT

We describe detailed protocols for using FLLIT, a fully automated machine learning method for leg claw movement tracking in freely moving Drosophila melanogaster and other insects. These protocols can be used to quantitatively measure subtle walking gait movements in wild type flies, mutant flies and fly models of neurodegeneration.

기능 학습 다리 세분화 및 추적 (FLLIT)를 사용하여 자유롭게 움직이는 곤충에서 완전 자동화 된 다리 추적

The Drosophila model has been invaluable for the study of neurological function and for understanding the molecular and cellular mechanisms that underlie ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

의 자발적인 운동 활성의 결정<em&gt; 초파리</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

A Low-cost Method for Analyzing Seizure-like Activity and Movement in Drosophila

Video tracking systems have been used widely to analyze Drosophila melanogaster movement and detect various abnormalities in locomotive behavior. While these systems can provide a wealth of behavioral information, the cost and complexity of these systems can be prohibitive for many labs. We have developed a low-cost assay for measuring locomotive behavior and seizure movement in D. melanogaster. The system uses a web-cam to capture images that can be processed using a combination of inexpensive and free software to track the distance moved, the average velocity of movement and the duration of movement during a specified time-span. To demonstrate the utility of this system, we examined a group of D. melanogaster mutants, the Bang-sensitive (BS) paralytics, which are 3-10 times more susceptible to seizure-like activity (SLA) than wild type flies. Using this novel system, we were able to detect that the BS mutant bang senseless (bss) exhibits lower levels of exploratory locomotion in a novel environment than wild type flies. In addition, the system was used to identify that the drug metformin, which is commonly used to treat type II diabetes, reduces the intensity of SLA in the BS mutants.

A Low-cost Method for Analyzing Seizure-like Activity and Movement in Drosophila

Using a webcam and a combination of free and inexpensive software programs, locomotive patterns in Drosophila melanogaster can be analyzed to detect differences in the speed, distance, and time of various motor activities.

발작과 같은 활동을 분석하고 운동을위한 저가의 방법<em&gt; 초파리</em

Video tracking systems have been used widely to analyze Drosophila melanogaster movement and detect various abnormalities in locomotive behavior. While ...

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and diverse behavioral features. Identifying behavioral deficiency in animal models is a crucial measure of disease severity, for example, in neurodegenerative diseases where patients often experience impairments in motor function. However, with the availability of various systems to track and assess motor deficits in fly models, such as drug-treated or transgenic individuals, an economical and user-friendly system for precise evaluation from multiple angles is still lacking. A method based on the AnimalTracker application programming interface (API) is developed here, which is compatible with the Fiji image processing program, to systematically evaluate the movement activities of both adult and larval individuals from recorded video, thus allowing for the analysis of their tracking behavior. This method requires only a high-definition camera and a computer peripheral hardware integration to record and analyze behavior, making it an affordable and effective approach for screening fly models with transgenic or environmental behavioral deficiencies. Examples of behavioral tests using pharmacologically treated flies are given to show how the techniques can detect behavioral changes in both adult flies and larvae in a highly repeatable manner.

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

The present protocol assesses the locomotor activity of Drosophila by tracking and analyzing the movement of flies in a hand-made arena using open-source software Fiji, compatible with plugins to segment pixels of each frame based on high-definition video recording to calculate parameters of speed, distance, etc.

초파리에서 운동 활동을 분석하는 간단한 기술

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and ...

Acquisition of High-Quality Digital Video of Drosophila Larval and Adult Behaviors from a Lateral Perspective

Drosophila melanogaster is a powerful experimental model system for studying the function of the nervous system. Gene mutations that cause dysfunction of the nervous system often produce viable larvae and adults that have locomotion defective phenotypes that are difficult to adequately describe with text or completely represent with a single photographic image. Current modes of scientific publishing, however, support the submission of digital video media as supplemental material to accompany a manuscript. Here we describe a simple and widely accessible microscopy technique for acquiring high-quality digital video of both Drosophila larval and adult phenotypes from a lateral perspective. Video of larval and adult locomotion from a side-view is advantageous because it allows the observation and analysis of subtle distinctions and variations in aberrant locomotive behaviors. We have successfully used the technique to visualize and quantify aberrant crawling behaviors in third instar larvae, in addition to adult mutant phenotypes and behaviors including grooming.

Acquisition of High-Quality Digital Video of Drosophila Larval and Adult Behaviors from a Lateral Perspective

Here we describe a simple and widely accessible microscopy technique to acquire high-quality digital video of Drosophila adult and larval mutant phenotypes from a lateral perspective.

