상기 광혈전증 뇌졸중 모델 접근법은 피질의 다른 영역에서 부상을 유도하는 제한된 테두리와 유연성 때문에 피질 가소성의 세포 및 분자 연구에 적합할 수 있다. 세 가지 원리 장점은 다른 스트로크 모델과 포토스혈 전증 모델을 구별하고, 병변을 원하는 영역으로 유도할 가능성, 높은 재현성 및 낮은 사망률을 구별합니다. 적절한 장미 벵골 어세팅은 성공과 모델의 안정성에 매우 중요합니다.
결과는 레이저 전력, 교차 적용 타이밍 및 영향을 받지 않는 피질의 광학 실링과 같은 기술적 사양에 따라 달라집니다. 밀리리터당 10밀리그램의 최종 농도를 위해 0.9%의 식염수 용액으로 장미 벵골을 용해하는 것으로 시작하십시오. 뜨거운 납 소독제를 사용하여 모든 기기를 꼼꼼하게 살균하고 수술 전후의 모든 표면을 미생물 소독제 스프레이로 소독합니다.
식염수 용액으로 채워진 주사기를 준비하여 수화된 작동 영역을 유지하고 마취 가스를 준비합니다. 주입되는 장미 벵골의 복용량을 조정하기 위해 마우스의 체중을 측정합니다. 마우스 체온을 유지하기 위해 관련 피드백 제어 가열 패드를 설정합니다.
마우스가 완전히 마취되고 고정 프레임에 고정되면 직장 프로브를 부드럽게 삽입하여 수술 시술 전반에 걸쳐 마우스의 체온을 모니터링합니다. 덱스 판테놀 눈 연고를 눈에 바르고 소독제로 피부와 주변 털을 청소합니다. 가위를 사용하여 2-2 센티미터 반 의 세로 절개를 하고 다시 길어 두개골을 노출하십시오.
면화를 사용하여 간음막을 부드럽게 제거하고 관상 봉합사를 찾습니다. 561 나노미터 레이저를 켜는 동안 보호 안경을 착용하고 왼쪽에 3밀리미터를 표시한 다음 레이저를 끄고 표시된 좌표에 직경 4mm의 구멍으로 스티커를 연결합니다. 장미 벵골마우스 함정을 주입합니다.
레이저 빔을 두개골에서 4~5센티미터 거리에 놓습니다. 레이저를 켜고 20 분 동안 두개골을 비춥습니다. 0.9%의 식염수를 두 방울로 바르면 두개골을 다시 수분화합니다.
상처를 봉합 한 후, 마취에서 회복하기 위해 섭씨 37도에서 회복실에 마우스를 놓습니다. 1시간 후, 온도 조절실에 마우스를 다시 케이지에 놓습니다. 직렬 관상 뇌 섹션에 크리스탈 보라색 얼룩은 뇌졸중 유도의 24 시간 후 광피 볼륨 항목 분석에 사용되었다.
이 뇌졸중 모델의 가변성은 낮았으며 평균 경색 부피는 29.3 입방 밀리미터였으며, 이는 한 뇌 반구의 23%를 나타냅니다. 광장전증 병변은 복합 신경 점수에 의해 표시된 중등도 및 장기 감각 운동 장애를 일으켰습니다. 뇌졸중 동물은 수술 후 24 시간 신경 점수에 상당한 변화가 있었다.
비록 차이가 지속, 스트로크 마우스 시간이 지남에 따라 향상. 장미 벵골 플러스 조명을 실시 하는 마우스에서, 체중및 체온 감소 24 수술 후 시간. 그러나 수술 후 3일 이내에 회복이 관찰되었습니다.
허혈성 변화는 레이저 이미징을 사용하여 확인되었다. 결과는 장미 벵골 또는 레이저 조명 만으로는 병변을 생성하지 않았음을 나타내었고, 둘 다 동시 적용하면 좁은 올리고메릭 영역으로 둘러싸인 둥근 저포화 영역이 생성되었습니다. 수술 후 24시간 동안 경피량 평가를 위한 크리스탈 바이올렛 및 터널 염색은 장미 벵골 또는 레이저 조명 수술에서 조직 손상이 없음을 밝혔다.
한편, 장미 벵골 플러스 레이저 조명은 잘 경계병변을 생성했다. 장미 벵골 주입을 조정 하는 동물의 체중을 측정 하는 것이 중요 합니다. 검시관 스위처의 올바른 상태는 동물 간의 일관된 병변을 유도하는 것이 중요합니다.
이 프로토콜은 두개골을 그대로 두고 두개골 창을 통해 수행 할 수 있기 때문에 생체 이미징에서 넓은 필드 또는 멀티 광자와 결합 할 수 있습니다.
