JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Потеря целостности перитонеального предоставляет новую парадигму для понимания и лечения хронических тазовых болей у женщин с легкой формой эндометриоза и могут быть легко обнаружены с помощью интраоперационной закапывания красителя во время лапароскопии.

Аннотация

Эндометриоз является распространенным заболеванием, влияющие от 40 до 70% женщин репродуктивного возраста с хронической тазовой боли (CPP) и / или бесплодия. Целью данного исследования было продемонстрировать использование синего красителя (метиленового синего) для окрашивания поверхностей перитонеального во время лапароскопии (L / S) для определения потери целостности брюшины у пациентов с тазовой боли и подозреваемых эндометриоз. Сорок женщин с CPP и 5 женщин без боли были оценены в рамках данного экспериментального исследования. Во время L / S, концентрированный краситель распыляется на перитонеальных поверхностей, затем отсасывают и промывают раствор лактата Рингера. Области локализованных красителя были оценены на наличие видимых эндометриоидных поражений. Области интенсивного окрашивания перитонеального были резекции и некоторые зафиксирован в 2,5% буферной gluteraldehyde и рассмотрены сканирующей (СЭМ) электронная микроскопия. Синий поглощения красителя чаще встречается у женщин с эндометриозом и хронической тазовой болью, чем в контрольной (85% против 40%). Резекция синей стаиНед области выявлено эндометриоза с помощью СЭМ и потери перитонеального межклеточных контактов по сравнению с нормальным, не оставляет пятен брюшины. Затронутые брюшины был связан с видимым эндометриоидных имплантатов в большинстве, но не у всех пациентов. Субъективное облегчение боли сообщалось, в 80% случаев. На основе сканирующей электронной микроскопии, можно заключить, что клетки эндометрия выходят далеко за пределы видимой имплантаты эндометриоза и, кажется, нарушают основные мезотелия. Тонкие поражения эндометриозом поэтому может вызвать боли в области таза на нарушение целостности перитонеальной, что позволяет менструальной крови или овуляторный и связанных с ним болей факторов доступа к основным сенсорные нервы. Полная резекция пострадавших брюшины может обеспечить лучшее долгосрочное лечение эндометриоза и CPP. Этот простой прием, кажется, улучшает обнаружение тонких или около невидимой эндометриоза у женщин с CPP и минимальные визуальные результаты на L / S и может служить для повышения точности диагностики эндометриозапри лапароскопии.

протокол

1. Отбор пациентов

  1. У женщин с хронической тазовой боли проходят историю и физический осмотр.
  2. Локализация боли, сроки по отношению к менструального цикла, связанного симптомов, включая раздражительность жалоб кишечник или мочевой пузырь жалобы отметили и записали.
  3. Женщин, перенесших лапароскопию которые согласились возможной резекции эндометриоз и использования их тканей для исследования.

2. Лапароскопической техники

  1. Лапароскопия выполняется с помощью стандартных методов, с помощью 5 мм порт пуповины и дополнительного 5 мм порта в нижней части живота.
  2. Тщательное обследование органов малого таза проводится соотносить любые выводы эндометриоза с дооперационной локализация боли, как указано пациента.
  3. Краситель метиленовый синий смешивают 1:200 стерильным физиологическим раствором и вводят на тазовой поверхности с помощью аспирационная биопсия.
  4. Всасывание орошения осуществляется для удаления избыткакрасителей и промыть брюшную поверхность.
  5. Таза осмотр и области синего красителя записываются.
  6. Когда это возможно, резекция пораженных участков брюшины происходит.

3. Сканирующая электронная микроскопия

  1. Перитонеальный разделы пришивается к стерильным платы telfa для выравнивания образца и поддержания ориентации (внутрибрюшинном стороной вверх) и помещен в gluteraldehyde фиксатором (Sigma, Сент-Луис, Миссури) для SEM.
  2. Образцы были ориентированы и пост-фиксировали в 1% буфером осмия в течение 1 часа и обезвоженной с последовательной концентрации этанола.
  3. Образцы сушат с использованием жидкой двуокиси углерода и установлен на алюминиевые заглушки сканирования электронным микроскопом с коллоидной массы серебра и покрыты напылением золота платинового сплава толщиной до 20 нм.
  4. Сканирующей электронной микроскопии проводили с использованием JEOL JSM Модель-6400 сканирующей микроскопии и микрофотографии полученных из 12 случайных местах.

