Split Retina como uma Preparação Flatmount Melhorada para o Estudo de Neurônios da Camada Nuclear Interna na Retina de Vertebrados

Nosso grupo está interessado nos circuitos neuronais e mecanismos sinápticos subjacentes ao processamento visual na retina. O Morgans Lab está investigando mecanismos moleculares de adaptação à luz em células bipolares, e o Sivyer Lab está interessado em como os neurônios internos da retina contribuem para a função das células ganglionares. O acesso aos neurônios da camada internuclear na retina de montagem total é um desafio para estudos anatômicos e fisiológicos.

Os neurônios da camada internuclear são acessíveis em seções verticais, mas são muito poucos neurônios no campo de visão. Além disso, o fatiamento corta processos e conexões laterais que podem afetar os estudos fisiológicos. A remoção dos fotorreceptores na técnica de retina dividida melhora drasticamente a difusão de anticorpos para a retina interna, o que torna a imunomarcação de alvos internos da retina mais de 20 vezes mais rápida quando comparada à retina de montagem inteira tradicional.

A retina dividida também melhora muito o acesso aos neurônios da camada internuclear durante a eletrofisiologia do patch clamp. A técnica de retina dividida abrirá portas para novas abordagens e acelerará o ritmo de nossos experimentos. Por exemplo, planejamos usar esta técnica para estudar a entrada de células bipolares para células ganglionares de melanopsina expressando canalrodopsina nas células bipolares.