Nosso protocolo é significativo porque representa um novo paradigma para avaliar os efeitos do estresse crônico, especificamente o estresse psicossocial, sobre os desfechos da gravidez. Neste protocolo, expõemos camundongos grávidas a vários insultos psicossociais de diferentes intensidades de forma imprevisível. Paradigmas anteriores do modelo animal empregavam estressores físicos ou um número limitado de estressores administrados repetidamente, o que não reflete a experiência das mulheres durante a gravidez.
Nosso modelo crônico de estresse psicossocial supera essas limitações. Este método tem amplas ramificações para diversas áreas de pesquisa, incluindo saúde mental materna e pesquisa relacionada ao desenvolvimento infantil adverso, e de forma mais ampla, para a compreensão das origens do desenvolvimento da doença adulta através de eventos intrauterinos adversos. Antes de iniciar cada estressor no paradigma CGS, leve os ratos do grupo CGS da sala de alojamento para a sala designada para CGS.
Exponha os camundongos a diferentes estressores após um regime de estresse de 11 dias que vai do dia gestacional 6,5 a 17,5. Para expor os ratos a objetos estranhos, distribua aleatoriamente seis bolinhas de gude ou seis Legos de diferentes formas em uma gaiola estática limpa com cama de rato sem os filhotes de rato. Coloque todos os ratos de uma gaiola em casa na gaiola estática com objetos estranhos por duas horas, em seguida, devolva os ratos para sua gaiola doméstica.
Para expor os ratos ao odor predador, coloque um centímetro de cama suja de ratos fêmeas em uma gaiola estática limpa sem cama de rato ou nestlets. Coloque todos os ratos de uma gaiola em casa na gaiola estática com cama suja de rato por duas horas, em seguida, devolva os ratos para sua gaiola doméstica. Para expor os ratos a uma inclinação da gaiola, coloque todos os ratos de uma gaiola em uma gaiola estática limpa com cama de rato sem os filhotes.
Mantenha a gaiola inclinada em um ângulo de 30 graus contra a parede por duas horas, em seguida, devolva os ratos para sua gaiola doméstica. Para expor os ratos a mudanças frequentes de cama, coloque todos os ratos de uma gaiola em uma gaiola estática limpa com cama de rato sem os filhotes. A cada 10 minutos, mova suavemente os ratos para uma gaiola limpa diferente e substitua a cama do mouse.
Depois de duas horas, devolva os ratos para sua gaiola. Para expor os ratos à remoção de roupas de cama, coloque todos os ratos de uma gaiola em uma gaiola estática vazia e limpa sem cama de rato ou nestlets por duas horas, em seguida, devolva os ratos para sua gaiola doméstica. Para expor os ratos ao movimento em um agitador, coloque todos os ratos de uma gaiola em uma gaiola estática limpa com cama de rato sem os filhotes.
Coloque a gaiola estática em cima de um agitador de laboratório recíproco definido para 140 golpes por minuto durante duas horas, em seguida, devolva os ratos para sua gaiola doméstica. Para expor os ratos às luzes durante a noite, coloque todos os ratos de uma gaiola em uma gaiola estática limpa com cama de rato sem os filhotes. Mantenha as luzes acesas durante a noite para interferir com o ciclo escuro.
No dia seguinte, devolva os ratos para sua gaiola. Para expor um rato a novos companheiros de gaiola, transfira o rato para uma gaiola estática limpa com cama de rato contendo dois ratos fêmeas desconhecidos. Deixe o rato na gaiola estática com os companheiros de gaiola desconhecidos durante a noite.
No dia seguinte, devolveu o rato para sua gaiola com colegas de gaiola conhecidos. Para expor os ratos à roupa de cama molhada, saturar a cama do rato em uma gaiola estática com água limpa mantida a 24 graus Celsius. Coloque todos os ratos de uma gaiola em casa na gaiola estática com roupa de cama molhada durante a noite.
No dia seguinte, devolva os ratos para sua gaiola. Após o regime de estressor ser concluído no dia gestacional 17.5, abrigam todos os camundongos experimentais para se prepararem para a parturição e avaliações funcionais a jusante. Expor camundongos gestantes ao CGS causa alterações nos parâmetros crônicos relevantes para o estresse, como a redução do ganho de peso corporal durante a gravidez e o aumento dos pesos das glândulas suprarrenais no período pós-parto.
É importante ressaltar que as barragens CGS exibem anormalidades pós-parto e função neuroendócrina materna, como evidenciado pelo aumento dos níveis de corticosterona sérico após um novo insulto agudo. Além disso, as barragens cgs apresentam alterações no cuidado materno, refletidas pelo aumento do grau de fragmentação dos sinais maternos recebidos pelos filhotes. A duração média das lutas de lambida/preparação é reduzida enquanto o número médio de lutas é aumentado, indicando numerosos episódios curtos de comportamento de nutrição.
A preferência por sacarose também é deprimida nas barragens cgs quando comparada com as barragens de controle, sugerindo a presença de anedonia. Por fim, as barragens CGS também apresentam comportamentos relacionados à ansiedade aumentados, medidos por uma redução do tempo gasto nos quadrantes abertos do EZM quando comparados às barragens de controle. Na prole, a exposição ao CGS no útero resulta em diminuição do ganho de peso durante o pós-natal do pós-natal de 7 a 21 anos, embora não haja diferenças ao nascer.
Essa redução do ganho de peso corporal está presente em ambos os sexos. Ao tentar esse procedimento, estabelecer um cronograma para a obtenção de gestações cronometradas e implementar consistentemente toda a série, os estressores psicossociais imprevisíveis variáveis são críticos. Essa técnica pode ajudar a responder a perguntas interessantes, como o estresse psicossocial materno pode causar efeitos específicos do sexo na função placentária ou no desenvolvimento e comportamento do cérebro dos filhos?
E esses efeitos podem ser revertidos ou modificados por intervenção farmacológica ou assistência materna pós-natal?
