Dural Stimulation and Periorbital von Frey Testing in Mice As a Preclinical Model of Headache

조직 손상이없는 경우 두통에 기여하는 수막 내에서 어떤 사건이 발생합니까? 래트에서 경막 자극 모델의 이전 사용과는 달리, 그것은 유전자 변형 마우스의 광범위한 카탈로그의 사용을 허용한다. 주요 투쟁은 인젝터로 두개골을 촉지하여 람도이드와 시상 봉합사의 교차점을 찾는 것입니다.

시작하려면 시판 된 내부 캐뉼라를 수정하고 조정 가능한 용융 실리카 플라스틱 캡으로 주입기를 만들고 28 게이지 가이드 캐뉼라에 삽입하십시오. 캘리퍼를 사용하여 주입기를 구부리지 않고 주입기의 용융 실리카 플라스틱 캡을 조정하십시오. 주입기를 주입기의 팁에서 실리카 플라스틱 캡의 가장자리까지 측정 된 6 밀리미터의 길이로 조정하십시오.

다른 마우스 균주에 대한 파일럿 주사를 수행하고 길이를 조정하여 경막에 정확하게 주입하십시오. 그런 다음 주입기의 긴 끝을 여덟 인치 이상의 플라스틱 튜브에 부착하여 다섯 마이크로 리터 부피를 유지합니다. 튜브를 삽입하면서 금속 부품과 주입기에 위치한 플라스틱 마개 상단을 완전히 덮을 수 있도록 하여 기포가 라인에 축적되는 것을 방지합니다.

다음으로, 미세주사기를 채우고 튜브의 다른 쪽 끝을 10 마이크로리터 유리 미세주사기에 부착하여 주사기의 금속 부분 위에 단단히 밀봉하십시오. 이어서, 기포 형성을 방지하기 위해 선택된 PBS 또는 합성 간질액 또는 다른 비히클의 다섯 마이크로리터로 주사기를 백필한다. 필요한 경우 차량으로 라인을 넘치게하여 미리 형성된 거품을 분산시킵니다.

대안적으로, 주사기를 미리 채우고, 연결 후, 연결된 라인을 통해 유체를 밀어낸다. 차량으로 채워진 라인이 효율적으로 작동하면 다섯 마이크로 리터의 용액을 해밀턴 주사기에 적재하십시오. 마우스가 완전히 마취되면 멸균 안과 연고를 눈에 바르고 동물의 머리를 면도 한 다음 포비돈 요오드와 에탄올로 피부를 소독하십시오.

한 손으로 동물의 머리를 안정시키고 다른 한 손에는 약물이 든 주사기로 주입기를 잡으십시오. 그런 다음 주입기를 사용하여 마우스의 두개골에있는 시상과 람도이드 봉합사의 접합부를 조심스럽게 조사하고 찾아 확인합니다. 봉합사가 위치되고 주입기가 제자리에 놓이면 in 주입기가 피부를 관통하고 플라스틱 마개까지 접합부로 떨어질 때까지 천천히 부드럽게 인퓨저를 앞뒤로 흔들어 전체 6mm 주입기 팁을 접합부에 삽입하십시오.

그런 다음 주사기의 플런저를 천천히 밀어 다섯 마이크로 리터의 유체를 경막 매트로 배출합니다. 시험 당일, 방에 순응 한 후, 각 챔버에서 컵과 함께 하나의 마우스를 제거하십시오. 불평등 한 체중 분포가 동물의 반응을 변경하거나 방해 할 수 있으므로 컵을 균등하게 분포 된 체중을 위해 수평 위치에 유지하십시오.

마우스와 함께 컵을 테스트 랙 아래의 테이블에 보관된 흡수 패드에 놓습니다. 그런 다음 주변 궤도 폰 프레이 테스트를 위해 07 그램 폰 프레이 필라멘트를 눈 사이의 얼굴 중앙에 놓고 필라멘트에 충분한 압력을 가하여 폰 프레이 모발이 C 자형 형태로 구부러지게합니다. 필라멘트 접촉을 약 삼 ~ 다섯 초 동안 또는 마우스가 머리나 발을 사용하여 필라멘트를 쓸어 넘길 때까지 유지하십시오.

Dixon 업다운 방법을 따르려면 마우스가 필라멘트에 반응하는 경우 다음 저중량 필라멘트를 적용하고, 그렇지 않으면 더 높은 중량의 필라멘트를 적용하십시오. 이 절차는 기계적으로 유발 된 안면 과민증에 대한 경막 외 프로락틴의 효과를 조사하는 데 사용되었습니다. 이 연구의 결과는 다섯 마이크로 그램의 듀랄 프로락틴에 대한 반응으로 여성 ICR 마우스에서 안면 금단 역치가 현저하게 감소한 것으로 나타났습니다.

5 마이크로 그램의 프로락틴의 열 배 낮은 복용량은 또한 높은 용량의 프로락틴과 비슷한 안면 금단 역치 감소를 보였다. 프롤락틴 주사는 자발적인 통증 관련 행동을 만들어 냈으며, 이는 grimace를 통해 평가되었습니다. 듀랄 5 마이크로 그램의 프로락틴은 암컷 마우스에서 상당한 슬픔을 일으켰고 여성 편두통과 같은 행동에서 경막 프로락틴에 대한 명확한 역할을 입증했습니다 폰 프레이 필라멘트 또는 안면 슬픔을 이용한 행동 테스트는 부상이없는 자극이 두통 반응을 유발하는지 여부를 결정합니다.

이 기술은 이제 두개골 및 후속 염증에 의해 유발되는주의 사항에 대한 우려없이 수막의 염증 기반 메커니즘을 조사하는 데 사용될 수 있습니다.