Isolamento e Cultura de Macrófagos e Fibroblastos Sinoviais Primários de Tecido de Artrite Murina

Ensaios baseados em células são necessários para esclarecer as funções moleculares. Em estudos de artrite, o método para isolar células primárias está bem estabelecido em fibroblastos sinoviais, mas não em macrófagos sinoviais. Portanto, desenvolvemos um protocolo para isolar e expandir macrófagos sinoviais e fibroblastos sinoviais de modelos de artrite.

Fibroblastos sinoviais primários do tecido da artrite murina têm contribuído para a elucidação de mecanismos moleculares na patogênese da artrite. Por outro lado, macrófagos derivados da medula óssea, macrófagos derivados de monócitos sanguíneos e linhagens celulares de macrófagos têm sido frequentemente utilizados como recursos de macrófagos para estudos de artrite. Uma vez que os macrófagos podem adquirir funções associadas ao seu microambiente, fontes gerais de macrófagos podem carecer de respostas específicas ao tecido da artrite.

Além disso, é difícil obter células sinoviais suficientes por triagem, pois a sinóvia murina é um tecido muito pequeno, mesmo em modelos de artrite. No método anterior de isolamento de fibroblastos sinoviais, macrófagos sinoviais foram descartados. Além disso, um método para isolar e expandir macrófagos residentes de alguns órgãos foi relatado.

Portanto, os protocolos existentes foram modificados em combinação para isolar e expandir macrófagos sinoviais e fibroblastos sinoviais do tecido da artrite murina. Este método pode isolar macrófagos e fibroblastos da sinóvia inflamatória com alta pureza, sendo simples e reprodutível. Este método permite a expansão de macrófagos sinoviais sob co-cultura com fibroblastos sinoviais.

Além disso, o método oferece uma vantagem, na medida em que os fibroblastos sinoviais podem ser usados com menos passagens. O protocolo estabelecido seria uma vantagem para a elucidação dos mecanismos patológicos na artrite reumatoide.