Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Method Article
Здесь мы подробно описываем операционные процедуры и меры предосторожности, которые должны быть предприняты во время травяно-раздельного прижигания на пупке при лечении первичной дисменореи у крыс с холодовым свертыванием и застоем крови, что может значительно улучшить извивающуюся реакцию крыс с дисменореей и облегчить боль.
Первичная дисменорея (ПМД) относится к возникновению спазматических коликообразных болей внизу живота без какой-либо явной патологии органов малого таза, часто сопровождающихся другими системными симптомами, что значительно снижает качество жизни женщин с ПМД, им страдают 45%-95% женщин, совершающих менструацию. Несмотря на высокую заболеваемость ПДМ, она часто плохо лечится и игнорируется соответствующими исследователями и самими женщинами. Травяно-расчлененное прижигание (ГПМ) является характерной наружной терапией в традиционной китайской медицине (ТКМ), которая широко используется для лечения заболеваний в Китае; он лечит болезни путем нанесения китайской травяной формулы на акупунктурные точки пациента, а затем поджигания палочек моксы на травяной формуле для терапии прижиганием. Основной эффективностью трав, используемых в этом исследовании, является активация меридианов и согревание, что стимулирует циркуляцию ци для облегчения боли. Тепловая стимуляция прижигания может ускорить вливание трав в организм человека. Следовательно, HPM, который сочетает в себе акупунктурные, травяные и тепловые стимуляции, подходит для лечения гинекологических заболеваний, особенно функциональных заболеваний, таких как PDM. В данной статье представлено подробное описание процедур и мер предосторожности при ГПМ в акупунктурной точке Шенке (CV8) у самок экспериментальных крыс, что обеспечивает экспериментальную основу для лучшего содействия применению и развитию ГПМ на пупке при ПДМ.
Первичная дисменорея (ПДМ), также называемая функциональной дисменореей, является одним из наиболее распространенных гинекологических заболеваний, поражающих девочек-подростков и менструирующих молодых женщин1. Для него характерны такие побочные эффекты, как боль и спазмы матки, а также воспалительные проблемы в области живота до и после менструации без каких-либо признаков патологии органов малого таза2. Спазмы внизу живота, которые начинаются через 8-72 ч после начала менструации, достигают пика в первые несколько дней повышенных менструальных выделений 3,4, а иногда распространяются на спину и бедра, являются характерными симптомами поликистоза ПДМ. Из-за различий в определениях состояния и отсутствия стандартизированных способов оценки интенсивности менструальной боли предполагаемая распространенность дисменореи у женщин колеблется от 45% до 95%3,4,5. Считается, что около 10-25% женщин репродуктивного возраста страдают от действительно тяжелой формы ПМР6. Распространенность ДПМ наиболее высока в возрастной группе от 20 до 24 лет и в дальнейшем постепенно снижается2. ПДМ характеризуется периодической болью в нижней части живота, которая часто сопровождается другими системными симптомами, такими как боль в пояснице, тошнота, рвота, головные боли, анорексия, диарея7 и даже психические симптомы, такие как депрессия и тревога 8,9. Во время менструации у женщин с дисменореей наблюдается снижение общего качества жизни 4,8,10.
Кроме того, исследования показали, что повторяющиеся менструальные боли могут влиять на функцию центральной нервной системы, приводя к изменению восприятия боли как на болезненных, так и на безболезненных стадиях11. В связи с тем, что этиология ПДМ основана на простагландинах (ПГ), наиболее распространенным медикаментозным лечением ПДМ являются нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП)12,13, за которыми следуют оральные контрацептивы14. В дополнение к побочным эффектам лекарств, 10-20% людей не реагируют на НПВП и контрацептивы3. Большинство современных исследований посвящено влиянию дисменореи на анатомию и физиологию мозга, при этом мало внимания уделяется терапевтическим подходам. Следовательно, существует острая необходимость в поиске стратегии лечения, которая могла бы быть широко применена в клинической практике, с установленной эффективностью и легко принята пациентами.
Прижигание с расщеплением трав (ГПМ) является характерной наружной терапией в традиционной китайской медицине (ТКМ), которая широко используется для лечения заболеваний в Китае. Его преимущества включают минимальную стоимость, отсутствие побочных эффектов, хорошие долгосрочные эффекты, простоту в эксплуатации и легкое принятие пациентами. Установлено, что влияние ГПМ на пупок на ПДМ является значительным15, что может быть тесно связано с регуляцией дефицита и избытка холода и тепла в матке, а также тучных клеток и связанных с ними рецепторов16. Исследовательская группа доказала, что HPM может мгновенно облегчить менструальные боли17.
