Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
* Bu yazarlar eşit katkıda bulunmuştur
Burada, soğuk pıhtılaşma ve kan stazı olan sıçanlarda primer dismenore tedavisinde, dismenore sıçanların kıvranma reaksiyonunu önemli ölçüde iyileştirebilen ve ağrıyı hafifletebilen, göbek üzerinde otlar bölmeli yakı sırasında alınması gereken operasyon prosedürlerini ve önlemleri ayrıntılı olarak açıklıyoruz.
Primer dismenore (PDM), belirgin bir pelvik patoloji olmaksızın alt karın bölgesinde spazmodik kolik ağrı oluşumunu ifade eder, sıklıkla diğer sistemik semptomlar eşlik eder, bu da PDM'li kadınların yaşam kalitesini önemli ölçüde azaltır, adet gören kadınların% 45-95'i bundan etkilenir. PDM insidansının yüksek olmasına rağmen, genellikle iyi tedavi edilmez ve ilgili araştırmacılar ve kadınlar tarafından göz ardı edilir. Otlar bölmeli yakı (HPM), Çin'deki hastalıkları tedavi etmek için yaygın olarak kullanılan geleneksel Çin tıbbında (TCM) karakteristik bir dış terapidir; Hastanın akupunktur noktalarına bir Çin bitkisel formülü uygulayarak ve ardından yakı tedavisi için bitkisel formül üzerindeki moxa çubuklarını tutuşturarak hastalıkları tedavi eder. Bu çalışmada kullanılan bitkilerin birincil etkinliği, ağrıyı hafifletmek için qi dolaşımını teşvik eden meridyen aktivasyonu ve sıcaklığıdır. Moxibustion'ın ısı stimülasyonu, bitkilerin insan vücuduna infüzyonunu hızlandırabilir. Sonuç olarak, akupunktur noktası, bitkisel ve ısı stimülasyonlarını birleştiren HPM, jinekolojik bozuklukların, özellikle PDM gibi fonksiyonel hastalıkların tedavisi için uygundur. Bu makale, dişi deney sıçanlarında Shenque (CV8) akupunktur noktasında HPM için prosedürlerin ve önlemlerin ayrıntılı bir tanımını sağlar ve bu, PDM'de göbek üzerinde HPM'nin uygulanmasını ve geliştirilmesini daha iyi teşvik etmek için deneysel bir temel sağlar.
Fonksiyonel dismenore olarak da adlandırılan primer dismenore (PDM), ergen kızları ve adet gören genç kadınları etkileyen en yaygın jinekolojik hastalıklardan biridir1. Pelvik patoloji belirtisi olmaksızın menstrüasyon öncesi ve sonrası karın bölgesinde iltihabi problemlerle birlikte ağrı ve uterus kompresyonları (spazmlar) gibi yan etkiler ile karakterizedir2. Menstrüasyonun başlamasından 8-72 saat sonra başlayan, menstrüel akışınarttığı ilk birkaç gün içinde zirve yapan alt karın krampları 3,4 ve bazen sırt ve uyluklara yayılır polikistik PDM'nin karakteristik semptomlarıdır. Durumun farklı tanımları ve menstrüel ağrının yoğunluğunu değerlendirmek için standart yolların olmaması nedeniyle, kadınlarda tahmini dismenore prevalansı %45-%95 arasında değişmektedir3,4,5. Üreme çağındaki kadınların yaklaşık% 10 -% 25'inin gerçekten şiddetli PDM6'dan muzdarip olduğu düşünülmektedir. PDM prevalansı 20-24 yaş grubunda en yüksektir ve daha sonra giderek azalmaktadır2. PDM, sıklıkla bel ağrısı, bulantı, kusma, baş ağrısı, iştahsızlık, ishal 7 ve hatta depresyonve anksiyete 8,9 gibi diğer sistemik semptomların eşlik ettiği periyodik alt karın ağrısı ile karakterizedir. Menstrüasyon sırasında, dismenore olan kadınlar genel yaşam kalitesinde bir düşüş yaşarlar 4,8,10.
