기관 절제술을 통해 동맥 내 혈압 모니터링 및 환기를 사용하여 마우스에서 뇌 사멸 유도

기증자 두뇌 죽음 후에 기증은 고체 기관 이식을 위한 주요 근원이더라도, 두뇌 기능의 돌이킬 수 없는 손실은 전신 선동적인 반응으로 이끌어 내는 병리생리학적 인 변경을 유도합니다. 뇌 사멸 유도의이 뮤린 모델은 뇌 죽음 조절의 경로를 연구하기 위해 분석 도구와 녹아웃 모델의 큰 다양성을 사용할 수 있습니다. 페달 반사에 대한 반응의 부족을 확인하고 상복부 모발을 제거 한 후 동맥 카테터화의 경우, 70 %에탄올로 노출 된 피부를 소독하고 해부 가위를 사용하여 피부에 중간 선 개개를 만듭니다.

집게를 사용하여, 무딘 하복부 땀샘과 목 근육 조직을 해부하고 일반적인 경동맥을 드러내기 위하여 조직을 분리합니다. 세 가지 8-0 배치 오른쪽 일반적인 경동맥 아래에 실크 합자 및 근위 합자에 클램프를 배치합니다. 흐름이 일시 중단되도록 동맥에 긴장을 가져와 서 가장 단면 합자 닫습니다.

절개의 두개골 측면에 작은 미리 형성 된 피부 구멍을 통해 26 게이지 동맥 카테터를 삽입합니다. 루멘이 너무 커서 역류를 줄이고 세 봉합사로 카테터를 고정한 다음, 흡수할 수 없는 5-0 모노필라멘트를 사용하여 미리 형성된 피부 구멍 근처의 피부에 카테터를 고정시십시오. 기관 절제술을 수행하려면 집게를 사용하여 정차 성 근육을 무디게하고 두 개의 8-0을 배치합니다. 기관 아래에 실크 합자.

두 기관 연골 사이에 환기 튜브를 삽입하여 일방적인 환기를 피하고 준비된 합자 로 튜브를 고정한 다음 6-0 monofilament 비흡수성 달리기 봉합사로 피부를 닫고 분당 150개의 주파수와 200 마이크로리터의 조력 부피로 마우스를 환기시하십시오. 실험동물에서 뇌사를 유도하기 위해 마우스를 경향이 있는 자세로 배열하고, 포셉으로 피부를 잡고, 외과 가위를 사용하여 두개골에서 피부를 제거합니다. 1밀리미터 의 캘리퍼 시추공을 왼쪽 정수리 피질 위로 심하게 뚫고 무딘 집게를 사용하여 두개골의 최종 조직 다리를 관통합니다.

날카로운 가장자리를 제거한 후, 모든 공기가 대피한 식염수로 미리 채워진 풍선 카테터를 삽입합니다. 카테터가 완전히 두개골 구멍 내에 있는 경우 주사기 펌프를 사용하여 10~15분 동안 분당 약 0.1밀리미터로 카테터를 팽창시 시작합니다. 뇌사가 발생하면 풍선 카테터의 인플레이션을 멈추고 저체온증을 피하기 위해 마우스 위에 가열 담요를 놓습니다.

뇌 사망이 확인된 후, 정기적으로 혈압을 모니터링하고 문서화하여 30분마다 100마이크로리터의 식염수를 주입하여 동물의 혈압을 안정시합니다. 뇌 사멸 4 시간 후, 심장을 구타하지 않고 동물을 배제하고 표준 프로토콜에 따라 마우스 장기와 관심의 조직을 수확. 뇌-죽음 유도 후, 혈압은 장기간 된 저혈압 단계에 선행된 초기 고혈압 피크를 전시합니다.

또 다른 잘 확립 된 관찰은 뇌 죽음 유도 면역 체계의 활성화로 이어진다는 것입니다. 실제로, 이 모형에 있는 두뇌 죽음의 4 시간 후에, 면역 마커의 기관 특정 업 규제는 mRNA 수준에서 관찰됩니다. 뇌 사멸의 미리 정의된 기간 후에, 기관은 그들의 직접적인 분석 또는 후속 기관 이식을 위해 수확될 수 있습니다.

이 모델은 뇌 사멸 유발 부상의 영향에 대한 심층 연구를 가능하게하고 이미 활성화 및 백혈구 이동을 보완하기 위한 새로운 통찰력을 밝혔습니다.