Чжан Чжун-цзин первоначально записал концепцию дисменореи в книге «Различные женские болезни и лечение Золотой палаты», написав, что менструальные выделения неблагоприятны под поясом, а живот полон боли18. По своим основным симптомам дисменорею можно отнести к категории менструальных болей и менструальных болей в животе в традиционной китайской медицине. Синдромы дисменореи можно разделить на пять: ци и дефицит крови; свертываемость холода и застой крови; накопление влаги и тепла; застой ци и застой крови; и недостаточность печени и почек16. Согласно соответствующим исследованиям, синдром холодового свертывания крови и застоя крови является наиболее распространенным синдромом ПДМ19,20. ТКМ считает, что ПДМ и патогены простуды тесно связаны21. Во время менструации или около нее в Сюэхае происходит чрезмерный приток крови, что приводит к быстрому истощению крови ци из-за ее энергетической природы. Следовательно, женщины уязвимы к причинам, вызывающим болезни, из-за недостатка достаточного количества здоровой энергии и быстрых колебаний ци и крови в матке, а также на меридианах Чун и Жэнь. Женщинам, которые имеют хорошо развитое телосложение, следует соблюдать меры предосторожности, избегать употребления сырой или холодной пищи и не допускать простуды во время менструации. Невыполнение этого требования может привести к проникновению в матку возбудителей простуды, что приведет к свертыванию и застою крови в матке и меридианах Чонг и Жэнь. Следовательно, люди испытывают боль в результате застоя кровотока. Как вторжение возбудителей простуды извне, так и присутствие инь-холода в организме могут вызвать закупорку и свертывание меридианов.
Дисменорея находится в меридианах Чонг и Жэнь, а начало связано с изменениями ци и крови. В теории ТКМ прижигание работает путем стимуляции Ян Ци, нагревания меридианов, рассеивания холода и увеличения кровотока для облегчения боли. По мнению Цзиньфу из Линшу23, если пульс и сгусток крови находятся посередине, и есть застывшая кровь и холодная кровь, то это подходит для прижигания; Это типичный метод лечения наружной дисменореи. В ранее опубликованной работе24 листа Artemisia argyi описаны как горькие и острые, способные восстанавливать почти исчерпанный исходный Ян, соединять двенадцать меридианов, пробегать по трем меридианам Инь, регулировать Ци и кровь, рассеивать холод и сырость, и согревать матку, прижигание, с помощью соответствующих акупунктурных точек, может изгонять патогенные факторы извне, Регулируют ци и кровь изнутри и тем самым играют роль в регулировании меридианов, активизируя кровообращение и останавливая боль. Пупок, также известный как Шеньцюэ (CV8), относится к меридиану Жэнь, соединяя меридианы Ду, Чун и Дай. Согласно теории ТКМ, считается, что Шэньцюэ связан с пятью цзан и шестью фу25. Он рассматривается как врожденная основа и стержень баланса инь-ян. Анатомически ПДМ находится в непосредственной близости к малому тазу и тесно связан с маткой. Болезнь ДПМ специфически поражает матку, и ее патогенез включает дисбаланс ци и крови, а также дисбаланс внутренних органов. Стимулируя точку Шеньцюэ, можно напрямую влиять на ци и состояние крови матки и эффективно лечить менструальные спазмы. Основываясь на вышеупомянутой теории, мы выбрали стимуляцию акупунктурной точки Шенке, расположенной в области живота, для терапии HPM с целью облегчения симптомов дисменореи и облегчения боли.
Чтобы как можно точнее имитировать вмешательство ТКМ в ПДМ с холодосвертыванием и застоем крови, мы воспроизвели технику ГПМ на пупке у самок крыс. Было обнаружено, что ГПМ на пупке обладает выраженным обезболивающим эффектом и может уменьшить реакцию на извивание у крыс с дисменореей. Для того, чтобы исследовать механизм ГПМ на пупке для улучшения ПДМ и его продвижения, мы рассмотрели технику фиксации крыс и выполнения ГПМ в акупунктурной точке Шенке в области живота.
Этот экспериментальный протокол был одобрен Комитетом по управлению экспериментальными животными и этике Чжэцзянского университета традиционной китайской медицины. Все экспериментальные операции на животных проводятся в соответствии с этикой благополучия экспериментальных животных и правилами безопасности экспериментальных животных. В исследовании использовались взрослые самки крыс Wistar в возрасте 8-10 недель из Центра лабораторных животных Чжэцзянского университета китайской медицины. Перед началом эксперимента крыс кормили адаптивным рационом в течение 1 недели в контролируемой среде (температура: 23-25 °С, влажность: 40%-60%). Крысы содержались в 12-часовом цикле свет-темнота, свет включался с 8:00 до 20:00, и имели неограниченный доступ к пище и воде. В приведенном ниже протоколе описывается ПДМ с установлением модели холодового свертывания и застоя крови, а также ГПМ на процедуре пупочной терапии. Представление процедуры показано на рисунке 1.
1. Установление ПДМ с холодной коагуляцией и застоем крови
2. Пупочная терапия HPM на крысах модели PDM с холодосвертыванием и застоем крови
ПРИМЕЧАНИЕ: Подготовьте четыре наиболее важных материала для пупочной терапии HPM (см. Таблицу материалов).
