Usamos uma abordagem de evolução dirigida para identificar capits virais adenoassociadas com maior tropismo para tipos de células humanas alvo. Através desta pesquisa, pretendemos produzir vetores virais adenoassociados recombinantes com melhor transdução de células-alvo e relevância clínica dentro do campo da terapia gênica. Nosso grupo recentemente desvisou vários sorotipos de AAV do fígado, incorporando resíduos de capsídeo originais a um sorotipo de AAV que naturalmente possui tropismo hepático diminuído.
Se expandido com sucesso para sorotipos adicionais, isso fornece a base para diminuir a dose clínica necessária de RAAV por injeção periférica e reduzir os desfechos adversos do paciente. O método de purificação IODIXanol, embora seja econômico, é difícil de escalar. Adicionalmente, em aplicações downstream, a abordagem de evolução dirigida é realizada com modelos animais ou in vitro.
Assim, o capsídeo isolado por evolução dirigida pode não transduzir alvos in vivo em humanos na mesma medida que em modelos pré-clínicos. Este protocolo é acessível e acessível para laboratórios menores. Além disso, este método produz vírus adenoassociados recombinantes de alta pureza que podem ser usados para aplicações pré-clínicas in vivo a jusante.