Ayrıca, çalışmalar, tekrarlanan adet ağrısının merkezi sinir sisteminin işlevini etkileyebileceğini ve hem ağrılı hem de ağrısız aşamalarda ağrı algısının değişmesine yol açabileceğinibulmuştur 11. PDM'nin etiyolojisinin prostaglandinlere (PG'ler) dayanması nedeniyle, PDM için en yaygın ilaç tedavisi steroid olmayan antienflamatuar ilaçlardır (NSAID'ler)12,13 ve bunu oral kontraseptifler14 izlemektedir. İlaçların yan etkilerine ek olarak, insanların% 10-20'si NSAID'lere ve kontraseptiflere cevap vermemektedir3. Mevcut araştırmaların çoğu, dismenorenin beyin anatomisi ve fizyolojisi üzerindeki etkileri ile ilgilidir ve terapötik yaklaşımlara çok az dikkat edilmektedir. Sonuç olarak, klinik uygulamada yaygın olarak uygulanabilecek, etkinliği kanıtlanmış ve hastalar tarafından kolayca kabul edilebilecek bir tedavi stratejisi bulmak için acil bir ihtiyaç vardır.
Otlar bölmeli yakı (HPM), Çin'deki hastalıkları tedavi etmek için yaygın olarak kullanılan geleneksel Çin tıbbında (TCM) karakteristik bir dış tedavidir. Avantajları arasında minimum maliyet, yan etki olmaması, uzun vadeli iyi etkiler, kolay kullanım ve hastalar tarafından kolay kabul edilmesi yer alır. HPM'nin göbek üzerindeki etkisinin PDM üzerindeki etkisinin önemliolduğu bulunmuştur 15, bu da uterusun yanı sıra mast hücreleri ve ilgili reseptörlerin16 soğuk ve sıcak eksikliği ve fazlalığının düzenlenmesi ile yakından ilişkili olabilir. Araştırma ekibi, HPM'nin adet ağrısını hemen hafifletebileceğini kanıtlamıştır17.
Zhang Zhong-jing başlangıçta Kadınların Çeşitli Hastalıkları ve Altın Odanın Tedavisinde dismenore kavramını kaydetti ve adet akışının kemer altında elverişsiz olduğunu ve karnın ağrı ile dolu olduğunu yazdı18. Ana semptomlarına göre, dismenore, geleneksel Çin tıbbında adet ağrısı ve adet karın ağrısı kategorisine bağlanabilir. Dismenore sendromları beşe ayrılabilir: qi ve kan eksikliği; soğuk pıhtılaşma ve kan durması; nemli ısı birikimi; qi durgunluğu ve kan durgunluğu; ve karaciğer ve böbrek yetmezliği16. İlgili çalışmalara göre, soğuk pıhtılaşma ve kan stazı sendromu PDM 19,20'nin en sık görülen sendromudur. TCM, PDM ve soğuk patojenlerin yakından bağlantılı olduğunu savunmaktadır21. Adet sırasında veya civarında, Xuehai'de aşırı bir kan akışı vardır ve bu da enerjik doğası nedeniyle qi-kanının hızlı bir şekilde tükenmesine yol açar. Sonuç olarak, kadınlar yeterli sağlıklı enerji eksikliği ve rahim ile Chong ve Ren meridyenlerindeki qi ve kanın hızlı dalgalanmaları nedeniyle hastalığa neden olan nedenlere karşı savunmasızdır22. İyi gelişmiş fiziğe sahip kadınlar, çiğ veya soğuk gıda tüketmekten kaçınmak ve adet sırasında soğuk algınlığına yakalanmamak için önlem almalıdır. Bunun yapılmaması, soğuk patojenlerin uterusa girmesine neden olabilir, bu da uterusta ve Chong ve Ren meridyenlerinde kanın pıhtılaşmasına ve durgunluğuna yol açabilir. Sonuç olarak, bireyler kan akışının durgunluğunun bir sonucu olarak ağrı yaşarlar. Hem dışarıdan soğuk algınlığı patojenlerinin girmesi hem de vücutta yin soğuğunun varlığı meridyenlerin tıkanmasına ve pıhtılaşmasına neden olabilir.
