CRPS의 기본 메커니즘은 여전히 불분명합니다. CRPS를 모방하는 전임상 동물 모델을 확립하는 것은 CRPS I.Rat CPIP 모형이 초기 단계에서 뒤늦은 부종 및 고혈증을 포함하는 simitance를 좋아하는 많은 CRPS를 전시하는 데 중요할 것입니다. 모델 설립 후, 지속적인 열 및 기계적 과민성 다음에.
페노바르비탈 나트륨으로 모든 쥐를 마취하는 것으로 시작합니다. 쥐가 뒷발이나 꼬리를 집게로 꼬집어 제대로 마취했는지 확인하십시오. 그리고 눈에 수의사 연고를 배치합니다.
절차 중에 37도 섭씨 가열 패드에 쥐를 유지합니다. 글리세롤로 오른쪽 뒷발과 발목을 윤활합니다. 그런 다음 니틀릴 70 durometer O 링을 1점 5 밀리리터 튜브의 더 큰 면으로 밀어 넣고 스냅 캡이 잘려나갑니다.
뒷발을 바닥에 닿을 때까지 중공 튜브에 조심스럽게 삽입합니다. 점차적으로 발목 관절 근처 오른쪽 뒷다리튜브에서 O 링을 밀어 넣습니다. 그리고 3 시간 동안 거기에 둡니다.
허혈을 유도해서는 안 되는 깨진 O 링을 제외하고, 쥐의 샴 그룹에 동일한 치료를 적용하십시오. 3 시간 후, O 링을 잘라 그것은 흉골 억제를 유지하기에 충분한 의식을 회복 할 때까지 쥐를 모니터링. 쥐가 마취에서 완전히 회복 될 때까지 다른 쥐의 회사에 쥐를 두지 마십시오.
메쉬 바닥에 투명 플렉시 글라스 챔버에 쥐를 놓고, 어떤 행동 테스트 전에 30 분 동안 환경에 쥐를 습관화. 폰 프레이 필라멘트를 사용하여 기계식 알로디니아용 쥐를 테스트합니다. 뒷발의 중간 발바닥 표면에 수직으로 적용하여 중간 필라멘트에서 테스트를 시작합니다.
필라멘트를 최대 5초 동안 구부리려면 적절한 힘을 발휘합니다. 발의 갑작스런 철회는 불복갑시동작으로 간주됩니다. 13일까지 3일, 2일, 1일, 격일로 기계적 알로디니아 테스트를 실시합니다.
임계값및 50%의 발 철수 임계값을 계산하기 위한 딕슨 방법을 테스트하기 위해 위아래 테스트 방법을 적용합니다. 열 과다 증에 대 한 테스트 하려면, 직접 50 와트 전구에서 나오는 광선을 목표로 하그리브스 방법을 사용 하 브 라 브 를 사용 하 여 뒷발. 과도한 부상을 피하기 위해 20초를 컷오프 임계값으로 설정하여 발 철수 대기 시간을 측정합니다.
각 뒷드 발에 대해 5분 간격으로 각 테스트를 세 번 반복하고 발 철수 대기 시간으로 평균을 복용합니다. 13일까지 3일, 2일, 1일, 격일로 열과간 검사를 실시합니다. capsaicin 유도 급성 nocifensive 거 동에 대 한 테스트 하려면, DMSO와 200 밀리머 캡사이신 재고 솔루션을 준비 하 고 더 주입에 대 한 PBS에 1~ 1, 000 희석.
Capsaicin은 시약, 피부, 눈, 호흡에 관절 자극을 일으킬 수 있는. 캡사이신 솔루션을 준비할 때 마스크와 고글을 착용하는 것이 중요합니다. 그런 다음 1 밀리리터 주사기에 부착된 30 게이지 바늘을 사용하여 캡사이신 또는 차량의 마이크로리터 50개를 뒷발로 주입합니다.
주입된 발을 핥기, 물기 또는 주사 후 10분 동안 비디오 카메라를 사용하여 주사된 발의 플랑크와 같은 불시한 동작을 기록합니다. 모델 설립 후 15분, 24시간, 48시간, 72시간으로 발 직경의 증가를 측정하여 뒷발 부종을 평가한다. 발목에 O 링을 배치 한 후, ipsilateral 뒷발 피부는 조직 저산소증의 표시인 시안색을 보였다.
O 링을 절단 한 후, 발은 혈액으로 채우기 시작하고 강렬한 충혈증을 나타내는 강력한 붓기를 보였다. 붓기는 점차적으로 감소하고 절차 후에 정상 48 시간으로 돌아왔습니다. 모델 설립 후 하루 만에 CPIP 그룹의 ipsilateral hind paw는 관찰 시간 프레임의 13 일 동안 지속된 명백한 기계적 알로디니아를 전시했습니다.
CPIP 그룹의 반대쪽 뒷발은 또한 13 일 동안 기계적인 과간증을 표시했습니다. 열 과진증을 측정했을 때, CPIP 쥐의 양측 뒷발은 가짜 그룹 쥐에 비해 유해열 자극에 대응하여 인출 대기 시간을 현저히 감소시켰습니다. ipsilateral hind 발의 열 과진증은 관측 시간 프레임의 끝까지 지속된 반면, 반대로 힌드 발의 열 과간증은 7 일 동안 지속되었습니다.
sham 및 CPIP 그룹은 capsaicin 주입을 가진 nocifensive 행동에 대 한 테스트 했다. 차량을 주입했을 때, sham 그룹은 약간의 향응반응을 보였고 CPIP 그룹은 상당히 높은 반응을 보였다. 더 중요한 것은, CPIP 쥐는 샴 그룹 보다는 capsaicin 주입에 상당히 더 높은 반응을 보여주었습니다, 이는 CPIP 쥐가 이 절차 I.By CRPS를 가진 인간 적인 환자와 유사한 현상을 전시한다는 것을 건의합니다, 쥐는 모형 설치 의 전과 도중 마취된다.
허혈과 인간 CRPS에 의해 설립 된이 프로토콜에 설명 된 CPIP 쥐 모델은 시뮬레이션을 좋아한다. 이러한 모델의 가족, CRPS에 대 한 더 많은 메커니즘을 탐구 할 수 있습니다.
