Análise de fluxo dual-reporter baseada em esferas fluorescentes magnéticas do bloqueio de anticorpos induzido pela vacina do peptídeo PDL1-Vaxx da interação PD-1/PD-L1

Nosso projeto liderado pelo professor Pravin Kaumaya está focado no desenvolvimento de vacinas de peptídeos de epítopos de células B que podem ser usadas para impulsionar o sistema imunológico para melhor lutar contra o câncer. Acreditamos que as vacinas peptídicas direcionadas a alvos de checkpoints imunológicos podem até ser combinadas com outras terapias para melhorar os resultados dos pacientes. Queríamos testar a capacidade de bloqueio de nossos anticorpos anti PD-L1 em um ensaio tradicional de microesferas onde a proteína PD-L1 recombinante humana estava ligada a esferas MagPlex.

Verificamos que, uma vez que o PD-L1 estava ligado às contas, eles tinham uma baixa capacidade de ligação para seu ligante PD-1. Isso nos impediu de usar essa via de bloqueio de testes. Quando a ligação da proteína às esferas inibe a ligação ao ligante ou aos anticorpos, o pré-tratamento com os anticorpos de teste em solução é uma opção, adicionando posteriormente esferas revestidas de ligante à mistura de bloqueadores alvo.

Sua interação pode ser examinada. Este pode ser um caminho diferente para estudar a mesma interação alvo-ligante-ligação Desenvolvemos vacinas contra o câncer B-Vaxx, PD1-Vaxx, PDL1-Vaxx e CTLA4-Vaxx. Essas vacinas têm como alvo o HER2 e vários marcadores de checkpoint imunológico estão envolvidos em várias formas de câncer.

B-Vaxx e PD1-Vaxx estão em testes clínicos em andamento na Austrália e nos EUA. Esperamos que nossas vacinas de checkpoint imunológico beneficiem mais pacientes. Em experimentos anteriores com microesferas, descobrimos que PD-1 interagiu bem com seu ligante PD-L1. Portanto, nós reprojetamos o protocolo, pré-ligando os anticorpos antipeptídeo PD-L1 à proteína PD-L1 biotinilada antes de adicionar as esferas MagPlex marcadas com PD-1.

Isso nos permitiu testar nossos anticorpos quanto à sua capacidade de bloquear a interação PD-1/PD-L1. Continuaremos a nos concentrar em imunoterapias combinadas que superam a resistência ao tratamento. Também queremos explorar terapias combinadas mais eficazes que inibam melhor o crescimento do tumor, previnam metástases e prolonguem as taxas de sobrevida dos pacientes.