3. Проведение поведенческого теста
4. Взятие образца после поведенческого теста
В этом исследовании эстрадиола бензоат в комбинации с окситоцином использовали для индуцирования модели ПДМ холодовой свертываемости и типа застоя крови для наблюдения за эффектом терапии пупком HPM. Во-первых, наблюдая за извивающимся поведением крысы, определить, б...
В настоящее время существуют различные методы моделирования ПДМ с холодосвертывающей структурой и типом застоя крови, но основным методом является эстрадиола бензоат в сочетании с окситоцином для моделирования дисменореи, которые будут отличаться на этой основе. В ...
У авторов нет конфликта интересов, о котором можно было бы заявить.
Эта работа была поддержана Фондом естественных наук провинции Чжэцзян, исследовательской программой Q (LQ20H270012), Чжэцзянским технологическим планом традиционной китайской медицины (NO.2020ZB124), Исследовательским проектом Чжэцзянского китайского медицинского университета (NO.2021JKZKTS056B) и Проектом больничного уровня третьей аффилированной больницы Чжэцзянского китайского медицинского университета (NO. ZS22ZA01). Мы благодарны Центру экспериментальных животных Чжэцзянского китайского медицинского университета и Ключевой лаборатории акупунктуры и неврологии провинции Чжэцзян за предоставленные нам условия для экспериментов.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.9% physiological saline | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | SLYSZ1A | For injecting the control group |
1 mL disposable sterile syringe | Changzhou Yuekang Medical Equipment Co., Ltd. | 3000-0515-14 | For drug injection |
3 mL (extended) Pasteur pipette | Beijing Lanjieke Technology Co., Ltd. | YCKJ-HC-007245 | For mounting |
75% disinfection alcohol | Hangzhou OUTOP Biotechnology Co., Ltd. | N/A | For sterilizing the treatment site |
Adhesive-coated glass slide | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | 188105W | For HE staining |
Biochemical incubator | Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Medical Equipment Factory | N/A | For tissue dewaxing in HE staining |
Cloth material | In-house preparation | N/A | Pouch to hold rat |
Digital manager slice scanning system | Hamamatsu | C13210-01 | For HE slice scanning |
Disposable latex gloves | Guangzhou Lige Technology Co., Ltd. | LG10-102-1I | For use during operation |
Estradiol benzoate | Hefei Xinkexin Animal Pharmaceutical Co., Ltd. | N/A | For establishing dysmenorrhea model |
Excelsior AS Fully automatic dehydrator | Thermo Scientific | Excelsior AS | For HE staining tissue dehydration |
Female Wistar rats | Laboratory Animal Center of Zhejiang Chinese Medicine University | N/A | 220–250 g |
Flour | In-house preparation | N/A | For herbs-partitioned moxibustion treatment |
Forcep | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | For specimen collection |
Formaldehyde | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd. | 441244-1KG | For tissue fixation |
Gemini AS slide stainer | Thermo Scientific | Gemini AS | Staining machine |
Hemostat | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | For specimen collection |
HistoCore | Leica ( Arcadia H ) | 14039357258 | For HE staining tissue embedding |
Medical cotton ball sterile | The Third Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University | N/A | For sterilize the tratment site |
Methylene blue staining solution (0.1%) | Beijing Honghu United Chemical Products Co., Ltd. | G1300 | For screening estrous cycle |
Microdissection Shears | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | XWJ12A | For specimen collection |
Microscope cover glass (24 mm x 50 mm) | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | 10212450C | For HE staining |
Microtome | Leica Microsystems | RM2255 | For tissue sectioning |
Midea freezer | Hefei Midea Refrigerator Co., Ltd. | N/A | For establishing dysmenorrhea model with cold coagulation and blood stasis |
Molar forceps | Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd. | YGJD-11 | For specimen collection |
Mounting medium | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | CS9603-100mL | For tissue mounting |
Moxa stick | The Third Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University | N/A | For herbs-partitioned moxibustion treatment |
Pentobarbital sodium | Hangzhou Dawen Biological Co., Ltd. | N/A | For specimen collection |
Phosphate Buffered Saline (PBS) | Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd. | P1010-2L | For specimen collection |
Scissor | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsnz | For specimen collection |
Sectioning blade | Shanghai Saihan Technology Co., Ltd. | LEICA-819-box | For HE staining paraffin section preparation |
Shaver | Shenzhen Cordes Electrical Appliance Co., Ltd. | N/A | For shaving a rat's hair |
Sodium Chloride | Chemical Reagent Co., Ltd. | A501218-0001 | For specimen collection |
Sucrose | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | S11055-500g | For gradient dehydration |
Thermal insulation container | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | lsbwx8l | For paraffin section dewaxing |
Tissue embedding cassettes, rectangular in shape, with a breakable lid. | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | 31050102W | For HE staining tissue embedding |
Wide adhesive tape | Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | N/A | For stabilizing rat during the treatment procedure |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены