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Resumo

Perda da integridade peritoneal oferece um novo paradigma para entender e tratar a dor pélvica crônica em mulheres com formas leves de endometriose e pode ser facilmente detectada usando intra instilação de corante no momento da laparoscopia.

Resumo

A endometriose é uma doença comum que afeta 40 a 70% das mulheres em idade reprodutiva com dor pélvica crônica (CPP) e / ou infertilidade. O objectivo do presente estudo foi demonstrar a utilização de um corante azul (azul de metileno) para corar as superfícies peritoneais durante a laparoscopia (L / S) para detectar a perda de integridade peritoneal em pacientes com dor pélvica e endometriose suspeita. Quarenta mulheres com CPP e 5 mulheres sem dor foram avaliados neste estudo piloto. Durante L / S, corante concentrada foi pulverizado sobre as superfícies peritoneais, em seguida, aspirada e lavada com solução de Lactato de Ringer. Áreas de captação de corante localizados foram avaliados para a presença de lesões endometrióticas visíveis. Áreas de coloração intensa peritoneal foram ressecados e alguns fixado em 2,5% glutaraldeído tamponado e examinadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Absorção do corante azul era mais comum em mulheres com endometriose e dor pélvica crônica do que os controles (85% vs 40%). Ressecção do stai azuláreas ned revelou endometriose por SEM e perda de contacto célula-célula peritoneal em comparação com o normal, o peritoneu não mancha. Peritônio afetada foi associado com implantes de endometriose mais visíveis, mas não em todos os pacientes. Alívio da dor subjetiva foi relatada em 80% dos sujeitos. Com base em microscopia eletrônica de varredura, podemos concluir que as células do endométrio se estendem além implantes visíveis de endometriose e parecem prejudicar o mesotélio subjacente. Lesões sutis de endometriose pode, portanto, causar dor pélvica pela ruptura da integridade peritoneal, permitindo que o sangue menstrual ou ovulatório e dor associada ao acesso a fatores subjacentes nervos sensoriais. Ressecção completa do peritônio afetada pode proporcionar um melhor tratamento a longo prazo para a endometriose e CPP. Esta técnica simples aparece para melhorar a detecção de sutil ou perto de endometriose em mulheres com invisível CPP e mínima descobertas visuais em L / S e pode servir para elevar a precisão do diagnóstico de endometriosea laparoscopia.

Protocolo

1. Seleção de Pacientes

  1. Mulheres com dor pélvica crônica submetidos a uma história e exame físico.
  2. Localização de dor, no que diz respeito ao tempo do ciclo menstrual, sintomas associados incluindo queixas do intestino irritável ou queixas da bexiga são notadas e registadas.
  3. Mulheres submetidas a uma laparoscopia são consentiu para ressecção possível de endometriose e utilização dos seus tecidos para investigação.

2. Técnicas laparoscópicas

  1. A laparoscopia é realizada utilizando técnicas padrão através de uma porta umbilical 5 mm e mais 5 portas mm no abdómen inferior.
  2. Inspecção cuidadosa do pélvica é realizada para correlacionar os achados da endometriose com a localização pré-operatória da dor, como indicado pelo paciente.
  3. Corante azul de metileno é misturada com solução salina estéril a 1:200 e injecta-se superfícies pélvicos utilizando uma agulha de aspiração.
  4. Irrigação sucção é realizada para remover o excessotingir e lavar as superfícies peritoneais.
  5. A bacia é inspecionado e as áreas de absorção do corante azul são registrados.
  6. Quando possível, a ressecção das áreas afetadas de peritônio é realizada.

3. Microscopia Eletrônica de Varredura

  1. Secções peritoneais são suturados a uma placa Telfa estéril para achatar a amostra e manter a orientação (lado intraperitoneal acima) e colocado em fixador de glutaraldeido (Sigma, St. Louis, MO) para SEM.
  2. As amostras foram orientadas e pós-fixados em 1% de tetróxido de ósmio tamponado durante 1 hora e desidratados com concentrações de etanol sequenciais.
  3. As amostras foram secas utilizando dióxido de carbono líquido e montados em alumínio digitalização stubs microscópio electrónico com pasta de prata coloidal e por pulverização catódica com ouro revestido: liga de platina com uma espessura de 20 nM.
  4. Microscopia eletrônica de varredura foi realizada usando um modelo JEOL JSM-6400 microscopia e fotomicrografias obtidas das 12 áreas aleatórias.

