O modelo cirúrgico de ligadura permanente da artéria esquerda em camundongos pode ser utilizado para investigar a fisiopatologia e a resposta inflamatória associada após o infarto do miocárdio. Este método fornece um modelo de mouse confiável e produtível de MI, que é fácil, seguro e menos invasivo. Para começar, pré-aqueça um esterilizador de contas a 250 graus Celsius e coloque instrumentos cirúrgicos autoclavados nele por alguns minutos.
Garanta a profundidade da anestesia no rato, verificando a resposta a uma beliscão firme do dedo do pé. Pesar o rato para estimar a dosagem da droga analgésica pré-operatória buprenorfina e injetar a droga por via intraperitoneal. Apare a pele no lado esquerdo do tórax usando uma navalha elétrica.
Depois de desinfetar o local cirúrgico, coloque o rato na posição supina sobre uma tábua inclinada. Prenda a cabeça e os membros do rato usando um elástico preso aos incisivos superiores e fita adesiva, respectivamente. Aplique lubrificante oftálmico estéril nos olhos para evitar a secura durante a anestesia.
Abra a mandíbula e puxe suavemente a língua para fora da cavidade oral. Identifique a abertura da laringe iluminando a faringe oral usando um laringoscópio. Corte cerca de 0,5 centímetros de uma agulha de cateter de calibre 24 e insira a agulha contundente no escudo de plástico.
Direcione a agulha contundente com o escudo de plástico para a traqueia. Retire a agulha, deixando o escudo de plástico na traqueia. Ajustar o ventilador a uma frequência respiratória de 137 batimentos por minuto, otimizada para os camundongos utilizados neste estudo e volume corrente de 0,18 capacidade de fechamento.
Conecte os tubos do respirador ao escudo do cateter e confirme a intubação correta procurando um movimento torácico sincronizado com o ventilador. Desconecte o tubo do respirador do escudo do cateter e coloque o animal na posição supina em uma placa cirúrgica pré-aquecida com temperatura controlada. Reconecte o mouse ao ventilador.
Depois de desinfetar o local cirúrgico, levante suavemente a pele usando um par de pinças e faça uma pequena incisão cutânea transversal ao longo da linha entre os músculos peitoral maior e menor esquerdo usando um par de tesouras cirúrgicas. Separe os músculos peitorais subjacentes com fórceps e tesouras dissecadas. Depois de fazer uma incisão no terceiro espaço intercostal, estique suavemente as costelas usando afastadores para expor o ventrículo esquerdo.
Mova a gordura pericárdica para o lado e localize a artéria coronária esquerda, que vai da borda do átrio esquerdo em direção ao ápice do coração. Passe um 8-0 sutura de nylon sob a artéria coronária esquerda com a ajuda de um suporte de agulha. Legar a artéria coronária esquerda com um nó duplo seguido de um segundo nó.
Remova os afastadores e insira uma agulha de cateter de calibre 22 na cavidade torácica. Remova a agulha, deixando a ponta do escudo de plástico na cavidade torácica. Feche a caixa torácica usando uma sutura de nylon 4-0.
Conecte uma seringa ao escudo de plástico de calibre 22 e remova lentamente o excesso de ar preso na cavidade torácica, pressionando suavemente o peito para estabelecer uma pressão de ar negativa. Remova o escudo de plástico. Desligue a fonte de isoflurano e coloque o rato no ventilador que fornece oxigénio.
Uma respiração espontânea do rato começa, desligue o ventilador. Mantenha o mouse sob uma lâmpada de calor e monitore até que ele esteja acordado. O animal não deve ser deixado sozinho até que tenha recuperado a consciência suficiente para manter a decúbito esternal.
Monitore o mouse diariamente para qualquer sinal de dor ou desconforto. Continue a injeção intraperitoneal de buprenorfina a cada 6 a 8 horas por mais dois dias após a cirurgia. O ECG ativo e os sinais respiratórios foram verificados antes da aquisição dos dados ecocardiográficos.
A medida ecocardiográfica dos parâmetros funcionais cardíacos foi observada 28 dias após a ligadura da artéria coronária esquerda. Foram observadas as imagens do modo M da visão peroneal de eixo curto dos corações SHAM e IM. As imagens do IAM mostraram movimento defeituoso da parede cardíaca após ligadura da artéria coronária esquerda.
Indicadores de insuficiência cardíaca, como aumento da massa ventricular esquerda, diminuição da fração de ejeção e diminuição do débito cardíaco foram observados no grupo IM em comparação com o grupo SHAM. A coloração tricrômica de Masson das seções dos ventrículos inferior, médio e superior mostrou aumento da coloração de colágeno no coração infartado, indicando fibrose aumentada. Na maioria dos casos, a artéria não é viável.
No entanto, a ligadura do tecido miocárdico 2 a 4 milímetros abaixo da borda do átrio esquerdo resulta em ligadura eficiente da artéria.
