Method Article
* These authors contributed equally
Tutaj szczegółowo opisujemy procedury operacyjne i środki ostrożności, które należy podjąć podczas moksyterapii pępka z podziałem ziół w leczeniu pierwotnego bolesnego miesiączkowania u szczurów z zimną krzepliwością i zastojem krwi, co może znacznie poprawić reakcję wicia się u szczurów z bolesnym miesiączkowaniem i złagodzić ból.
Pierwotne bolesne miesiączkowanie (PDM) odnosi się do występowania skurczowego bólu kolkowego w dolnej części brzucha bez żadnej oczywistej patologii miednicy, często towarzyszy mu inne objawy ogólnoustrojowe, co znacznie obniża jakość życia kobiet z PDM, 45%-95% kobiet miesiączkujących jest nim dotkniętych. Pomimo wysokiej częstości występowania PDM, często nie jest ona dobrze leczona i jest ignorowana przez odpowiednich badaczy i same kobiety. Moksowanie z podziałem na zioła (HPM) jest charakterystyczną terapią zewnętrzną w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM), która jest szeroko stosowana w leczeniu chorób w Chinach; leczy choroby poprzez nałożenie chińskiej formuły ziołowej na punkty akupunkturowe pacjenta, a następnie zapalanie pałeczek moksy na ziołową formułę do terapii moksyksowej. Podstawową skutecznością ziół wykorzystanych w tym badaniu jest aktywacja meridianów i ciepło, które pobudza krążenie qi w celu złagodzenia bólu. Stymulacja cieplna Moxibustion może przyspieszyć napar z ziół do ludzkiego ciała. W związku z tym HPM, który łączy w sobie stymulację akupunkturową, ziołową i cieplną, jest odpowiedni do leczenia zaburzeń ginekologicznych, w szczególności chorób funkcjonalnych, takich jak PDM. Niniejszy artykuł zawiera szczegółowy opis procedur i środków ostrożności dotyczących HPM w punkcie akupunkturowym Shenque (CV8) u samic szczurów doświadczalnych, co stanowi eksperymentalną podstawę do lepszego promowania stosowania i rozwoju HPM na pępku w PDM.
Pierwotne bolesne miesiączkowanie (PDM), zwane również funkcjonalnym bolesnym miesiączkowaniem, jest jedną z najbardziej rozpowszechnionych chorób ginekologicznych dotykających dorastające dziewczęta i miesiączkujące młode kobiety1. Charakteryzuje się skutkami ubocznymi, takimi jak udręka i uciski (skurcze) macicy, wraz z problemami zapalnymi w jamie brzusznej przed i po miesiączce bez żadnych dowodów patologii miednicy2. Skurcze dolnej części brzucha, które zaczynają się 8-72 h po rozpoczęciu miesiączki, osiągają szczyt w pierwszych dniach zwiększonego krwawienia miesiączkowego3,4, a czasami rozprzestrzeniające się na plecy i uda, są charakterystycznymi objawami policystycznego PDM. Ze względu na różne definicje tego schorzenia i brak ustandaryzowanych sposobów oceny intensywności bólu menstruacyjnego, szacowana częstość występowania bolesnego miesiączkowania u kobiet waha się od 45%-95%3,4,5. Uważa się, że około 10%-25% kobiet w wieku rozrodczym cierpi na naprawdę ciężką chorobę PDM6. Częstość występowania PDM jest najwyższa w grupie wiekowej od 20 do 24 lat i stopniowo maleje2. PDM charakteryzuje się okresowym bólem podbrzusza, któremu często towarzyszą inne objawy ogólnoustrojowe, takie jak ból krzyża, nudności, wymioty, bóle głowy, anoreksja, biegunka7, a nawet objawy psychiczne, takie jak depresja i lęk8,9. Podczas menstruacji kobiety z bolesnym miesiączkowaniem doświadczają spadku ogólnej jakości życia4,8,10.
Ponadto, badania wykazały, że powtarzające się bóle menstruacyjne mogą wpływać na funkcjonowanie ośrodkowego układu nerwowego, prowadząc do zmiany percepcji bólu zarówno w fazie bolesnej, jak i bezbolesnej11. Ze względu na etiologię PDM opartą na prostaglandynach (PG), najczęstszym leczeniem farmakologicznym PDM są niesteroidowe leki przeciwzapalne (NLPZ)12,13, a następnie doustne środki antykoncepcyjne14. Oprócz skutków ubocznych leków, 10%-20% osób nie reaguje na NLPZ i środki antykoncepcyjne3. Większość obecnych badań dotyczy wpływu bolesnego miesiączkowania na anatomię i fizjologię mózgu, niewiele uwagi poświęca się podejściam terapeutycznym. W związku z tym istnieje pilna potrzeba znalezienia strategii leczenia, która mogłaby być szeroko stosowana w praktyce klinicznej, o ustalonej skuteczności i łatwo akceptowana przez pacjentów.
Moxibustion z podziałem na zioła (HPM) jest charakterystyczną terapią zewnętrzną w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM), która jest szeroko stosowana w leczeniu chorób w Chinach. Jego zalety to minimalny koszt, brak skutków ubocznych, dobre efekty długoterminowe, łatwa obsługa i łatwa akceptacja przez pacjentów. Stwierdzono, że wpływ HPM na pępek na PDM jest znaczący15, co może być ściśle związane z regulacją niedoboru i nadmiaru zimna i ciepła macicy, a także komórek tucznych i powiązanych receptorów16. Zespół badawczy udowodnił, że HPM może natychmiast złagodzić ból menstruacyjny17.
Zhang Zhong-jing początkowo opisał koncepcję bolesnego miesiączkowania w Women's Miscellaneous Diseases and Treatment of the Golden Chamber, pisząc, że krwawienie miesiączkowe jest niekorzystne poniżej pasa, a brzuch jest pełen bólu18. Zgodnie z głównymi objawami, bolesne miesiączkowanie można przypisać do kategorii bólu menstruacyjnego i menstruacyjnego bólu brzucha w tradycyjnej medycynie chińskiej. Zespoły bolesnego miesiączkowania można podzielić na pięć: qi i niedobór krwi; zimna krzepliwość i zastój krwi; akumulacja wilgotnego ciepła; stagnacja qi i zastój krwi; oraz niewydolność wątroby i nerek16. Według odpowiednich badań, zespół zimnej krzepnięcia i zastoju krwi jest najczęstszym zespołem PDM19,20. TCM utrzymuje, że PDM i patogeny przeziębienia są ze sobą ściśle powiązane21. Podczas menstruacji lub w jej okolicach w Xuehai dochodzi do nadmiernego przepływu krwi, co prowadzi do szybkiego wyczerpania krwi qi ze względu na jej energetyczną naturę. W związku z tym kobiety są podatne na przyczyny chorobotwórcze z powodu braku wystarczającej ilości zdrowej energii oraz gwałtownych wahań qi i krwi w macicy oraz meridianach Chong i Ren22. Kobiety, które mają dobrze rozwiniętą sylwetkę, powinny podjąć środki ostrożności, aby unikać spożywania surowych lub zimnych pokarmów oraz zapobiec przeziębieniu się podczas menstruacji. Niezastosowanie się do tego może spowodować wtargnięcie patogenów przeziębienia do macicy, prowadząc do krzepnięcia i stagnacji krwi w macicy oraz meridianach Chong i Ren. W związku z tym osoby odczuwają ból w wyniku zastoju w przepływie krwi. Zarówno wtargnięcie patogenów zimna z zewnątrz, jak i obecność zimna yin wewnątrz organizmu mogą powodować zablokowanie i zakrzepnięcie meridianów.
Bolesne miesiączkowanie występuje w meridianach Chong i Ren, a początek jest związany ze zmianami w qi i krwi. W teorii TCM moksowanie działa poprzez stymulację Yang Qi, ogrzewanie meridianów, rozpraszanie zimna i zwiększanie przepływu krwi w celu złagodzenia bólu. Według Jinfu z Lingshu23, jeśli puls i skrzep krwi znajdują się pośrodku, a krew jest zakrzepła i zimna krew, to jest to odpowiednie do moksowania; Jest to typowe leczenie zewnętrznego bolesnego miesiączkowania. W wcześniej opublikowanym worku24 liście artemisia argyi są opisane jako gorzkie i ostre, zdolne do przywrócenia prawie wyczerpanego pierwotnego Yang, łącząc dwanaście meridianów, biegnąc przez trzy meridiany Yin, regulując Qi i krew, rozpraszając zimno i wilgoć oraz ogrzewając macicę, moxibustion, za pomocą odpowiednich punktów akupunkturowych, może wydalić czynniki chorobotwórcze na zewnątrz, Regulują wewnętrznie Qi i krew, a tym samym odgrywają rolę w regulacji meridianów, aktywacji krążenia krwi i zatrzymywaniu bólu. Pępek, znany również jako Shenque (CV8), należy do południka Ren, łączącego meridiany Du, Chong i Dai. Zgodnie z teorią TCM, uważa się, że Shenque jest spokrewniony z pięcioma zang i sześcioma fu25. Jest uważany za wrodzoną podstawę i oś równowagi yin-yang. Anatomicznie PDM znajduje się w bliskiej odległości od miednicy i jest ściśle połączony z macicą. Choroba PDM dotyka w szczególności macicy, a jej patogeneza obejmuje brak równowagi qi i krwi, a także brak równowagi wnętrzności. Poprzez stymulację punktu Shenque'a można bezpośrednio wpływać na qi i stan krwi macicy oraz skutecznie leczyć skurcze menstruacyjne. Opierając się na powyższej teorii, wybraliśmy stymulację punktu akupunkturowego Shenque zlokalizowanego w okolicy brzucha do terapii HPM, w celu złagodzenia objawów bolesnego miesiączkowania i złagodzenia bólu.
