Мы считаем этот протокол значимым, поскольку он демонстрирует неинвазивный, простой и легкий метод оценки ключевых показателей диагностики заболеваний печени с течением времени. Данная методика визуализации позволяет анализировать во времени состояние печени, оценивать относительный объем крови, диаметр воротной вены, интенсивность сосудистой сети, все важные параметры патологии печени. Понимание адаптации сосудистой сети печени во время прогрессирования НАЖБП и корреляция этого со специфическими маркерами, такими как стеатоз, воспаление и фиброз, может помочь в разработке новых эффективных схем терапии.
Этот метод помогает идентифицировать такие маркеры, а также повышает ценность мышей в доклинических исследованиях, направленных на разработку новых методов лечения прогрессирования заболевания. Для начала поместите животное, находящееся под наркозом, в люльку компьютерного томографа. Нанесите офтальмологическую мазь, закрепите носовой конус и установите параметры сканирования на компьютерном томографе.
Подготовьте катетер для вен хвоста и положите мышь на кровать, чтобы согреть хвост в теплой воде. Введите катетер в хвостовую вену и введите первое контрастное вещество с помощью инъекции, выполняемой медленно и вручную продолжительностью от одной до трех минут. Затем сделайте сканирование всего тела и печени в разные моменты времени.
Следуйте той же процедуре для введения второго контрастного вещества через 10 дней после окончательного считывания первого контрастного вещества. После загрузки DICOM-файла предварительного контрастного сканирования отрегулируйте контрастность, чтобы четко видеть печень, селезенку и белую жировую ткань. В инструменте 3D ROI выберите добавить ROI, чтобы создать несколько ROI для выполнения отбора проб в областях, где печень, селезенка и жировая ткань выглядят чистыми, без видимых кровеносных сосудов и жира.
В разделе «Режим рисования» выберите «Сфера». Установите флажок Только 2D и выберите диаметр в восемь пикселей из выпадающего меню, чтобы отобразить ROI поверх данных. В узле эрозионный расширение выберите минус один эрозия.
Выполните выборку, сегментировав 2D-ROI по областям интереса с помощью инструмента Сфера на поперечной плоскости. Перейдите в навигацию и выберите Показать таблицу, чтобы отобразить таблицу количественной оценки, содержащую рассчитанные значения единиц измерения поля гончих для каждого ROI. Затем подставьте значения в это уравнение.
Рассчитайте процентное содержание жира в печени. Загрузите файл DICOM-сканирования eXIA и отрегулируйте контрастность, чтобы четко видеть печень, селезенку и левый желудочек. В инструменте 3D ROI выберите добавить ROI, чтобы сегментировать несколько ROI для печени.
В разделе «Режим рисования» выберите «Только 2D» и выберите «Сфера», чтобы добавить диаметр в восемь пикселей, чтобы отобразить ROI поверх данных. В узле эрозионный расширение выберите минус один эрозия. Укажите имя и цвет для каждой рентабельности инвестиций и выберите Показать таблицу, чтобы отобразить таблицу количественной оценки, содержащую рассчитанные значения HU для каждой рентабельности инвестиций.
После повторения этих шагов для получения органа ФВ t0 вставьте значения в уравнение, показанное на экране, чтобы извлечь процентное контрастное значение, соответствующее функциональному переносу липидов в тканях. Загрузите файл DICOM сканирования ExiTron и отрегулируйте контрастность, чтобы четко видеть сосудистую сеть печени. Выберите добавить ROI, чтобы создать 3D-ROI для печени.
Определите ROI печени, отметив нужную область. Затем выберите фоновую рентабельность инвестиций в селекторе ROI. Нажмите на иконку «Выполнить вырезание», чтобы удалить фон без изменения ROI печени.
Активируйте средство просмотра проекций максимальной интенсивности. Затем в разделе алгоритмов сегментации, обозначенных значком волшебной палочки, выберите подключенное пороговое значение, чтобы повторно сегментировать ROI печени. Установите пороговые значения, введя минимальное и максимальное значения, и получите сосудистую сеть.
Опять же, удалите фоновую ткань печени, чтобы получить четкое представление о сосудистой сетке. После загрузки файла DICOM сканирования ExiTron отрегулируйте контрастность, чтобы четко видеть печень, селезенку и левый желудочек. Выберите добавить ROI и сегментировать ROI для печени и крупного кровеносного сосуда.
Определите слои сегментации для получения 2D-окупаемости инвестиций для каждой ткани. Повторите шаги для файла DICOM перед контрастированием, чтобы получить среднюю яркость печени до введения контрастного вещества. Для определения диаметра воротной вены найдите поперечные плоскости трех-четырех срезов выше места соединения верхней брыжеечной и селезеночной вен, а затем перейдите к навигации, за которой следует дистанционная санация, выберите линию для измерения точного расстояния между двумя точками.
Средние значения контрастности представлены этими сгруппированными данными. Анализ функционального поглощения тканей показал более высокое накопление и более медленный клиренс контрастного вещества eXIA у мышей с неалкогольной жировой болезнью печени по сравнению со здоровыми контрольными группами. Эти репрезентативные результаты указывают на различия в процентном соотношении жира в печени, объеме сосудистой сети печени, диаметре воротной вены и относительном объеме крови в печени между мышами с неалкогольной жировой болезнью печени и здоровой контрольной группой.
Микро-КТ без какого-либо контрастного вещества показала более высокий процент жира в печени у мышей с неалкогольной жировой болезнью печени по сравнению с контрольной группой. Аналогичным образом, более высокий объем сосудистой сети печени, относительный объем крови в печени и больший диаметр воротной вены были обнаружены у мышей с неалкогольной жировой болезнью печени по сравнению со здоровыми контрольными группами. Самое важное, что нужно помнить при использовании этой техники, - это постоянно быть точным в выбранной анатомической области.
Выбор неправильного анатомического места может привести к неточным результатам. Следуя этой методологии и протоколу, можно провести точную оценку стадии заболевания печени. Таким образом, он может выступать в качестве специфической платформы для оценки эффективности новых препаратов.
Этот метод прокладывает путь к новым, более простым и точным способам оценки патологий печени и инициирования соответствующих анализов по разработке лекарств.