Resultados

Um exemplo de endometriose subtil que era quase invisível é mostrado na Figura 1A. Antes da aplicação do corante azul de uma área de peritoneu irregular stippled foi apreciado auxiliada pela reflexão da luz por laparoscopia. Na Figura 1B, a aparência desta mesma área após coloração mostra o mesmo padrão irregular sobre a bexiga (Figura 1B). Uma vez que esta porção do peritoneu foi ressecado (Figura 1C), foi submetido a um SEM mostrou que r...

Discussão

A dor pélvica crônica em mulheres é um problema caro e mal compreendida 1. Dismenorreia é a forma mais comum de dor pélvica afectam 60% das mulheres 2 e 72% dos adolescentes 3. A endometriose é uma condição inflamatória que afecta 5% de mulheres normais, mas está presente em até 70% das mulheres com dor pélvica. Embora a endometriose contribui para a dor pélvica crônica (CPP), um mecanismo pelo qual as lesões causam dor permanece incerto 4. Paradoxalmente, a sev...

Divulgações

Não há conflitos de interesse declarados.

Agradecimentos

Gostaríamos de agradecer a ajuda excelente técnica de Angela Houwing e ajudar com coleta de dados de Greta Bushnell.

Materiais

NameCompanyCatalog NumberComments
Nome do reagente Companhia Número de catálogo Comentários (opcional)
Azul de metileno Reagente americano NDC0517-0310-110 1:200 misturada em soro fisiológico