Dismenorenin yeri Chong ve Ren meridyenlerindedir ve başlangıcı qi ve kandaki değişikliklerle ilgilidir. TCM teorisinde, yakı, Yang Qi'yi uyararak, meridyenleri ısıtarak, soğuğu dağıtarak ve ağrıyı hafifletmek için kan akışını artırarak çalışır. Lingshu23'ten Jinfu'ya göre, nabız ve kan pıhtısı ortadaysa ve pıhtılaşmış kan ve soğuk kan varsa, o zaman yakı için uygundur; Tipik bir eksternal dismenore tedavisidir. Daha önce yayınlanmış bir çalışmada,24 artemisia argyi yaprağı acı ve keskin olarak tanımlanmıştır, neredeyse tükenmiş orijinal Yang'ı geri yükleyebilir, on iki meridyeni birbirine bağlayabilir, üç Yin meridyeninden geçebilir, Qi ve kanı düzenleyebilir, soğuğu ve rutubeti giderebilir ve uterusu ısıtabilir, yakı, karşılık gelen akupunktur noktalarının yardımıyla, patojenik faktörleri dışarıdan dışarı atabilir, Qi ve kanı dahili olarak düzenler ve böylece meridyenlerin düzenlenmesinde, kan dolaşımının aktive edilmesinde ve ağrının durdurulmasında rol oynar. Shenque (CV8) olarak da bilinen göbek, Du, Chong ve Dai meridyenlerini birbirine bağlayan Ren meridyenine aittir. TCM teorisine göre, Shenque'nin beş zang ve altı fu25 ile ilgili olduğuna inanılıyor. Doğuştan bir temel ve yin-yang dengesinin ekseni olarak kabul edilir. Anatomik olarak, PDM pelvise yakındır ve uterusa yakından bağlıdır. PDM hastalığı özellikle uterusu etkiler ve patogenezi qi ve kan dengesizliğinin yanı sıra iç organların dengesizliğini içerir. Shenque noktasını uyararak, uterusun qi ve kan durumunu doğrudan etkilemek ve adet kramplarını etkili bir şekilde tedavi etmek mümkündür. Yukarıda bahsedilen teoriye dayanarak, dismenore semptomlarını iyileştirmek ve ağrıyı hafifletmek amacıyla HPM tedavisi için abdominal bölgede bulunan Shenque akupunktur noktasının uyarılmasını seçtik.
TCM'nin PDM'ye müdahalesini soğuk pıhtılaşma ve kan stazı ile mümkün olduğunca yakından taklit etmek için, dişi sıçanlarda göbek üzerinde HPM tekniğini tekrarladık. Göbek üzerindeki HPM'nin belirgin bir analjezik etkiye sahip olduğu ve dismenore sıçanlarının kıvranma reaksiyonunu azaltabileceği keşfedildi. PDM'yi iyileştirmek ve teşvik etmek için göbek üzerindeki HPM mekanizmasını araştırmak için, sıçanları sabitleme ve göbekteki Shenque akupunktur noktasında HPM gerçekleştirme tekniğini inceledik.
Bu deneysel protokol, Zhejiang Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Deney Hayvanları Yönetimi ve Etik İnceleme Komitesi tarafından onaylanmıştır. Hayvanlar üzerinde yapılan tüm deney işlemleri, deney hayvanı refahı etiği ve hayvan deney güvenliği yönetmeliklerine uygundur. Çalışmada, Zhejiang Çin Tıbbı Üniversitesi Laboratuvar Hayvanları Merkezi'nden 8-10 haftalık yetişkin dişi Wistar sıçanları kullanıldı. Deneyden önce, sıçanlar kontrollü bir ortamda (sıcaklık: 23-25 °C, nem: %40-%60) 1 hafta boyunca uyarlanabilir bir diyetle beslendi. Sıçanlar, ışıklar 8:00 ile 20:00 saatleri arasında açık olacak şekilde 12 saatlik bir aydınlık-karanlık döngüsünde tutuldu ve yiyecek ve suya sınırsız erişime sahipti. Aşağıdaki protokol, soğuk pıhtılaşma ve kan staz modeli kurulumu ile PDM'yi ve göbek tedavisi prosedüründe HPM'yi açıklamaktadır. Prosedürün bir temsili Şekil 1'de gösterilmiştir.
1. Soğuk pıhtılaşma ve kan stazı ile PDM'nin kurulması
2. Soğuk pıhtılaşma ve kan stazı olan PDM model dişi sıçanlarda HPM göbek tedavisi
NOT: HPM göbek tedavisi için en önemli dört materyali hazırlayın (bkz.
3. Davranış testinin yapılması
4. Davranış testinden sonra numunenin alınması
Bu çalışmada, HPM göbek tedavisinin etkisini gözlemlemek için soğuk pıhtılaşma ve kan staz tipinin PDM modelini indüklemek için oksitosin ile kombinasyon halinde estradiol benzoat kullanıldı. İlk olarak, sıçanın kıvranma davranışını gözlemleyerek, soğuk pıhtılaşma ve kan stazı olan PDM sıçanının başarılı bir şekilde modellenip modellenmediğini belirleyin ve sıçanın ağrı davranışını, modellemesini ve rahim üzerindeki tedavisini WS, WL'ler ve...
