쥐의 작은 창자를 대상으로: 우수한 장막 동맥에 장기 주입

쥐의 우수한 막질 동맥 통조림은 어렵고 실험 모델로 자주 사용되지 않습니다. 이 기술은 기능적 캐너레이션을 수행할 수 있게 하고 동맥 내 약물의 첫 번째 통과 효과로 실험 분야를 열어줍니다. 이 방법은 우수한 장막 동맥의 캐니언에 동의하면서 출혈과 혈전증을 피합니다.

그리고 먹고 움직일 수있는 비교적 자유로운 동물에서 약물의 장기 주입을 허용합니다. 장내 활성 약물에 대한 약리학 연구는이 기술의 혜택을 크게 누릴 수 있습니다. 약물의 직접적인 단일 통과의 효과를 연구하는 대안은 없습니다.

큰 캐뉼라를 자르는 것으로 시작합니다. 그런 다음 작은 캐뉼라를 자르고 1센티미터를 더 큰 캐뉼라에 삽입합니다. 루멘의 폐색을 피하는 시아노아크라일트 접착제와 함께 두 캐뉼러를 고정합니다.

그 후, 더 큰 캐뉼라의 자유로운 단면과 식염수 용액으로 채워진 1 밀리리터 주사기에 장착된 루어 스텁 어댑터에 연결합니다. 우수한 장막 동맥의 가지에 카테터의 삽입을 용이하게하기 위해 가위로 작은 캐뉼라의 무료 팁을 선명하게. 식염수 용액으로 플러시하여 캐뉼라의 패실을 확인하십시오.

우수한 장간 동맥 또는 SMA 캐뉼레이션의 가지에 대한 복부를 포함하여 마취 된 쥐의 수술 부위에서 모피를 면도하고, 캐뉼라 출구를위한 목 의 뒤쪽. 수술 부위를 무균으로 청소하십시오. 그리고 4 개의 사지를 고정시키는 척추 위치에 동물을 놓습니다.

메스 블레이드를 사용하여 복막으로 모든 복부 평면을 통해 메소 위 영역의 중간에 직선 3 센티미터 절개와 복벽을 엽니 다. 복강경 절개 주위에 식염수 용액에 담근 거즈를 놓고 봉합사를 사용하여 외과 절개를 열어 둡니다. 면 봉면을 사용하여 소장을 식별하고 노출시키고, 복강경 절단에서 장간을 추출하여 거즈 위에 내려 놓습니다.

맥동을 통해 SMA를 식별합니다. 면 봉면을 사용하여 장간 지방을 분리하고 SMA와 근해 가지의 2 ~3 개를 발견하십시오. 캐닝의 수술 기동을 허용하기에 충분히 큰 SMA의 근위 가지를 선택합니다.

이 분기를 원점에서 3~4센티미터 다운스트림으로 묶어 봉합사 끝을 나중에 조작할 수 있을 만큼 길게 유지하여 확장이 가능합니다. SMA의 가지 아래에 경직된 지지대를 배치하고 집게를 사용하여 작은 캐뉼라의 사지를 잡고 다른 손으로 봉합사 끝을 당겨 용기를 변형시키고 카테터의 진입을 용이하게합니다. 혈관 의 끝을 혈류와 반대 방향으로 혈관의 평면에서 20도 각도로 잡습니다.

그런 다음 팁을 가볍게 눌러 동맥 벽을 관통하고 캐뉼라를 삽입합니다. SMA의 기원에 가까운 동맥 가지에서 1센티미터 동안 캐뉼라 삽입을 계속합니다. 캐뉼라를 수술 매듭으로 동맥에 고정하고 멸균 식염수 용액 1 밀리리터를 플러시하거나 혈액 샘플링하여 올바른 기능을 확인합니다.

목의 후방 영역에서 1센티미터 절개를 하고 구형 밸브를 수용합니다. 그런 다음 카테터 플러그로 목에 놓인 밸브에 대한 복강경 접근에서 캐뉼라를 통과합니다. 복강내의 작은 판막을 교체하고 복벽을 닫습니다.

그런 다음 바늘로 다음 피부에 밸브를 고정하십시오. 버튼 밸브를 보호하기 위해 재킷으로 쥐를 드레스. 주입 하는 동안 강철 막대와 캐뉼러의 노출 된 부분을 보호 하 고 밸브에 고정.

캐뉼라의 황사 단경을 멸균 식염수 용액 50밀리리터로 채워진 탄성 펌프에 연결하고 24시간 동안 주입을 진행합니다. 주입 후, 펌프, 재킷, 강철 막대 및 랫트에서 밸브를 제거하여 동물의 외부 주입 시스템을 분해합니다. 캐뉼라를 목에서 꺼내서 잘라내고, 상처 봉합사 후 목 피부 밑에 사지를 남깁니다.

이 연구에서는, 15 마리의 쥐는 이 절차를 거쳤고 3 일 후에 정상까지 평균 일일 음식과 물 섭취량이 점진적으로 증가했습니다. 체중 증가는 또한 규칙적이고 점차적으로 관찰 기간의 끝까지 증가했다. 24시간 후, 두 개의 풍선 펌프에 식염수 잔류물이 있었고, 나머지 13개는 완전히 비어 있었습니다.

더욱이, 주입 기간 이후에, 12 개의 칸누아는 혈액 샘플링과 식염수 주입 모두에 대해 여전히 작동했으며, 3 개의 캐뉼은 더 이상 특허가 아니었습니다. 부검에서, 칸누아의 100 %는 SMA 지점에 위치했다. 그리고 어떤 쥐도 창자 허혈 또는 복부 출혈의 징후가 없었다.

혈관 조영술은 장막 수분에 io기증 된 대비 배지를 주입하여 5 마리의 쥐에서 수득하였다. 간질 동맥 원, 특히 SMA및 주요 가지는 복부에 항문 배지확산 없이 관찰되었으며, 캐뉼라가 SMA의 가지에 잘 배치되고 고정되어 있음을 확인하였다. 특허, 선박 아래 봉합사를 통과하 고 구멍을 뚫고 캐뉼라를 삽입하는 가장 적합한 위치를 선택하는 선박하류의 합자를 캐너레이하는 분기의 세심한 황폐는 이 프로토콜의 가장 중요한 측면이다.

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