벡터 유전자 전달을 위한 비인간 영장류에서 스텐센의 덕트를 통한 역행 파로티드 글랜드 주입

이 프로토콜은 역행 타액 선 주입의 절차를 자세히 보여주기 때문에 중요합니다. 절차는 벡터화 된 면역 프로피시스 또는 유전자 치료와 같은 다양한 의학적 이유로 사용될 수 있습니다. 이 기술은 쉽게 배우고 재현할 수 있습니다.

저자는 구강 외과 의사가 아니거나 그러한 배경을 가지고 있음에도 불구하고 여러 번이 절차를 성공적으로 수행 할 수있었습니다. 마취 후 배율에 대한 치과 형근을 사용하고 파로티드 유두 또는 상부 두 번째 어금니에 인접한 후방 뺨에 스텐슨의 덕트의 개방을 식별합니다. 원추형 확장기의 점을 유두의 중앙이나 개구부로 배치하여 파로티드 유두를 부드럽게 팽창시키고 약 20~30초 동안 확장기를 앞뒤로 회전시합니다.

다음으로, 핀셋을 사용하여 실외 끝에서 약 0.5센티미터에서 주사기를 함유하는 분리체에 부착된 폴리에틸렌 튜브의 표시끝을 잡고 튜브의 끝을 부드럽게 팽창유두리로 삽입한다. 튜브가 미끄러지는 데 도움이 되는 작은 회전 동작으로 튜브를 부드럽게 전진시키고, 핀셋은 0.5센티미터의 근접계를 이전 그립으로 재조정합니다. 2센티미터 표시가 파로티드 유두에 도달할 때까지 이 과정을 반복합니다.

다음으로, 파로티드 유두를 밀봉하고 구강 내 의 폐포물의 유출을 줄이려면 유두 주위와 삽입 된 튜브에 뺨에 시아노아크릴레이트를 적용하십시오. 시아노아크릴레이트건조가 끝나면 분당 100 마이크로리터의 속도로 5분 이상 비핵을 천천히 주입하십시오. 주입이 완료된 후 튜브를 최소 5분 동안 제자리에 두고 덕트를 밀봉하고 비소가 파로티드 선에 남을 수 있도록 합니다.

마지막으로, 부드러운 견인로 튜브를 제거하고 시아노아크라이레이트는 튜브와 함께 자유롭게 당겨집니다. 무선 콘트라스트 주입을 이용한 불소 검사는 스텐슨의 덕트를 통해 그리고 parotid 선으로 용액의 분기를 시연했습니다. parotid 선의 화학적 분석으로서 면역은 두 세포 유형모두에서 성공적인 트랜스듀션 및 전사를 나타내는 덕트 및 아시나르 세포 모두에서 EGFP에 대한 양성 얼룩을 드러냈다.

이 절차의 주요 과제는 아마도 매우 부드럽고 천천히 수행해야 하는 유두에 폴리에틸렌 튜브를 도입하는 것입니다.