Şu anda, soğuk pıhtılaşma ve kan staz tipi ile PDM için çeşitli modelleme yöntemleri vardır, ancak ana yöntem, dismenore modellemesi için oksitosin ile birleştirilmiş estradiol benzoattır ve bu temelde farklı olacaktır. Bu çalışmada modelleme için östradiol benzoat ve oksitosin ile kombine edilerek tüm vücut dondurma yöntemi kullanılmıştır. Tüm vücut dondurma yönteminin sıcaklığı -20 °C idi. Önceki ön deneyde, sıcaklık -25 °C olduğunda, sıçan...
Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Bu çalışma, Zhejiang İl Doğa Bilimleri Vakfı, Q Keşif Programı (LQ20H270012), Zhejiang Geleneksel Çin Tıbbı Teknoloji Planı (NO.2020ZB124), Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi Araştırma Projesi (NO.2021JKZKTS056B) ve Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi Üçüncü Bağlı Hastanesinin Hastane Düzeyinde Projesi (NO. ZS22ZA01). Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi Deney Hayvanları Merkezi'ne ve Zhejiang Eyaleti Akupunktur ve Nöroloji Anahtar Laboratuvarı'na bize deneysel koşulları sağladıkları için minnettarız.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.9% physiological saline | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | SLYSZ1A | For injecting the control group |
1 mL disposable sterile syringe | Changzhou Yuekang Medical Equipment Co., Ltd. | 3000-0515-14 | For drug injection |
3 mL (extended) Pasteur pipette | Beijing Lanjieke Technology Co., Ltd. | YCKJ-HC-007245 | For mounting |
75% disinfection alcohol | Hangzhou OUTOP Biotechnology Co., Ltd. | N/A | For sterilizing the treatment site |
Adhesive-coated glass slide | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | 188105W | For HE staining |
Biochemical incubator | Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Medical Equipment Factory | N/A | For tissue dewaxing in HE staining |
Cloth material | In-house preparation | N/A | Pouch to hold rat |
Digital manager slice scanning system | Hamamatsu | C13210-01 | For HE slice scanning |
Disposable latex gloves | Guangzhou Lige Technology Co., Ltd. | LG10-102-1I | For use during operation |
Estradiol benzoate | Hefei Xinkexin Animal Pharmaceutical Co., Ltd. | N/A | For establishing dysmenorrhea model |
Excelsior AS Fully automatic dehydrator | Thermo Scientific | Excelsior AS | For HE staining tissue dehydration |
Female Wistar rats | Laboratory Animal Center of Zhejiang Chinese Medicine University | N/A | 220–250 g |
Flour | In-house preparation | N/A | For herbs-partitioned moxibustion treatment |
Forcep | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | For specimen collection |
Formaldehyde | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd. | 441244-1KG | For tissue fixation |
Gemini AS slide stainer | Thermo Scientific | Gemini AS | Staining machine |
Hemostat | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | For specimen collection |
HistoCore | Leica ( Arcadia H ) | 14039357258 | For HE staining tissue embedding |
Medical cotton ball sterile | The Third Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University | N/A | For sterilize the tratment site |
Methylene blue staining solution (0.1%) | Beijing Honghu United Chemical Products Co., Ltd. | G1300 | For screening estrous cycle |
Microdissection Shears | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | XWJ12A | For specimen collection |
Microscope cover glass (24 mm x 50 mm) | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | 10212450C | For HE staining |
Microtome | Leica Microsystems | RM2255 | For tissue sectioning |
Midea freezer | Hefei Midea Refrigerator Co., Ltd. | N/A | For establishing dysmenorrhea model with cold coagulation and blood stasis |
Molar forceps | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | YGJD-11 | For specimen collection |
Mounting medium | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | CS9603-100mL | For tissue mounting |
Moxa stick | The Third Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University | N/A | For herbs-partitioned moxibustion treatment |
Pentobarbital sodium | Hangzhou Dawen Biological Co., Ltd. | N/A | For specimen collection |
Phosphate Buffered Saline (PBS) | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | P1010-2L | For specimen collection |
Scissor | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | For specimen collection |
Sectioning blade | Shanghai Saihan Technology Co., Ltd. | LEICA-819-box | For HE staining paraffin section preparation |
Shaver | Shenzhen Cordes Electrical Appliance Co., Ltd. | N/A | For shaving a rat's hair |
Sodium Chloride | Chemical Reagent Co., Ltd. | A501218-0001 | For specimen collection |
Sucrose | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | S11055-500g | For gradient dehydration |
Thermal insulation container | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsbwx8l | For paraffin section dewaxing |
Tissue embedding cassettes, rectangular in shape, with a breakable lid. | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | 31050102W | For HE staining tissue embedding |
Wide adhesive tape | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | N/A | For stabilizing rat during the treatment procedure |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır