Split Retina als verbessertes Flatmount-Präparat zur Untersuchung von Neuronen der inneren Kernschicht in der Netzhaut von Wirbeltieren

Unsere Gruppe interessiert sich für die neuronalen Schaltkreise und synaptischen Mechanismen, die der visuellen Verarbeitung in der Netzhaut zugrunde liegen. Das Morgans-Labor untersucht molekulare Mechanismen der Lichtanpassung in bipolaren Zellen, und das Sivyer-Labor interessiert sich dafür, wie innere Netzhautneuronen zur Funktion von Ganglienzellen beitragen. Der Zugang zu Neuronen der internukleären Schicht in der gesamten Netzhaut ist sowohl für anatomische als auch für physiologische Studien eine Herausforderung.

Neuronen der internukleären Schicht sind in vertikalen Abschnitten zugänglich, aber es sind nur sehr wenige Neuronen im Sichtfeld. Darüber hinaus werden durch das Schneiden laterale Prozesse und Verbindungen durchtrennt, was sich auf physiologische Untersuchungen auswirken kann. Die Entfernung der Photorezeptoren bei der Split-Retina-Technik verbessert die Diffusion von Antikörpern in die innere Netzhaut erheblich, was die Immunmarkierung von inneren Netzhautzielen im Vergleich zur herkömmlichen Netzhaut über 20-mal schneller macht.

Die gespaltene Netzhaut verbessert auch den Zugang zu Neuronen der internukleären Schicht während der Elektrophysiologie der Patch-Klemme erheblich. Die Split-Retina-Technik wird Türen zu neuen Ansätzen öffnen und das Tempo unserer Experimente beschleunigen. Zum Beispiel planen wir, diese Technik zu verwenden, um den Input von Bipolarzellen zu Melanopsin-Ganglienzellen zu untersuchen, indem wir Channelrhodopsin in den Bipolarzellen exprimieren.