Aby jak najwierniej naśladować interwencję TCM na PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi, powtórzyliśmy technikę HPM na pępku u samic szczurów. Odkryto, że HPM na pępku ma wyraźne działanie przeciwbólowe i może zmniejszyć reakcję wicia się szczurów z bolesnym miesiączkowaniem. W celu zbadania mechanizmu HPM na pępku w celu poprawy PDM i promowania go, zbadaliśmy technikę mocowania szczurów i wykonywania HPM w akupunkcie Shenque w brzuchu.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Ten eksperymentalny protokół został zatwierdzony przez Komitet ds. Zarządzania Zwierzętami Eksperymentalnymi i Oceny Etyki Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Zhejiang. Wszystkie operacje doświadczalne na zwierzętach są zgodne z etyką dobrostanu zwierząt doświadczalnych i przepisami dotyczącymi bezpieczeństwa doświadczalnego doświadczenia na zwierzętach. W badaniu wykorzystano dorosłe samice szczurów rasy Wistar w wieku 8-10 tygodni z Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Zhejiang. Przed eksperymentem szczury były karmione dietą adaptacyjną przez 1 tydzień w kontrolowanym środowisku (temperatura: 23-25 °C, wilgotność: 40%-60%). Szczury były utrzymywane w 12-godzinnym cyklu światło-ciemność, ze światłami włączanymi od 8:00 do 20:00 i miały nieograniczony dostęp do jedzenia i wody. Poniższy protokół opisuje PDM z ustanowieniem modelu zimnej koagulacji i zastoju krwi oraz HPM w procedurze terapii pępka. Reprezentacja procedury jest pokazana w Rysunek 1.
1. Ustanowienie PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi
2. Terapia pępka HPM na modelowym modelu PDM samice szczurów z zimną krzepnięciem i zastojem krwi
UWAGA: Przygotuj cztery najważniejsze materiały do terapii pępka HPM (zobacz Tabelę materiałów).
3. Przeprowadzanie testu behawioralnego
4. Pobieranie próbki po teście behawioralnym
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
W tym badaniu, benzoesan estradiolu w połączeniu z oksytocyną został użyty do wywołania modelu PDM zimnego krzepnięcia i typu zastoju krwi w celu zaobserwowania efektu terapii pępka HPM. Po pierwsze, obserwując wijące się zachowanie szczura, ustal, czy szczur PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi został pomyślnie wymodelowany, i oceń zachowanie bólu szczura, modelowanie i leczenie macicy za pomocą WS, WL i indeksu macicy. Od6 do 10dnia modelowania zabieg HPM wykonywano w CV8 (Shen...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Obecnie istnieją różne metody modelowania PDM z zimną krzepnięciem i typem zastoju krwi, ale główną metodą jest benzoesan estradiolu w połączeniu z oksytocyną do modelowania bolesnego miesiączkowania, które na tej podstawie będzie inne. W tym badaniu do modelowania wykorzystano metodę zamrażania całego ciała w połączeniu z benzoesanem estradiolu i oksytocyną. Temperatura metody zamrażania całego ciała wynosiła -20 °C. W poprzednim eksperymencie wstępnym stwierdzono, że gdy temperatura wynosi?...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów.
