단부 DINeC로 호출하는 중립 SO2 클러스터에 의해 유도된 탈광 이온화는 부드럽고 효율적인 탈착 이온화 방법입니다. 우리는 펩티드와 단백질과 같은 생체 분자의 질량 분광법을 위해 다른 사람들 사이에서 그것을 사용합니다. DINeC로, 샘플 표면에서 그대로 탈착 분자, 이러한 분자에 미묘한 화학 적 변화는 쉽게 질량 스펙트럼에서 검출된다.
이 프로세스는 다음 시뮬레이션에 설명되어 있습니다. 들어오는 클러스터는 클러스터 내 표면 충격을 통해 산산조각이 나아옵니다. 표면 동위원소 디펩티드는 클러스터 단편 중 하나에 용해되고 이 공정에 의해 탈포된다.
실험에서, SO2 클러스터의 빔은 펄스 노즐에서 초음속 확장을 통해 생성된다. 클러스터 표면 충격 중에 용해되고 이온화된 분자는 질량 분광법을 위해 이온 트랩으로 전달됩니다. 일반적인 질량 스펙트럼은 그대로 분자의 MO 집합 값에서 만 피크를 표시합니다.
절차를 시연하는 것은 카롤린 봄하르트와 내 실험실에서 박사 과정 학생 두 명인 파스칼 슈나이더가 될 것입니다. 표준 샘플의 경우, 실리콘 웨이퍼의 두께가 약 0.5~1밀리미터로 1평방센티미터단위로 기판을 잘라냅니다. 에탄올과 아세톤의 초음파 욕조에서 실리콘 기판을 각각 15분 간 청소합니다.
건조 질소 가스의 스트림에서 기판을 건조. 이어서, 기판상에 시료 용액의 5~30마이크로리터를 낙하한다. 용매의 증기 압력에 따라, 모든 용매가 증발되고 건식 필름이 형성될 때까지 주변 조건이나 건조기하에서 시료를 건조하게 한다.
가장 간단한 준비 체계를 고려하십시오. 예를 들어, 하이라이터 잉크의 조사를 위해 기판 표면에 점을 그립니다. 샘플 홀더에 끈적끈적한 테이프 또는 나사로 조여진 클램프를 장착하여 시료를 장착합니다.
또한 샘플 홀더에 안지오텐신 II의 마이크로미터 두께 필름과 같은 기준 샘플을 장착합니다. 그런 다음 벤트 로드 잠금을 눌러 로드 잠금 시스템을 배출합니다. 5분 간 기다린다.
로드 잠금을 열고 샘플 홀더를 장착합니다. 하중 잠금을 닫고 하중 잠금 챔버를 2배 10배 이하의 압력으로 펌프하여 음수 5밀리바에 넣습니다. 디네C 챔버에 밸브를 열고 주요 조작기로 전송 로드와 샘플 홀더를 전송합니다.
샘플 홀더를 조작기에 연결합니다. 이송 로드를 철회하고 로드 잠금 장치와 DINeC 챔버 사이의 밸브를 닫습니다. 가스 실린더와 노즐 사이에 밸브를 엽니다.
가스 혼합 시스템의 윤곽선에서 이산화황 및 헬륨 가스 혼합물의 압력을 15 bar로 조정합니다. 조작기의 위치를 참조 샘플의 위치로 설정합니다. 양이온 질량 스펙트럼을 측정하기 위해 샘플 및 그리드 바이어스를 각각 40볼트와 7볼트로 설정합니다.
펄스 노즐과 이온 트랩 질량 분광기를 구동하려면 외부 기능 발생기를 두 Hertz로 설정합니다. 지연 발생기를 사용하면 이온 트랩의 명확한 트랩 신호와 펄스 노즐의 트리거 신호 사이의 시간 지연을 5밀리초로 설정합니다. 브루커 제어 소프트웨어에서 기본 대화 창의 모드 페이지에서 스캔 모드에 대한 향상된 해상도를 선택합니다.
M 을 통해 Z 50 ~ 3000 범위, 축적 시간 0.1 밀리초입력, 평균 10 사이클에 입력하고, 극성, 음극 스펙트럼의 측정을 위해 양수 질량 스펙트럼 및 음수의 측정을 위해 양성을 선택한다. DINeC 챔버에서 음수 6 밀리바에 대한 3배 10배 이하의 압력이 도달하면 측정을 시작합니다. 시간 종속 크로마토그램 신호를 따르기 위해 Z 값을 각 질량으로 설정합니다.
제어 소프트웨어에서 작동을 누릅니다. 레코드 버튼을 눌러 측정 기록을 시작합니다. 안지오텐신 II와 같은 기준 샘플에서 약 300초 동안 테스트 스펙트럼을 측정합니다.
명확한 트랩 신호와 펄스 노즐을 트리거하는 신호 사이의 시간 지연을 조정하여 신호 강도를 최적화합니다. 시간 지연이 최적화되면 조작기를 측정할 시료의 위치로 이동합니다. 레코드 버튼을 클릭하여 관심 기간 동안 질량 스펙트럼을 획득합니다.
측정이 완료되면 참조 측정을 위해 여기에 표시된 대로 데이터 분석 프로그램에서 각각의 데이터 세트를 로드합니다. 마우스의 오른쪽 버튼으로 크로마토그램에 관심 있는 시간을 선택합니다. 평균 스펙트럼은 별도의 창에 표시됩니다.
ASCII 파일로 내보내기를 클릭하여 선택한 프로그램에서 추가 처리를 위해 스펙트럼을 데이터 파일로 내보냅니다. 안지오텐신 II 샘플의 DINeC 질량 스펙트럼은 샘플이 섭씨 약 140도로 가열됨에 따라 시간이 지남에 따라 변경되었습니다. 온도가 최종 값에 도달하면, Z와 동등한 M에서 공격 된 protinated 분자의 피크가 떨어졌다 1047 새로운 피크가 관찰되었다.
이 프로세스는 이 세 가지 그래프로 요약됩니다. M 의 추가 피크는 932, 1012 및 1029와 동등한 Z 를 통해 잘 관찰되었다. 반응 역학의 분석은 M 이상의 Z와 동일한 1029를 가진 실체가 강도가 처음 증가하고 감소함에 따라 더 작은 조각으로 분해된 중간체임을 보여줍니다.
DINeC의 가장 중요한 특징은 탈착 공정의 부드러운 특성, 효율성 및 높은 표면 감도입니다. 그들은 모두 샘플 준비와 관련하여 낮은 요구 사항과 함께 제공됩니다. 따라서 DINeC는 유기 껍질 재료에서 하위 단층 영역의 복잡한 표면 흡착제에 이르기까지 다양한 다양한 샘플에 적용될 수 있습니다.
모든 경우에, 전체 화학 정보는 실시간으로 얻을 수 있습니다.
