이 시스템을 통해 연구원들은 광유전학 실험을 위한 저렴하고 다양한 조명 시스템을 쉽게 구축할 수 있습니다. 이 기술의 장점은 가시 근적외선 스펙트럼에 걸쳐 있는 사용 가능한 파장으로 LED 조명 타이밍을 프로그래밍할 수 있는 기능과 LED를 다양한 상황에서 사용할 수 있다는 것입니다. 전기 회로를 구축하려면 인쇄 회로 기판을 도움의 손에 끼우고 점퍼 와이어를 삽입하여 A1 및 A3 핀홀을 접지에 형성하도록 연결합니다. D2 점퍼 와이어를 D6 핀홀에 연결하고 전원 공급 장치와 번호 7 점퍼 와이어를 A7 핀홀에 연결합니다. 단자를 45도 구부리고 플럭스를 추가하십시오.
납땜 후 전선 뒷면을 다듬습니다. 납땜된 암 와이어의 한쪽 끝을 와이어 커넥터에 A5 구멍에 삽입합니다. 그런 다음 저항의 한쪽 끝을 A5 구멍에 연결하십시오.
커넥터의 다른 쪽 끝을 접지에 연결합니다. 그런 다음 저항의 다른 쪽 끝을 접지에 연결하고 연결을 납땜하십시오. Arduino 커넥터의 경우 와이어 대 와이어 커넥터의 끝을 압착하고 직사각형 커넥터를 통해 압착된 끝을 밀어 넣습니다.
LED를 설정하려면 아래에서 가열하여 와이어를 주석 처리하고 상단에서 땜납을 추가합니다. 큰 납땜 팁 위에 충분한 양의 땜납을 놓고 팁을 사용하여 플럭스가 포함된 접점에서 LED 베이스를 가열합니다. 몇 초 후 각 접점에서 땜납을 개별적으로 드래그하고 헤어 클립을 사용하여 검은 색 와이어를 음극에 고정합니다.
큰 납땜 팁에 충분한 양의 땜납을 놓고 LED 베이스의 땜납이 녹을 때까지 팁을 와이어에 누릅니다. 와이어를 누른 상태에서 와이어를 제자리에 고정하면서 납땜 인두를 제거합니다. LED 연결을 위해 패드에 소량의 솔더 페이스트를 놓고 집게를 사용하여 패드 위에 LED를 놓습니다.
양극에 미리 주석 도금된 빨간색 와이어를 잡고 헤어 클립을 사용하여 와이어를 자릅니다. 그림과 같이 큰 팁에 땜납을 추가하고 LED 베이스의 땜납이 녹고 납땜 페이스트가 녹아 은색이 될 때까지 팁을 연결부에 누릅니다. LED 전선을 만들려면 길이로 절단 된 전선 위에 4.76mm 수축 튜브를 놓고 전선 대 전선 커넥터 위에 3.18mm 수축 튜브를 놓습니다.
와이어 끝에 플럭스를 벗기고 추가합니다. 도움의 손길을 사용하여 와이어를 와이어 커넥터에 고정하고 커넥터 끝을 한쪽 와이어 끝으로 비틀십시오. 재료를 함께 납땜하고 다른 와이어를 동일한 방식으로 설정에 연결하고 납땜합니다.
그런 다음 LED 베이스 아래의 테이프로 LED 전선을 도움의 손길에 고정합니다. 그런 다음 제조업체의 지침에 따라 에폭시를 혼합하고 납땜 된 LED 상단에 에폭시를 펼칩니다. 스페이드 드릴 비트를 사용하여 LED를 놓을 상자 상단에 1.5cm 구멍을 뚫고 고속 회전 도구를 사용하여 구멍의 한쪽에 노치를 만들어 LED 와이어를 위한 공간을 만듭니다.
LED가 비출 구멍을 덮는 블랙 박스에 25-30mm의 프라이버시 필름을 테이프로 붙이고 구멍 상단의 블랙 박스 외부에 LED를 테이프로 붙입니다. 4 개의 LED 제어 시스템의 경우 상자 뚜껑에 3.81cm 간격으로 0.83cm 구멍 4 개를 뚫고 고속 회전 도구를 사용하여 1.19 x 1.90cm 직사각형 구멍을 왼쪽 상단 모서리에 자릅니다. 스페이드 드릴 비트를 사용하여 상자 뒷면에 1.5cm 구멍을 뚫고 그로밋을 구멍에 삽입합니다.
컴퓨터 제어 LED의 경우 마이크로 컨트롤러가 상자에 접착 될 영역과 마이크로 컨트롤러 홀더의 바닥면에 사포질을합니다. 마이크로 컨트롤러를 홀더에 끼운 다음 홀더와 상자를 함께 에폭시로 고정한 다음 홀더를 블랙 박스에 고정합니다. 그런 다음 클립에 양면 테이프를 붙이고 클립을 상자 안에 고정합니다.
피코시아닌 빌린이 아닌 피토크롬 B를 발현하도록 형질감염된 샘플에서 리포터 DNA의 양이 증가함에 따라 누출이 증가합니다. 또한, 피코시아닌 빌린 염색체 생성 플라스미드를 포함하는 전체 피토크롬 B 유전자 스위치가 원적색광으로 조명될 때, 루시퍼라아제 발현은 또한 형질감염 믹스 내에서 리포터 구축물의 양이 증가함에 따라 증가한다. 유사하게, 광에 민감한 세포가 적색광으로 조명될 때, 루시퍼라아제 발현 또한 증가된 리포터 양에 따라 증가한다.
적색광 처리된 세포의 유도 수준을 원적색광 처리된 세포와 비교할 때, 리포터의 양이 증가함에 따라 폴드 활성화의 작은 감소가 발견된다. 전기 회로를 구축할 때 각 단계를 주의 깊게 따르고 각 구성 요소를 납땜하기 전에 핀홀 번호를 한 줄씩 다시 확인하는 것이 중요합니다. 이 프로토콜은 다양한 파장을 사용하여 많은 유형의 샘플 또는 광유전학적 도구의 광학 자극에 사용할 수 있으며 조명 일정을 프로그래밍할 수 있습니다.