Ta praca była wspierana przez Fundację Nauk Przyrodniczych Prowincji Zhejiang, Program Eksploracyjny Q (LQ20H270012), Plan Technologii Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Zhejiang (NO.2020ZB124), Projekt Badawczy Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (NO.2021JKZKTS056B) oraz Projekt na poziomie szpitala Trzeciego Szpitala Stowarzyszonego Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (NO. ZS22ZA01). Jesteśmy wdzięczni Centrum Zwierząt Doświadczalnych Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang oraz Kluczowemu Laboratorium Akupunktury i Neurologii prowincji Zhejiang za zapewnienie nam warunków eksperymentalnych.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0,9% sól fizjologiczna | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | SLYSZ1A | Do wstrzykiwania grupy kontrolnej |
| 1 ml jednorazowa sterylna strzykawka | Changzhou Yuekang Medical Equipment Co., Ltd. | 3000-0515-14 | Do wstrzykiwania leku |
| 3 ml (przedłużona) pipeta Pasteura | Beijing Lanjieke Technology Co., Ltd. | YCKJ-HC-007245 | Do montażu |
| 75% alkoholu do dezynfekcji | Hangzhou OUTOP Biotechnology Co., Ltd. | Nie dotyczy Do | sterylizacji miejsca leczenia |
| Szkiełko szklane powlekane klejem | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | 188105W | Do barwienia HE |
| Inkubator biochemiczny | Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Fabryka sprzętu medycznego | Nie dotyczy | Do odparafinowania tkanek w barwieniu HE |
| Materiał tkaninowy | Przygotowanie własne | Nie dotyczy | Pokrowiec na szczura |
| Cyfrowy menedżer systemu skanowania plastrów | Hamamatsu | C13210-01 | Do skanowania plastrów HE |
| Jednorazowe rękawiczki | lateksoweGuangzhou Lige Technology Co., Ltd. | LG10-102-1I | Do stosowania podczas pracy |
| Benzoesan estradiolu | Hefei Xinkexin Animal Pharmaceutical Co., Ltd. | Nie dotyczy | Do ustalenia modelu bolesnego miesiączkowania |
| Excelsior AS W pełni automatyczny odwadniacz | Thermo Scientific | Excelsior AS | Do odwodnienia tkanek barwiących HE |
| Samice szczurów Wistar | Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej Zhejiang | Nie dotyczy | 220– 250 g |
| mąki | Preparat własny Nie | dotyczy Do | leczenia moksybusją z podziałem na zioła |
| Kleszcz | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | Do pobierania próbek |
| Formaldehyd | Szanghaj Lingfeng Odczynnik chemiczny Co., Ltd. | 441244-1KG | Do utrwalania tkanek |
| Barwnik szkiełkowy Gemini AS | Thermo Scientific | Gemini AS | Maszyna do barwienia |
| Hemostat | Zhejiang Tuzhi Technologia farmaceutyczna Co., Ltd. | lsnz | Do pobierania próbek |
| HistoCore | Leica (Arcadia H) | 14039357258 | Do zatapiania tkanek barwiących HE |
| Sterylny wacik medyczny | Trzeci szpital stowarzyszony Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang | Nie dotyczy | sterylizacji miejsca naprawy |
| Roztwór do barwienia błękitem metylenowym (0,1%) | Beijing Honghu United Chemical Products Co., Ltd. | G1300 | Do badań przesiewowych cyklu rujowego |
| Nożyce do mikrodysekcji | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | XWJ12A | Do pobierania próbek |
| Szklana osłona mikroskopu (24 mm x 50 mm) | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | 10212450C | Do barwienia HE |
| Mikrotom | Leica Microsystems | RM2255 | Do cięcia tkanek |
| Zamrażarka Midea | Hefei Midea Fridge Co., Ltd. | Nie dotyczy | Do ustalenia modelu bolesnego miesiączkowania z zimną koagulacją i zastojem krwi |
| Kleszcze trzonowe | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | YGJD-11 | Do pobierania próbek |
| Medium montażowe | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | CS9603-100mL | Do montażu tkanek |
| Moxa w sztyfcie | Trzeci szpital stowarzyszony Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang | N/A Do | leczenia moksybusją z podziałem na zioła |
| Pentobarbital sodowy | Hangzhou Dawen Biological Co., Ltd. | Nie dotyczy | Do pobierania próbek |
| Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS) | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | P1010-2L | Do pobierania próbek |
| Nożyczki | Zhejiang Tuzhi Technologia farmaceutyczna Co., Ltd. | lsnz | Do pobierania próbek |
| Ostrze do cięcia | Shanghai Saihan Technology Co., Ltd. | LEICA-819-box | Do barwienia HE Przygotowanie sekcji parafiny |
| Golarka | Shenzhen Cordes Electrical Appliance Co., Ltd. | Nie dotyczy Do | golenia sierści szczura |
| Chlorek sodu | Chemical Reagent Co., Ltd. | A501218-0001 | Do pobierania próbek |
| Sacharozy | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | S11055-500g | Do odwadniania gradientowego |
| Pojemnik izolacyjny | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsbwx8l | Do odparafinowania sekcji parafiny |
| Kasety do zatapiania tkanek, w kształcie prostokąta, z łamaną pokrywą. | Zhejiang Tuzhi Technologia farmaceutyczna Co., Ltd. | 31050102W | Do zatapiania tkanek barwiących HE |
| Szeroka taśma samoprzylepna | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Nie dotyczy Do | stabilizacji szczura podczas zabiegu |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission