Comece criando uma imagem composta usando as quatro imagens obtidas de cada mouse. Utilize um editor gráfico para alinhar todos os vasos sanguíneos, empregue os padrões da cabeça do nervo óptico e dos vasos sanguíneos como pontos de referência para alinhar a sobreposição de grama da fibra composta, as imagens compostas e as imagens confocais da mesma retina coradas com ICAM2, para alcançar o alinhamento in vivo e ex vivo. O grama de fibra vis-oct composto é comparado com a imagem confocal correspondente da retina plana montada.
Imunocoloração com TUJ1 para axônios RGC. Os vasos sanguíneos exibem estruturas ramificadas distinguíveis que podem ser combinadas com os vasos sanguíneos marcados com ICAM2 na imagem confocal. A comparação lado a lado entre a microscopia confocal ex vivo e a vis-oct in vivo revelou redes idênticas de feixes de axônios RGC e vasculatura retiniana circundante.