Referências

  1. Won, H. R., Abbott, J. Optimal management of chronic cyclical pelvic pain: an evidence-based and pragmatic approach. Int. J. Womens Health. 2, 263-277 (2011).
  2. Burnett, M. A., et al. Prevalence of primary dysmenorrhea in Canada. J. Obstet. Gynaecol. Can. 27, 765-770 (2005).
  3. Andersch, B., Milsom, I. An epidemiologic study of young women with dysmenorrhea. American journal of obstetrics and gynecology. 144 (82), 655-660 (1982).
  4. Stratton, P., Berkley, K. J. Chronic pelvic pain and endometriosis: translational evidence of the relationship and implications. Human reproduction update. , (2010).
  5. Garry, R., Clayton, R., Hawe, J. The effect of endometriosis and its radical laparoscopic excision on quality of life indicators. BJOG. 107, 44-54 (2000).
  6. Vercellini, P., et al. Endometriosis and pelvic pain: Relation to disease stage and localization. Fertility and sterility. 65, 299 (1996).
  7. Sinaii, N., Cleary, S. D., Younes, N., Ballweg, M. L., Stratton, P. Treatment utilization for endometriosis symptoms: a cross-sectional survey study of lifetime experience. Fertility and sterility. 87, 1277-1286 (2007).
  8. Maroun, P., Cooper, M. J., Reid, G. D., Keirse, M. J. Relevance of gastrointestinal symptoms in endometriosis. The Australian & New Zealand journal of obstetrics. 49, 411-414 (2009).
  9. Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. Endometriosis: cost estimates and methodological perspective. Human reproduction update. 13, 395-404 (2007).
  10. Sinaii, N., Cleary, S. D., Ballweg, M. L., Nieman, L. K., Stratton, P. High rates of autoimmune and endocrine disorders, fibromyalgia, chronic fatigue syndrome and atopic diseases among women with endometriosis: a survey analysis. Hum. Reprod. 17, 2715-2724 (2002).
  11. Chung, M. K., Chung, R. P., Gordon, D. Interstitial cystitis and endometriosis in patients with chronic pelvic pain: The "Evil Twins" syndrome. JSLS: Journal of the Society of Laparoendoscopic Surgeons / Society of Laparoendoscopic Surgeons. 9, (2005).
  12. Hadfield, R., Mardon, H., Barlow, D., Kennedy, S. Delay in the diagnosis of endometriosis: A survey of women from the USA and the UK. Hum. Reprod. 11, 878 (1996).
  13. D'Hooghe, T. M., Debrock, S., Hill, J. A., Meuleman, C. Endometriosis and subfertility: is the relationship resolved?. Seminars in reproductive medicine. 21, 243-254 (2003).
  14. Stegmann, B. J., et al. Using location, color, size and depth to characterize and identify endometriosis lesions in a chort of 133 women. Fertility and sterility. 89, 1632-1636 (2008).
  15. Howard, F. M. The role of laparoscopy in the chronic pelvic pain patient. Clinical obstetrics and gynecology. 46, 749-766 (2003).
  16. Brosens, I., Vasquez, G., Gordts, S. Scanning electron microscopy study of the pelvic peritoneum in unexplained infertility and endometriosis. Fertility and sterility. 41, 21S (1984).
  17. Donnez, J., Van Langendonckt, A. Typical and subtle atypical presentations of endometriosis. Curr Opin Obstet Gynecol. 16, 431-437 (2004).
  18. Murphy, A. A., Green, W. R., Bobbie, D., dela Cruz, Z. C., Rock, J. A. Unsuspected endometriosis documented by scanning electron microscopy in visually normal peritoneum. Fertility and sterility. 46, 522 (1986).
  19. Vasquez, G., Cornillie, F., Brosens, I. Peritoneal endometriosis: scanning electron microscopy and histology of minimal pelvic endometriotic lesions. Fertility and sterility. 42, 696 (1984).
  20. Berkley, K. J., Cason, A., Jacobs, H., Bradshaw, H., Wood, E. Vaginal hyperalgesia in a rat model of endometriosis. Neuroscience. 306, 185-188 (2001).
  21. Berkley, K. J., Rapkin, A. J., Papka, R. E. The pains of endometriosis. Science. 308, 1587-1589 (2005).
  22. Morrison, T. C., Dmitrieva, N., Winnard, K. P., Berkley, K. J. Opposing viscerovisceral effects of surgically induced endometriosis and a control abdominal surgery on the rat bladder. Fertility and sterility. 86, 1067-1073 (2006).
  23. Al-Jefout, M., et al. Diagnosis of endometriosis by detection of nerve fibres in an endometrial biopsy: a double blind study. Hum. Reprod. 24, 3019-3024 (2009).
  24. Mechsner, S., et al. A pilot study to evaluate the clinical relevance of endometriosis-associated nerve fibers in peritoneal endometriotic lesions. Fertility and sterility. , (2008).
  25. Tokushige, N., Markham, R., Russell, P., Fraser, I. S. Nerve fibres in peritoneal endometriosis. Hum. Reprod. 21, 3001-3007 (2006).
  26. Sanfilippo, J. S., Williams, R. S., Yussman, M. A., Cook, C. L., Bissonnette, F. Substance P in peritoneal fluid. Am. J. Obstet. Gynecol. 166, 155-159 (1992).
