Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

관절 질환과 TMD는 관절 근육과 주변 조직의 통증에 영향을 미치는 약 30가지 인간 질환의 그룹으로, 지금까지 TMD 환자가 병원에 가는 주요 원인입니다. TMD 통증에 대한 효과적인 치료법은 통증 메커니즘에 대한 이해가 부족하기 때문에 없습니다. 통증 메커니즘을 조사하기 위해 우리는 통증 TMD의 마우스 모델을 개발한 후 통증 행동 분석을 수행했습니다.

인공 통증 연구에서 통증 평가는 행동 분석의 본질적인 가변성으로 인해 상당히 어려운 과제입니다. 또한 실험실 사용, 통증을 평가하기 위한 프로토콜이 다르기 때문에 서로 다른 연구 간에 상호 참조하기가 어렵습니다. 이 JOE 기사에서는 주요 인공 통증에 대한 하나의 화염, 필라멘트 및 역력 분석의 시각화 된 버전을 설명했습니다.

이러한 프로토콜은 직접 구현을 위한 자세한 방법을 제공하고 TMJ 통증을 종합적으로 평가하기 위한 접근 방식에 결합됩니다. 자가자극 통증, TMJ 펜, 근육 펜, 신경경로 펜과 같은 다양한 구강 통증 상태의 통증 행동을 평가하는 데 적용할 수 있습니다. 마취된 마우스를 수술 플랫폼에 배치하기 시작하려면 멸균 인슐린 주사기 또는 측두하악 관절에 CFA를 주입하기 위한 31게이지 바늘을 준비합니다.

폴리에틸렌 튜브로 만든 칼집으로 바늘을 덮고 깊은 삽입을 방지하기 위해 바늘 끝의 2mm만 돌출되도록 합니다. 다음으로, 접합궁을 촉진하여 측두엽 하악관절 또는 TMJ 주사 부위를 찾습니다. 그런 다음 접합궁의 뒤쪽 끝 아래에 있는 주사 부위에 바늘을 삽입합니다.

TMJ 캡슐에 CFA 10마이크로리터를 천천히 주입하고 바늘을 서서히 빼내기 전에 최소 5초 동안 기다립니다. 먼저 CFA의 관절 내 주사를 통해 염증성 TMJ 통증 마우스 모델을 확립합니다. 마우스가 완전히 회복되면 마우스가 테스트 환경에 적응할 수 있도록 테스트하기 전에 행동실에서 최소 1시간 동안 억제 튜브를 마우스 케이지에 놓습니다.

그런 다음 호환 가능한 소프트웨어를 켜서 강제로 측정하고 N-B-I-T-R-S-D-V 2.6 0.3 프로그램을 엽니다. 이제 적절한 통신 옵션을 선택하십시오. 유인 모드 UDP를 선택한 다음 올바른 로컬 IP를 선택하고 검색을 클릭하여 장치 IP 및 포트를 검색합니다.

대상 IP 및 대상 포트가 나타나면 열기를 클릭합니다. Y 범위에서 10을 클릭하여 Y 축을 설정 한 다음 설정을 클릭하십시오. 마지막으로 획득을 클릭합니다.

그런 다음 파란색 그래프에 대해 채널 1만 선택하고 장치에 연결되지 않은 다른 채널을 끕니다. 재생을 클릭하여 물린 힘 기록을 시작합니다. 이제 마우스를 느슨하게 구속하도록 개조된 50ml 플라스틱 튜브에 마우스를 넣고 물린 판을 마우스의 입 쪽으로 이동합니다.

세션당 2분 동안 자발적으로 무는 것을 기록합니다. 그런 다음 일시 중지를 클릭하여 녹음을 중지하고 저장을 클릭합니다. 이제 Excel 파일의 두 번째 열에 있는 데이터를 최대값에서 최소값으로 순위를 매기고 추가 분석을 위해 물린 힘 진폭의 상위 5개 값을 선택합니다.

프로그램에서 채널 1의 값을 기록하고 바이트 힘 진폭의 상위 5개 값에 빼거나 추가합니다. 이 분석에서 무는 힘의 상대적 값을 얻으려면 이 5개 값의 평균을 취하여 한 마우스의 평균 상대적 무는 힘을 구하십시오. CFA를 처리한 마우스는 시간이 지남에 따라 점진적으로 회복하면서 PBS 그룹에 비해 주입 후 1일차에 상대적 교합력이 유의하게 감소했으며, CFA 처리군에서 1일차에 교합력 변화율이 유의하게 감소하여 12일차까지 회복되는 경향을 보였습니다.

시작하려면 마우스 케이지에 철망 케이지를 놓고 테스트 절차 전에 최소 1시간 동안 행동실에서 마우스를 습관화합니다. 그런 다음 전자 폰 프레이 테스트 기계를 켭니다. 헤드 인출 임계값을 측정하려면 최대를 누르고 단위를 기계에서 설정한 임의의 단위인 500g으로 설정합니다.

지금 녹음을 시작하려면 값을 0으로 설정하십시오. 철망 케이지에 마우스를 놓습니다. von fray 필라멘트를 턱관절 부위에 수직으로 적용합니다.

필라멘트에서 가해진 힘의 값 또는 반응을 유발하는 자극 강도를 첫 번째 테스트로 그램 단위로 기록합니다. 그런 다음 화면의 힘 값을 0으로 설정하고 마우스가 케이지 안에 있는 동안 10초 동안 기다립니다. 필라멘트를 다시 적용하기 시작하고 값을 기록하십시오: CFA 처리 마우스에서 첫날에 CFA 처리 마우스에서 기준선에 비해 헤드 인출 임계값이 현저히 낮았다가 부분적으로 회복되었습니다.

시간이 지남에 따라 CFA 처리 마우스에서 1일차에 머리 철수 임계값의 백분율 변화가 현저히 감소했으며 12일차까지 개선이 관찰되었습니다.