Результаты

Например тонких эндометриоз, который был почти невидимым показано на рисунке 1а. Перед применением синего красителя нерегулярные области пунктирная брюшины была оценена способствовало отражению лапароскопической света. На рисунке 1B, появление этой же области после...

Обсуждение

Хронические тазовые боли у женщин является дорогостоящим и плохо понимают задачи 1. Дисменорея является наиболее распространенной формой боли в области таза, влияющие 60% женщин 2 и 72% подростков 3. Эндометриоз представляет собой воспалительное заболевание, которое пор...

Раскрытие информации

Нет конфликта интересов объявлены.

Благодарности

Мы хотели бы отметить прекрасную техническую помощь Ангела Houwing и помочь со сбором данных с Гретой Бушнелл.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
Название реагента Компания Номер в каталоге Комментарии (по желанию)
Метиленовый синий Американский реагентов NDC0517-0310-110 Смешанные 1:200 в физиологическом растворе

Ссылки

  1. Won, H. R., Abbott, J. Optimal management of chronic cyclical pelvic pain: an evidence-based and pragmatic approach. Int. J. Womens Health. 2, 263-277 (2011).
  2. Burnett, M. A., et al. Prevalence of primary dysmenorrhea in Canada. J. Obstet. Gynaecol. Can. 27, 765-770 (2005).
  3. Andersch, B., Milsom, I. An epidemiologic study of young women with dysmenorrhea. American journal of obstetrics and gynecology. 144 (82), 655-660 (1982).
  4. Stratton, P., Berkley, K. J. Chronic pelvic pain and endometriosis: translational evidence of the relationship and implications. Human reproduction update. , (2010).
  5. Garry, R., Clayton, R., Hawe, J. The effect of endometriosis and its radical laparoscopic excision on quality of life indicators. BJOG. 107, 44-54 (2000).
  6. Vercellini, P., et al. Endometriosis and pelvic pain: Relation to disease stage and localization. Fertility and sterility. 65, 299 (1996).
  7. Sinaii, N., Cleary, S. D., Younes, N., Ballweg, M. L., Stratton, P. Treatment utilization for endometriosis symptoms: a cross-sectional survey study of lifetime experience. Fertility and sterility. 87, 1277-1286 (2007).
  8. Maroun, P., Cooper, M. J., Reid, G. D., Keirse, M. J. Relevance of gastrointestinal symptoms in endometriosis. The Australian & New Zealand journal of obstetrics. 49, 411-414 (2009).
  9. Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. Endometriosis: cost estimates and methodological perspective. Human reproduction update. 13, 395-404 (2007).
  10. Sinaii, N., Cleary, S. D., Ballweg, M. L., Nieman, L. K., Stratton, P. High rates of autoimmune and endocrine disorders, fibromyalgia, chronic fatigue syndrome and atopic diseases among women with endometriosis: a survey analysis. Hum. Reprod. 17, 2715-2724 (2002).
  11. Chung, M. K., Chung, R. P., Gordon, D. Interstitial cystitis and endometriosis in patients with chronic pelvic pain: The "Evil Twins" syndrome. JSLS: Journal of the Society of Laparoendoscopic Surgeons / Society of Laparoendoscopic Surgeons. 9, (2005).
  12. Hadfield, R., Mardon, H., Barlow, D., Kennedy, S. Delay in the diagnosis of endometriosis: A survey of women from the USA and the UK. Hum. Reprod. 11, 878 (1996).
  13. D'Hooghe, T. M., Debrock, S., Hill, J. A., Meuleman, C. Endometriosis and subfertility: is the relationship resolved?. Seminars in reproductive medicine. 21, 243-254 (2003).
  14. Stegmann, B. J., et al. Using location, color, size and depth to characterize and identify endometriosis lesions in a chort of 133 women. Fertility and sterility. 89, 1632-1636 (2008).
  15. Howard, F. M. The role of laparoscopy in the chronic pelvic pain patient. Clinical obstetrics and gynecology. 46, 749-766 (2003).
  16. Brosens, I., Vasquez, G., Gordts, S. Scanning electron microscopy study of the pelvic peritoneum in unexplained infertility and endometriosis. Fertility and sterility. 41, 21S (1984).
  17. Donnez, J., Van Langendonckt, A. Typical and subtle atypical presentations of endometriosis. Curr Opin Obstet Gynecol. 16, 431-437 (2004).
  18. Murphy, A. A., Green, W. R., Bobbie, D., dela Cruz, Z. C., Rock, J. A. Unsuspected endometriosis documented by scanning electron microscopy in visually normal peritoneum. Fertility and sterility. 46, 522 (1986).
  19. Vasquez, G., Cornillie, F., Brosens, I. Peritoneal endometriosis: scanning electron microscopy and histology of minimal pelvic endometriotic lesions. Fertility and sterility. 42, 696 (1984).
  20. Berkley, K. J., Cason, A., Jacobs, H., Bradshaw, H., Wood, E. Vaginal hyperalgesia in a rat model of endometriosis. Neuroscience. 306, 185-188 (2001).
  21. Berkley, K. J., Rapkin, A. J., Papka, R. E. The pains of endometriosis. Science. 308, 1587-1589 (2005).
  22. Morrison, T. C., Dmitrieva, N., Winnard, K. P., Berkley, K. J. Opposing viscerovisceral effects of surgically induced endometriosis and a control abdominal surgery on the rat bladder. Fertility and sterility. 86, 1067-1073 (2006).
  23. Al-Jefout, M., et al. Diagnosis of endometriosis by detection of nerve fibres in an endometrial biopsy: a double blind study. Hum. Reprod. 24, 3019-3024 (2009).
  24. Mechsner, S., et al. A pilot study to evaluate the clinical relevance of endometriosis-associated nerve fibers in peritoneal endometriotic lesions. Fertility and sterility. , (2008).
  25. Tokushige, N., Markham, R., Russell, P., Fraser, I. S. Nerve fibres in peritoneal endometriosis. Hum. Reprod. 21, 3001-3007 (2006).
  26. Sanfilippo, J. S., Williams, R. S., Yussman, M. A., Cook, C. L., Bissonnette, F. Substance P in peritoneal fluid. Am. J. Obstet. Gynecol. 166, 155-159 (1992).
  27. Scholl, B., Bersinger, N. A., Kuhn, A., Mueller, M. D. Correlation between symptoms of pain and peritoneal fluid inflammatory cytokine concentrations in endometriosis. Gynecol. Endocrinol. 25, 701-706 (2009).
  28. Aghaey Meibody, F., et al. Diagnosis of endometrial nerve fibers in women with endometriosis. Archives of gynecology and obstetrics. , (2010).
  29. Huhnel, W., Beier, H. M. Studies on the innervation of the endometrium. Cell and tissue research. 167, 527-536 (1976).
  30. Tokushige, N., Markham, R., Russell, P., Fraser, I. S. High density of small nerve fibres in the functional layer of the endometrium in women with endometriosis. Hum. Reprod. 21, 782-787 (2006).
  31. Rauh-Hain, J. A., Laufer, M. R. Increased diagnostic accuracy of laparoscopy in endometriosis using indigo carmine: a new technique. Fertil. Steril. 95, 1113-1114 (2011).
  32. Howard, F., Howard, F. M., Perry, C. P., Carter, J. E., El-Minawi, A. M. . Pelvic Pain: Diagnosis and Management. , 125-150 (2000).
  33. Sutton, C. J. G., Ewen, S. P., Whitelaw, N., Haines, P. Prospective, randomized, double-blind, controlled trial of laser laparoscopy in the treatment of pelvic pain associated with minimal, mild, and moderate endometriosis. Fertility and sterility. 62, 696 (1994).