  27. Scholl, B., Bersinger, N. A., Kuhn, A., Mueller, M. D. Correlation between symptoms of pain and peritoneal fluid inflammatory cytokine concentrations in endometriosis. Gynecol. Endocrinol. 25, 701-706 (2009).
  28. Aghaey Meibody, F., et al. Diagnosis of endometrial nerve fibers in women with endometriosis. Archives of gynecology and obstetrics. , (2010).
  29. Huhnel, W., Beier, H. M. Studies on the innervation of the endometrium. Cell and tissue research. 167, 527-536 (1976).
  30. Tokushige, N., Markham, R., Russell, P., Fraser, I. S. High density of small nerve fibres in the functional layer of the endometrium in women with endometriosis. Hum. Reprod. 21, 782-787 (2006).
  31. Rauh-Hain, J. A., Laufer, M. R. Increased diagnostic accuracy of laparoscopy in endometriosis using indigo carmine: a new technique. Fertil. Steril. 95, 1113-1114 (2011).
  32. Howard, F., Howard, F. M., Perry, C. P., Carter, J. E., El-Minawi, A. M. . Pelvic Pain: Diagnosis and Management. , 125-150 (2000).
  33. Sutton, C. J. G., Ewen, S. P., Whitelaw, N., Haines, P. Prospective, randomized, double-blind, controlled trial of laser laparoscopy in the treatment of pelvic pain associated with minimal, mild, and moderate endometriosis. Fertility and sterility. 62, 696 (1994).
  34. Berlanda, N., Vercellini, P., Fedele, L. The outcomes of repeat surgery for recurrent symptomatic endometriosis. Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 22, 320-325 (2010).
  35. Howard, F. M. The role of laparoscopy in chronic pelvic pain: promise and pitfalls. Obstet. Gynecol. Surv. 48, 357-387 (1993).
  36. Hayata, T., Matsu, T., Kawano, Y., Matsui, N., Miyakawa, I. Scanning electron microscopy of endometriotic lesions in the pelvic peritoneum and the histogenesis of endometriosis. Int. Fed. of Gyn. and Obs. 39, 311 (1992).
  37. Cheong, Y. C., et al. Peritoneal healing and adhesion formation/reformation. Human reproduction update. 7, 556-566 (2001).
  38. Witz, C. A., Cho, S., Centonze, V. E., Montoya-Rodriguez, I. A., Schenken, R. S. Time series analysis of transmesothelial invasion by endometrial stromal and epithelial cells using three-dimensional confocal microscopy. Fertility and sterility. 79, 770-778 (2003).
  39. Witz, C. A., et al. Culture of menstrual endometrium with peritoneal explants and mesothelial monolayers confirms attachment to intact mesothelial cells. Hum. Reprod. 17, 2832-2838 (2002).
  40. Witz, C. A., et al. An in vitro model to study the pathogenesis of the early endometriosis lesion. Annals of the New York Academy of Sciences. 955, 296-406 (2002).
  41. Witz, C. A., et al. Short-term culture of peritoneum explants confirms attachment of endometrium to intact peritoneal mesothelium. Fertility and sterility. 75, 385-390 (2001).
  42. Witz, C. A., Montoya-Rodriguez, I. A., Miller, D. M., Schneider, B. G., Schenken, R. S. Mesothelium expression of integrins in vivo and in vitro. J. Soc. Gynecol. Investig. 5 (97), 87-93 (1998).
  43. Witz, C. A., Monotoya-Rodriguez, I. A., Schenken, R. S. Whole explants of peritoneum and endometrium: a novel model of the early endometriosis lesion. Fertility and sterility. 71, 56 (1999).
  44. Khan, K. N., et al. Higher activity by opaque endometriotic lesions than nonopaque lesions. Acta obstetricia et gynecologica Scandinavica. 83, 375-382 (2004).
  45. Koks, C. A., Groothuis, P. G., Dunselman, G. A., de Goeij, A. F., Evers, J. L. Adhesion of shed menstrual tissue in an in-vitro model using amnion and peritoneum: a light and electron microscopic study. Hum. Reprod. 14, 816-822 (1999).
  46. Koks, C. A. M., et al. Menstruum induces changes in mesothelial cell morphology. Gynecol. Obstet. Invest. 50, 13 (2000).
  47. Tabibzadeh, S., Kong, Q. F., Kapur, S., Satyaswaroop, P. G., Aktories, K. Tumour necrosis factor-‡-mediated dyscohesion of epithelial cells is associated with disordered expression of cadherin/·-catenin and disassembly of actin filaments. Hum. Reprod. 10, 994 (1995).
  48. Fujii, H., Fujiwara, H., Horie, A., Sato, Y., Konishi, I. Ephrin A1 induces intercellular dissociation in Ishikawa cells: possible implication of the Eph-ephrin A system in human embryo implantation. Hum. Reprod. , (2010).
  49. Fujiwara, H., et al. Human endometrial epithelial cells express ephrin A1: possible interaction between human blastocysts and endometrium via Eph-ephrin system. The Journal of clinical endocrinology and metabolism. 87, 5801-5807 (2002).
  50. Hurd, W. W. Criteria that indicate endometriosis is the cause of chronic pelvic pain. Obstet. Gynecol. 92, 1029 (1998).

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