Isolamento imunomagnético das células-tronco CD34⁺ residentes na parede vascular de camundongos

As células-tronco CD34+ residentes na parede vascular são cada vez mais reconhecidas por seu papel crucial na regulação da remodelação vascular pós-lesão. Estabelecer um método estável e eficiente para cultivar células CD34+ funcionais é essencial para investigar melhor os mecanismos participantes em várias condições fisiológicas e patológicas. Esta técnica combina triagem de esferas magnéticas e citometria de fluxo para purificar as células-tronco CD34 + residentes cultivadas primárias.

Em seguida, as células purificadas podem ser identificadas funcionalmente por meio de coloração imunofluorescente e imagens de cálcio. Devido à heterogeneidade fenotípica e funcional das células-tronco CD34+ residentes na parede nervosa vascular, será necessário identificar o tipo subcelular específico de células CD34+ vasculares residentes. Apresentamos uma metodologia refinada para a cultura, identificação e avaliação funcional de células-tronco CD34+ residentes na parede vascular.

Essa nova abordagem abrange classificação magnética, citometria de fluxo, coloração por imunofluorescência e medição de sinalização de cálcio. Ao empregar essas técnicas, nosso estudo estabelece uma base sólida para futuras investigações abrangentes sobre a função sob regulação de células-tronco CD34+ receptoras em condições fisiológicas e patológicas.