요로 기능 검사를 위한 성인 남성 요로의 초음파 검사

이 프로토콜은 고주파 초음파 를 사용하여 방광의 변화를 평가하고 쥐의 요로를 낮춥니다. 이 기술은 해부학적 및 생리적 측정을 위해 생체 내의 요로의 세로 검사를 허용하고 요로 흐름을 측정하기위한 다른 기술에 보완적입니다. 인간 비뇨기과 질환의 측면을 재구성 하는 설치류 모델의 생체 무효 변화를 평가 하는 능력은 질병 진행 및 치료 효능에 대 한 통찰력을 제공할 수 있습니다.

먼저 30메가헤르츠의 중심 주파수를 초음파 시스템의 활성 포트에 연결하고 복부 이미징에 적용을 미리 설정하여 시작합니다. 최적의 콘트라스트 향상을 위해, 용액의 마이크로버블을 캡슐화하기 위해 45초 동안 소용돌이 믹서에 적절한 조영제를 흔들어 보겠습니다. 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 가열 된 플랫폼에 supine 위치에 마취 24 주 된 C57 블랙 6 남성 마우스를 배치하고 복부에서 머리를 면도.

탈모 크림으로 남은 모발을 제거하고 방광의 긴 축에 평행하게 초음파 프로브를 배치합니다. 그런 다음 XY 조작기를 사용하여 필요에 따라 마우스를 이동하고 방광의 길고 짧은 축 이미지를 얻습니다. 이미징하기 전에 피부와 복벽을 통해 중간 절개를 하여 방광을 노출하고 유연한 폴리에틸렌 튜브를 식염수로 미리 채웁니다.

그런 다음 27 게이지 바늘이 장착 된 주사기를 튜브 조각에 연결하고 바늘을 방광에 삽입하십시오. 바늘의 정확한 배치를 확인하려면 식염수 10 마이크로 리터를 방광에 주입하십시오. 식염수 주사기를 소용돌이 조영제를 함유한 주사기로 교체하고 카테터화된 방광의 또 다른 B 모드 이미지를 수집합니다.

요도 직경의 측정을 용이하게하기 위해 배뇨 이벤트가 발생할 때까지 3 초 동안 마이크로 버블의 0.5 밀리리터 볼루스를 방광에 주입하십시오. 속도의 측정을 용이하게하기 위해, 소변 흐름에 평행할 때까지 도플러 샘플 창 각도를 수정하고 방광에 마이크로 버블의 두 번째 볼러스를 주입. 그런 다음 전체 방광의 3D 이미지를 수집합니다.

모든 이미지를 얻을 때 방광 벽의 내부 가장자리로 외부를 추적하고 선형 거리 측정 도구를 사용하여 방광을 측정합니다. 방광 벽의 내부를 추적하기 위해 볼륨 도구를 사용하여 윤곽을 만듭니다. 그런 다음 방광의 두께를 통해 여러 윤곽을 생성하여 3D 획득 모드에서 방광의 양을 계산할 수 있습니다.

첫 번째 보이드 이벤트의 경우 선형 거리 도구를 사용하여 도플러 속도 샘플 창의 지점에서 요도 직경 가장자리를 가장자리로 측정합니다. 첫 번째 무효화 이벤트의 경우 속도 시간 일체형 도구를 사용하여 요도 속도를 측정합니다. 여기서, 조영제 없이 취득된 마우스 방광의 대표적인 초음파 이미지가 표시됩니다.

방광 벽은 반향과 방광 벽 두께는 소프트웨어 측정 패키지를 사용하여 측정 될 수있다. 방광 크기와 모양은 방광 부피를 결정하기 위해 3D로 렌더링될 수 있습니다. 여기서, 마이크로버블 채워진 에코제닉 방광의 대표적인 이미지가 나타난다.

저주파 초음파 파열 후, 거품이 파괴되고 방광은 방광으로 구조를 확인하는 거품 개혁 전에 일시적으로 반향된다. 배뇨 이벤트 동안, 요도 루멘 직경은 요도의 해당 영역을 통과하는 소변의 흐름 속도와 함께 배뇨 중에 획득할 수 있다. 치장 이미징을 사용하여 지름 측정은 요도의 전체 가시 길이 전반에 걸쳐 이루어질 수 있습니다.

이러한 측정에서, 추가 계산은 오줌 흐름 및 방광 준수를 평가하기 위하여 할 수 있습니다. 조영제를 올바르게 활성화하는 것은 이 프로토콜의 성공에 필수적입니다. 우리는 초음파 유동을 확인하고 비뇨기과 유동 역학 및 3D 재건의 새로운 복잡한 모델을 소개하기 위해 MRI 및 마이크로 컴퓨터 단층 촬영으로 설치류 요로를 재구성 할 수 있습니다.

우리는 이 기술을 사용하여 하부 요로 질환의 모델, 노화의 효과 및 요로 기능에 대한 치료 치료의 효능을 정량적으로 검사하기 시작했습니다.