Consideramos este protocolo significativo, pois demonstra um método não invasivo, simples e fácil de avaliar ao longo do tempo indicadores-chave para o diagnóstico da doença hepática. Esta metodologia de imagem permite a análise ao longo do tempo do estado hepático, avaliação do volume sanguíneo relativo, diâmetro da veia porta, intensidade da rede vascular, todos os parâmetros importantes da patologia hepática. Compreender as adaptações da rede vascular hepática durante a progressão da DHGNA e correlacioná-la com marcadores específicos como esteatose, inflamação e fibrose pode ajudar a estabelecer novos esquemas terapêuticos eficazes.
Essa técnica auxilia na identificação desses marcadores e também atualiza o valor de camundongos em estudos pré-clínicos com foco no desenvolvimento de novas terapias contra a progressão da doença. Para começar, coloque o animal anestesiado no berço do tomógrafo. Aplique pomada oftálmica, prenda o cone do nariz e defina os parâmetros de varredura no tomógrafo.
Prepare o cateter da veia caudal e coloque o mouse em uma cama para aquecer a cauda em água morna. Inserir o cateter na veia caudal e administrar o primeiro contraste através de uma injeção, realizada de forma lenta e manual com duração de um a três minutos. Em seguida, adquira varreduras de corpo inteiro e fígado em diferentes pontos de tempo.
Seguir o mesmo procedimento para a administração do segundo meio de contraste, 10 dias após a leitura final com o primeiro meio de contraste. Depois de carregar o arquivo DICOM da varredura pré-contraste, ajuste o contraste para ver o fígado, o baço e o tecido adiposo branco claramente. Na ferramenta ROI 3D, selecione adicionar ROI para gerar várias ROIs para realizar a amostragem nas áreas onde o fígado, o baço e o tecido adiposo parecem claros, sem vasos sanguíneos e gordura aparentes.
No modo de pintura, escolha Esfera. Marque a caixa somente 2D e selecione um diâmetro de oito pixels no menu suspenso para pintar o ROI sobre os dados. A partir do recurso de dilatação de erosão, escolha menos um erode.
Realize a amostragem segmentando as ROIs 2D nas áreas de interesse usando a ferramenta Esfera no plano transversal. Vá para navegação e selecione mostrar tabela para exibir a tabela de quantificação que contém os valores de unidade de campo de cães calculados para cada ROI. Em seguida, conecte os valores a essa equação.
Calcule a porcentagem de gordura no fígado. Carregue o arquivo DICOM de varredura eXIA e ajuste o contraste para ver o fígado, o baço e o ventrículo esquerdo claramente. Na ferramenta ROI 3D, selecione adicionar ROI para segmentar vários ROIS para o fígado.
No modo de pintura, selecione Somente 2D e escolha Esfera adicionar um diâmetro de oito pixels para pintar o ROI sobre os dados. A partir do recurso de dilatação de erosão, escolha menos um erode. Especifique um nome e uma cor para cada ROI e selecione mostrar tabela para exibir a tabela de quantificação contendo os valores de UH calculados para cada ROI.
Após repetir esses passos para obtenção do órgão PV t0, insira os valores na equação mostrada na tela para extrair a porcentagem de contraste correspondente à captação funcional do tecido de transferência lipídica. Carregue o arquivo DICOM de varredura ExiTron e ajuste o contraste para ver a rede vascular do fígado claramente. Selecione adicionar ROI para gerar um ROI 3D para o fígado.
Defina o ROI do fígado marcando a área desejada. Em seguida, escolha o ROI em segundo plano no seletor de ROI. Clique no ícone Executar corte, para remover o fundo sem alterar o ROI do fígado.
Ative o visualizador de projeção de intensidade máxima. Em seguida, sob algoritmos de segmentação indicados pelo ícone da varinha mágica, selecione o limiar conectado para resegmentar o ROI do fígado. Definir os limiares inserindo os valores mínimos e máximos e obter a rede vascular.
Novamente, remova o tecido hepático de fundo para obter uma representação clara da rede vascular. Depois de carregar o arquivo DICOM de varredura ExiTron, ajuste o contraste para ver o fígado, o baço e o ventrículo esquerdo claramente. Selecione adicionar ROI e segmentar ROIs para o fígado e um grande vaso sanguíneo.
Defina as camadas de segmentação para gerar ROIs 2D para cada tecido. Repita as etapas do arquivo DICOM pré-contraste para obter o brilho médio do fígado antes da injeção do meio de contraste. Para o diâmetro da veia porta, localize os planos transversais de três a quatro cortes acima da junção das veias mesentérica superior e esplênica e, em seguida, vá para navegação seguida de saneamento da distância, selecione linha para medir a distância exata entre dois pontos.
Os valores médios de contraste são apresentados por esses dados agrupados. O ensaio de captação tecidual funcional indicou maior acúmulo e depuração mais lenta do contraste eXIA em camundongos com doença hepática gordurosa não alcoólica em comparação com controles saudáveis. Esses resultados representativos indicam as diferenças na porcentagem de gordura hepática, volume da rede vascular hepática, diâmetro da veia porta e volume sanguíneo relativo hepático entre camundongos com doença hepática gordurosa não alcoólica e controles saudáveis.
A micro-TC sem contraste indicou maior percentual de gordura hepática em camundongos com doença hepática gordurosa não alcoólica em comparação aos controles. Da mesma forma, um maior volume da rede vascular hepática, volume sanguíneo relativo hepático e um maior diâmetro da veia porta foram encontrados em camundongos com doença hepática gordurosa não alcoólica em comparação com controles saudáveis. A coisa mais importante a lembrar ao tentar esta técnica é ser constantemente preciso na região anatômica selecionada.
A escolha do ponto anatômico errado pode levar a resultados não precisos. Seguindo essa metodologia e protocolo, uma avaliação precisa do estadiamento da doença hepática pode ser realizada. Assim, pode atuar como uma plataforma específica para avaliar a eficácia de novos medicamentos.
Essa técnica abre caminho para maneiras novas, mais fáceis e mais precisas de avaliar patologias hepáticas e iniciar ensaios relevantes de desenvolvimento de medicamentos.