의 고품질의 디지털 비디오 취득<em&gt; 초파리</em&gt; 측면 관점에서 애벌레 및 성인 동작

Drosophila melanogaster is a powerful experimental model system for studying the function of the nervous system. Gene mutations that cause dysfunction of ...

Quantitative Analysis of Climbing Defects in a Drosophila Model of Neurodegenerative Disorders

Locomotive defects resulting from neurodegenerative disorders can be a late onset symptom of disease, following years of subclinical degeneration, and thus current therapeutic treatment strategies are not curative. Through the use of whole exome sequencing, an increasing number of genes have been identified to play a role in human locomotion. Despite identifying these genes, it is not known how these genes are crucial to normal locomotive functioning. Therefore, a reliable assay, which utilizes model organisms to elucidate the role of these genes in order to identify novel targets of therapeutic interest, is needed more than ever. We have designed a sensitized version of the negative geotaxis assay that allows for the detection of milder defects earlier and has the ability to evaluate these defects over time. The assay is performed in a glass graduated cylinder, which is sealed with a wax barrier film. By increasing the threshold distance to be climbed to 17.5 cm and increasing the experiment duration to 2 min&#160;we have observed a greater sensitivity in detecting mild mobility dysfunctions. The assay is cost effective and does not require extensive training to obtain highly reproducible results. This makes it an excellent technique for screening candidate drugs in Drosophila mutants with locomotion defects.

We present an optimized inexpensive and reliable negative geotaxis assay in Drosophila melanogaster as a model for neurodegenerative disorders. Being more sensitive to mild locomotor defects, this assay will help screen for potential genetic interactions and drug targets.

퇴행성 신경 질환의 초파리 모델에서 등반 결함의 정량 분석

Locomotive defects resulting from neurodegenerative disorders can be a late onset symptom of disease, following years of subclinical degeneration, and ...

Drosophila Flies의 변비 분석

Measuring Constipation in a Drosophila Model of Parkinson's Disease

Non-motor symptoms in Parkinson's disease (PD) are common, difficult to treat, and significantly impair quality of life. One prevalent non-motor symptom is constipation, which can precede the diagnosis of PD by years or even decades. Constipation has been underexplored in animal models of PD and lacks specific therapies. This assay utilizes a Drosophila model of PD in which human alpha-synuclein is expressed under a pan-neuronal driver. Flies expressing alpha-synuclein develop the hallmark features of PD: the loss of dopaminergic neurons, motor impairment, and alpha-synuclein inclusions.
This protocol outlines a method for studying constipation in these flies. Flies are placed on fly food with a blue color additive overnight and then transferred to standard food the following day. They are subsequently moved to new vials with standard fly food every hour for 8 h. Before each transfer, the percentage of blue-colored fecal spots compared to the total fecal spots on the vial wall is calculated. Control flies that lack alpha-synuclein expel all the blue dye hours before flies expressing alpha-synuclein. Additionally, the passage of blue-colored food from the gut can be monitored with simple photography. The simplicity of this assay enables its use in forward genetic or chemical screens to identify modifiers of constipation in Drosophila.

저자 스포트라이트: 파킨슨병의 비운동 증상 탐구 

This protocol presents an assay for modeling constipation in an alpha-synuclein based Drosophila model of Parkinson's disease.

파킨슨병의 초파리 모델에서 변비 측정

Non-motor symptoms in Parkinson's disease (PD) are common, difficult to treat, and significantly impair quality of life. One prevalent non-motor symptom ...

방법은 자발적인 특성화 및 놀라게 유도 로코을의 로테 논에 의한 파킨슨 병 모델에서합니다

요약

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이 비디오의 챕터

에 시금 운동력이있는 사람, 학습, 및 메모리 적자 Drosophila 모델

Neurodegeneration의 초파리 모델에서 성인 등반 동작을 분석 하기 위한 자동화 된 신속한 반복 부정적인 Geotaxis 분석 결과

에 신약 표현형을 평가

기능 학습 다리 세분화 및 추적 (FLLIT)를 사용하여 자유롭게 움직이는 곤충에서 완전 자동화 된 다리 추적

의 자발적인 운동 활성의 결정

발작과 같은 활동을 분석하고 운동을위한 저가의 방법

초파리에서 운동 활동을 분석하는 간단한 기술

의 고품질의 디지털 비디오 취득

퇴행성 신경 질환의 초파리 모델에서 등반 결함의 정량 분석

파킨슨병의 초파리 모델에서 변비 측정