  34. Berlanda, N., Vercellini, P., Fedele, L. The outcomes of repeat surgery for recurrent symptomatic endometriosis. Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 22, 320-325 (2010).
  35. Howard, F. M. The role of laparoscopy in chronic pelvic pain: promise and pitfalls. Obstet. Gynecol. Surv. 48, 357-387 (1993).
  36. Hayata, T., Matsu, T., Kawano, Y., Matsui, N., Miyakawa, I. Scanning electron microscopy of endometriotic lesions in the pelvic peritoneum and the histogenesis of endometriosis. Int. Fed. of Gyn. and Obs. 39, 311 (1992).
  37. Cheong, Y. C., et al. Peritoneal healing and adhesion formation/reformation. Human reproduction update. 7, 556-566 (2001).
  38. Witz, C. A., Cho, S., Centonze, V. E., Montoya-Rodriguez, I. A., Schenken, R. S. Time series analysis of transmesothelial invasion by endometrial stromal and epithelial cells using three-dimensional confocal microscopy. Fertility and sterility. 79, 770-778 (2003).
  39. Witz, C. A., et al. Culture of menstrual endometrium with peritoneal explants and mesothelial monolayers confirms attachment to intact mesothelial cells. Hum. Reprod. 17, 2832-2838 (2002).
  40. Witz, C. A., et al. An in vitro model to study the pathogenesis of the early endometriosis lesion. Annals of the New York Academy of Sciences. 955, 296-406 (2002).
  41. Witz, C. A., et al. Short-term culture of peritoneum explants confirms attachment of endometrium to intact peritoneal mesothelium. Fertility and sterility. 75, 385-390 (2001).
  42. Witz, C. A., Montoya-Rodriguez, I. A., Miller, D. M., Schneider, B. G., Schenken, R. S. Mesothelium expression of integrins in vivo and in vitro. J. Soc. Gynecol. Investig. 5 (97), 87-93 (1998).
  43. Witz, C. A., Monotoya-Rodriguez, I. A., Schenken, R. S. Whole explants of peritoneum and endometrium: a novel model of the early endometriosis lesion. Fertility and sterility. 71, 56 (1999).
  44. Khan, K. N., et al. Higher activity by opaque endometriotic lesions than nonopaque lesions. Acta obstetricia et gynecologica Scandinavica. 83, 375-382 (2004).
  45. Koks, C. A., Groothuis, P. G., Dunselman, G. A., de Goeij, A. F., Evers, J. L. Adhesion of shed menstrual tissue in an in-vitro model using amnion and peritoneum: a light and electron microscopic study. Hum. Reprod. 14, 816-822 (1999).
  46. Koks, C. A. M., et al. Menstruum induces changes in mesothelial cell morphology. Gynecol. Obstet. Invest. 50, 13 (2000).
  47. Tabibzadeh, S., Kong, Q. F., Kapur, S., Satyaswaroop, P. G., Aktories, K. Tumour necrosis factor-‡-mediated dyscohesion of epithelial cells is associated with disordered expression of cadherin/·-catenin and disassembly of actin filaments. Hum. Reprod. 10, 994 (1995).
  48. Fujii, H., Fujiwara, H., Horie, A., Sato, Y., Konishi, I. Ephrin A1 induces intercellular dissociation in Ishikawa cells: possible implication of the Eph-ephrin A system in human embryo implantation. Hum. Reprod. , (2010).
  49. Fujiwara, H., et al. Human endometrial epithelial cells express ephrin A1: possible interaction between human blastocysts and endometrium via Eph-ephrin system. The Journal of clinical endocrinology and metabolism. 87, 5801-5807 (2002).
  50. Hurd, W. W. Criteria that indicate endometriosis is the cause of chronic pelvic pain. Obstet. Gynecol. 92, 1029 (1998).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

70SEM

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены