여기에 설명 된 필라멘트 모델에서, 혈류의 완전한 복원및 기록, 특히 번역 뇌졸중 연구에서 마우스 중 추론 가능한 유입을 보장하기 위한 요구 사항입니다. 이 모델은 이전에 설명된 다른 스트로크 모델에 비해 두 가지 주요 장점이 있습니다. 두개골 절제술이 필요하지 않으며 혈관의 완전한 재관류가 달성됩니다.
필라멘트 모델은 다른 동맥의 프로세스 조작과 관련된 복잡한 외과 적 개입입니다. 이 모든 것의 시각화 및 설명은 작지만 중요한 단계이며 신경 외과 의사의 학습 기간을 가속화 할 수 있습니다. 열 담요를 연결하여 마취 시 작동 면적과 마우스 체온의 온도를 섭씨 37도에서 유지합니다.
오토클레이브 가위와 집게, 70% 에탄올 용액 및 덱스파테놀 눈 연고를 준비하고, 여러 조각의 면과 5O 코팅 된 편조 폴리 에스테르 봉합사를 사용할 수 있습니다. 절개 부위를 수화하기 위해 바늘없이 1 밀리리터 주사기로 0.9 % 식염수 용액을 준비합니다. 10 마이크로리터 파이펫 팁의 끝을 절단하여 레이저 도플러 프로브에 대한 홀더를 준비합니다.
마우스가 완전히 마취되면 작동 영역에서 경향이 있는 위치에 놓습니다. 직장 프로브를 부드럽게 삽입하여 수술 시술 전반에 걸쳐 온도를 모니터링합니다. 수술 부위를 소독한 후, 왼쪽 귀와 눈 사이에 이 두피를 잘라 두개골 뼈를 노출시하십시오.
다음으로, 두개골 아래 여러 대뇌 동맥 또는 MCA를 시각화하기 위해 현세 근육을 잘라 내고 은퇴하십시오. 레이저 도플러 프로브 또는 섬유를 왼쪽 MCA 위에 접착제로 고정하고 피부가 접착되도록 피부를 닫습니다. 경화 접착제 2~3방울을 바르면 공정 속도를 높이게 됩니다.
레이저 도플러 섬유가 접착되지 않고 언제든지 팁 홀더에서 쉽게 제거 할 수 있는지 확인하십시오. 마우스를 supine 위치로 돌린 다음 주전자를 마취 콘에 넣고 테이프로 발을 고정시하십시오. 가슴을 둘러싼 피부와 머리카락을 소독하고 목에 2센티미터 길이의 중간 선절을 만듭니다.
집게를 사용하여 피부 하반신 과 흉골 근육을 분리합니다. 외과 필드를 노출하고 왼쪽 일반적인 경동맥 또는 CCA를 찾기 위해 re트랙터를 사용합니다. 혈관 신경을 해치지 않고 결합 조직과 주변 신경에서 CCA를 무료로 해부하고 분기 전에 일시적인 결찰을 수행합니다.
외부 경동맥 또는 ECA를 해부하고 가장 단면가 보이는 부분에 영구 매듭을 묶는다. ECA 아래에 또 다른 봉합사를 놓고 분기에 가깝게 두은 다음 나중에 사용할 느슨한 매듭을 준비합니다. 내부 경동맥 또는 ICA를 해부하고 양면 위에 약 5밀리미터 의 미세 혈관 클립을 놓습니다.
골갈 신경을 손상시키지 않도록 하십시오. 그런 다음 꽉 와 느슨한 결찰 사이에 ECA에 작은 구멍을 잘라, 전체 ECA를 잘라하지 않도록. 필라멘트를 소개하고 CCA쪽으로 진행하십시오.
루멘 주위의 ECA의 느슨한 결찰을 조여 그 위치에서 필라멘트를 순간적으로 고정합니다. 미세 혈관 클립을 제거하고 출혈을 방지합니다. 마이크로혈관 클립을 제거한 후 MCA의 기원에 도달할 때까지 ICA를 통해 필라멘트를 삽입합니다.
ECA 주변의 매듭을 더 조여이 위치에서 필라멘트를 수정합니다. 필라멘트 삽입 전후의 레이저 도플러 값을 기록합니다. 재반을 제거하고 상처를 봉합하기 전에 복종선에서 흉골 근육을 재배치하십시오.
레이저 도플러 프로브를 제거하고 1 시간 동안 섭씨 37도에서 복구 챔버에 동물을 배치합니다. 마취 마스크에 주미와 수술 영역에 있는 경향이 있는 위치에 마우스를 놓고 테이프로 동물의 발을 고정합니다. 레이저 도플러 프로브를 프로브 홀더에 삽입합니다.
상처 봉합사를 제거하고 집게를 사용하여 피부, 형선 및 흉골 근육을 분리합니다. 외과 필드를 노출하는 re트랙터를 사용합니다. 필라멘트를 조여주는 ECA 봉합사를 풀고 필라멘트를 부드럽게 당깁니다.
제거 하는 동안 필라멘트의 실리콘 고무 코팅을 손상 하지 마십시오. 필라멘트 제거 전후에 레이저 도플러 값을 기록합니다. ECA 봉합사를 단단히 묶고 레이저 도플러 장치에서 대뇌 혈류의 증가를 확인합니다.
완전한 혈류를 복원하기 위해 CCA에서 분기전에 일시적인 결찰을 엽니다. 재반을 제거하고 상처를 봉합하기 전에 복종선에서 흉골 근육을 재배치하십시오. 그런 다음 동물을 마취에서 회복하기 위해 섭씨 37도에서 회복실에 1시간 동안 놓습니다.
회복 후 온도 조절실에서 마우스를 케이지로 돌려보내고 케이지 바닥에 작은 페트리 접시에 젖은 음식 펠릿과 하이드로겔을 첨가하여 동물을 돌보고 수술 후 3일째까지 12시간마다 진통증을 주입합니다. CCA의 혈류가 필라멘트를 제거한 후 회복되면 뇌의 완전한 재관류가 발생하며, 이는 인간 환자에서 성공적인 기계적 혈전 절제술 후 관찰된 상황과 유사합니다. 뇌졸중 동물은 합성 및 초점 신경 점수에 상당한 변화를 제시, 하지만 일반적인 신경 점수에 토끼 동물에 비해.
경유량 회수는 뇌졸중 유도 후 24시간 동안 관상 동맥 연쇄 뇌 섹션의 크레솔 바이올렛 염색을 사용하여 수행되었다. 병변 영역은 striatum과 같은 소마토 감각 및 모터 피질뿐만 아니라 하위 피질 구조를 포함한다. 경피량 평균은 61~62밀리미터 정사각형으로, 영향을 받은 뇌반구의 48%를 나타낸다.
인접한 조직, 특히 미주 신경에 손상을 일으키지 않고 CCA, ECA 및 RCA의 적절한 해부를 수행하여 모든 구조의 양호한 시각화를 하고, 맥아 기원을 삽입하고 폐색할 수 있어야 한다.
