Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Method Article
В этой статье описывается культура пациента ломтиками ткани для доставки генов исследования и последующего анализа экспрессии генов использованием ИВИС биолюминесценции изображений.
Это видео описывает использование тканей пациента, как бывшие модели естественных условиях для изучения доставки генов. Свежий ткани пациента получены во время операции нарезанный и поддерживаться в культуре. Бывшие модели системы естественных условиях позволяет физическая доставка генов в неповрежденной ткани пациента и экспрессии генов анализируется биолюминесценции визуализации с использованием системы ИВИС обнаружения. Биолюминесцентного системы обнаружения демонстрирует быстрое и точное количественное экспрессии генов в отдельных ломтиков без необходимости ткани жертвы. Эта культура срез ткани система может быть использована в самых разных типов тканей, включая нормальных и злокачественных тканей и позволяет изучать последствия гетерогенный характер неповрежденной ткани и высокая степень изменчивости между отдельными пациентами. Эта модель система может быть использована в определенных ситуациях в качестве альтернативы животных моделях и в качестве дополнительного доклинических режиме до входа в клинических испытаниях.
Подготовка медиа и реагенты
И. коллекции тканей и хранения
Утверждение для пациента коллекции тканей была получена из Клинические исследования этическим комитетом больницы Корк Обучение и информированное согласие было получено от пациентов за день до операции. Ткани печени была получена из пациентов, перенесших частичную резекцию печени злокачественных заболеваний.
II. Ткань подготовки ломтик и культуры
Нарезки проводили с использованием vibratome (Leica, Германия). Ткани нарезки система была использована в соответствии с инструкциями производителя. Подготовка ткани срез был выполнен под капотом стерильной используя инструменты очищаются 70% 2-пропанола. Толщина среза устанавливается в размере 2000 микрон и обработке с использованием поршневых лезвием на 22-26 оборотов в минуту.
III. Гена доставки срезы тканей
IV. Анализ экспрессии генов с биолюминесцентного анализа
Результаты В. представитель
Рисунок 1. Биолюминесцентный изображений пациента ломтика печени использованием ИВИС системы обнаружения.
Мы описываем бывших естественных тканей пациента методом культуры и биолюминесцентного системы обнаружения для оценки доставки генов в нефиксированной ткани человека. Метод предлагает простые и воспроизводимые способ ломтиками культивирования тканей. Он имеет значительный по...
Эта работа финансировалась через Корк Южной больнице Виктория университетской больницы груди фонда, ирландского общества рака (CRI07TAN) и Научно-исследовательского онкологического центра Корка. Репликация некомпетентных рекомбинантный аденовирус 5 частиц под транскрипционным контролем промотора CMV был своего рода подарок от профессора Эндрю Бейкер, Университет Глазго.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | |
PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | |
Firefly Luciferin | Biosynth International, Inc | ||
Dermabond | Johnson & Johnson | ||
Vibrotome | Leica Microsystems | VT 1000 A |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены